一种酸性试剂及其在分析皮克级抗体常规流速液质系统中的应用的制作方法

本发明属于抗体蛋白检测，涉及一种酸性试剂及其在分析皮克级抗体常规流速液质系统中的应用。

背景技术：

1、电喷雾离子化( electrospray ionization，esi) 技术是目前常用的生物分子质谱离子化技术之一。在esi过程中，蛋白质等生物大分子会携带多重电荷，形成多电荷离子。有效降低待测离子的质荷比( mass-to-charge ratio，m/z) ，扩大可检测分子量范围，从而提高检测灵敏度。但是常规电喷雾质谱的离子化效率较低，通常只有万分之几的物质能够被离子化。当样品量较低时，过低的离子化效率就会成为限制因素，导致质谱信号较低直至不出质谱信号，无法实现常规流速液相色谱质谱联用系统分析皮克级抗体蛋白分子量的需求。

2、虽然纳升级电喷雾离子源以及nanolc-ms/ms可以有效提升分析灵敏度，但是纳升级液质系统的稳定性不如常规流速液质系统，且普及率不如常规流速液质系统。因此直接提升常规流速液质系统的灵敏度有很高的现实意义。

技术实现思路

1、针对现有技术中常规流速液质系统在低样品量检测灵敏度不佳的问题，本发明通过经开发的酸性配方试剂，基于自动化程序的酸性配方试剂与惰性气体比例自动调节系统，使得常规流速液相色谱质谱联用系统对抗体蛋白的灵敏度可以提升100倍，即可以用于皮克级蛋白的分子量分析。

2、本发明公开了一种用于液质系统的酸性试剂，由c1-c3氟烷基醇、c1-c3的直链饱和脂肪酸、以及含氟乙酸组成。

3、按体积分数计，由50-80% c1-c3氟烷基醇、10-50% c1- c3的直链饱和脂肪酸、以及1-3%含氟乙酸组成。

4、c1-c3氟烷基醇选自三氟乙醇、二氟乙醇、一氟乙醇或三氟甲醇。

5、含氟乙酸选自三氟乙酸、二氟乙酸或一氟乙酸。

6、优选地，按体积分数计，所述酸性配方试剂为55~80%三氟乙醇、15~45%甲酸和2%三氟乙酸或55~80%三氟甲醇、15~45%甲酸和2%三氟乙酸。

7、按体积分数计，所述酸性配方试剂为75%三氟乙醇、23%甲酸和2%三氟乙酸。

8、本发明还公开了上述酸性试剂在分析皮克级抗体常规流速液质系统中的应用。

9、酸性试剂通过注入装置与惰性气体混合后，再注入到液质系统中与样品混合。

10、酸性试剂与惰性气体的体积分数比为1:4。

11、本发明相对于现有技术具有如下的显著优点及效果：

12、1、所需抗体蛋白样品的质量从纳克级下降到皮克级别。

13、2、常规流速液质分析方法灵敏度提升了至少100倍。

技术特征：

1.一种用于液质系统的酸性试剂，由c1-c3氟烷基醇、c1-c3的直链饱和脂肪酸、以及含氟乙酸组成。

2.如权利要求1所述的酸性试剂，其特征在于，按体积分数计，由50-80% c1-c3氟烷基醇、10-50% c1- c3的直链饱和脂肪酸、以及1-3%含氟乙酸组成。

3.如权利要求2所述的酸性试剂，其特征在于，c1-c3氟烷基醇选自三氟乙醇、二氟乙醇、一氟乙醇或三氟甲醇。

4.如权利要求3所述的酸性试剂，其特征在于，含氟乙酸选自三氟乙酸、二氟乙酸或一氟乙酸。

5.如权利要求4所述的酸性试剂，其特征在于，按体积分数计，所述酸性配方试剂为55~80%三氟乙醇、15~45%甲酸和2%三氟乙酸或55~80%三氟甲醇、15~45%甲酸和2%三氟乙酸。

6.如权利要求5所述的酸性试剂，其特征在于，按体积分数计，所述酸性配方试剂为75%三氟乙醇、23%甲酸和2%三氟乙酸。

7.如权利要求1-6任一项所述酸性试剂在分析皮克级抗体常规流速液质系统中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述酸性试剂通过注入装置与惰性气体混合后，再注入到液质系统中与样品混合。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述酸性试剂与惰性气体的体积分数比为1:4。

技术总结本发明涉及抗体蛋白检测技术领域，涉及一种酸性试剂及其在分析皮克级抗体常规流速液质系统中的应用。本发明公开了全新的酸性配方和酸性配方试剂与惰性气体的混合气在皮克级抗体的质谱检测技术中的应用。其中酸性配方试剂，可提高抗体蛋白分子在离子源中的带电荷能力；用于皮克级抗体的质谱分析提升离子化效率。技术研发人员：邵熙,夏梅玲,肖志华受保护的技术使用者：上海奥浦迈生物科技股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/2