GHR-106单克隆抗体作为GnRH拮抗剂的用途的制作方法

本发明的一些实施方案涉及免疫学和医学，包括用于治疗癌症和性激素相关的健康病症或疾病的医学的领域。本发明的一些实施方案涉及靶向促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone，gnrh)受体并用作gnrh拮抗剂的单克隆抗体或其抗原结合片段及其制备和使用方法的领域。

背景技术：

1、促性腺激素释放激素(gnrh)是通过与gnrh受体特异性结合来刺激促性腺激素、黄体生成素(luteinizing hormone，lh)和促卵泡激素(follicle stimulating hormone，fsh)从垂体前叶释放的十肽激素。gnrh受体位于许多细胞类型和组织的外膜上，主要位于癌细胞、垂体前叶和生殖器官或组织中。尽管gnrh受体在癌细胞中的功能不同于gnrh受体在垂体前叶细胞中的功能，但gnrh受体的序列和结构在这些不同类型的细胞之间是相同的。

2、对gnrh的正常功能具有拮抗作用的gnrh类似物的施用已用于治疗多种性激素相关病症或障碍，例如生殖疾病(在雄性和雌性二者中)、不育症、辅助生殖治疗(例如体外受精(in vitro fertilization，ivf)或捐卵(例如以控制卵巢刺激))、避孕(包括抑制排卵)、跨性别者的医学转变或性再造治疗(无论是雄性到雌性或雌性到雄性、无论是否结合性再造手术)、子宫内膜异位症、子宫内膜薄化、子宫腺肌病、子宫内膜增生、子宫平滑肌瘤(子宫纤维样)、经前期综合征、良性前列腺肥大、卵巢病症、多囊卵巢病、性早熟等。

3、gnrh类似物也已用于治疗一些类型的癌症，包括前列腺癌、乳腺癌和卵巢癌以及子宫内膜癌、宫颈癌、胎盘癌(placenta cancer)、胰腺癌、结肠癌、肺癌、肝癌、肾癌或脑癌，或者胶质母细胞瘤、淋巴瘤、白血病、黑素瘤或神经母细胞瘤。已经证实gnrh是泛癌(pancancer)标志物，其在许多不同类型癌症的细胞表面上高度表达，特别是在这样的癌症的更晚期阶段(参见例如美国专利no.8163283，其出于所有目的通过引用整体并入本文)。还已经证实gnrh类似物(激动剂和拮抗剂二者)都可以诱导癌细胞的凋亡。

4、合成gnrh拮抗剂的一些实例包括，尤其是：抗排卵肽(antide)、西曲瑞克(cetrorelix)、阿巴瑞克(abarelix)、地加瑞克(degarelix)、加尼瑞克(ganirelix)和恶拉戈利(elagolix)。

5、通常用作gnrh拮抗剂的一些合成gnrh类似物是经结构修饰的gnrh十肽类似物。一些gnrh十肽类似物的结构与gnrh的结构显著不同，在这些类似物中十个氨基酸中的五个是非天然的且是d构型的。用作gnrh拮抗剂的gnrh十肽类似物直接与内源性gnrh竞争与gnrh受体的结合，伴随着施用之后lh和fsh的迅速降低。因此，已知gnrh十肽类似物产生立即且直接的作用。由于至少该原因，gnrh十肽类似物通常在临床应用中用于治疗生育问题。

6、gnrh在人循环中具有约2至4分钟的短半衰期。通常，gnrh十肽类似物在人循环中具有例如约3至63小时的短半衰期。因此，gnrh十肽类似物可用于治疗仅需短期治疗的病症。为了实现长期治疗，每天施用gnrh十肽类似物是有必要的。

7、ghr-106是与gnrh受体结合的单克隆抗体。ghr-106最初在针对合成寡肽进行免疫的小鼠中产生，该寡肽对应于人gnrh受体胞外结构域中氨基酸残基1至29中存在的表位。原始的鼠mghr-106已被修饰为用于在人中施用的人源化形式。人源化ghr-106单克隆抗体(hghr-106)已显示出与鼠单克隆ghr-106(mghr-106)生物等效。鼠mghr-106和人源化hghr-106，包括其可变区的氨基酸序列，已在wo 2011/026242和us 9273138中公开，其出于所有目的在此通过引用并入本文。

8、lee的先前的美国专利no.8163283、8361793和9273138(其出于所有目的全部通过引用整体并入本文)涉及ghr-106及其人源化形式在治疗人癌症和性激素相关病症或障碍中的潜在临床应用。单克隆抗体在人循环中具有相对较长的半衰期，例如，单克隆ghr-106在循环中的半衰期估计为约5天至约22天。

9、仍然需要改良的gnrh拮抗剂，特别是基于抗体的gnrh拮抗剂，以用作gnrh十肽类似物的替代物。仍然需要适用于治疗癌症和性激素相关病症或障碍的改良的gnrh拮抗剂。

10、相关领域的前述实例和与之相关的限制旨在是说明性的而非排他性的。在阅读说明书和研究附图之后，相关领域的其他限制对于本领域技术人员而言将变得明显。

技术实现思路

1、结合旨在是示例性和说明性的而不限制范围的系统、工具和方法来描述和举例说明以下实施方案及其方面。在多个实施方案中，已经减少或消除了一个或更多个上述问题，同时另一些实施方案指向另外的改进。

2、本发明的一个方面提供了使用ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段作为基于抗体的gnrh拮抗剂来治疗癌症或性激素相关病症或障碍的方法。

3、本发明的一个方面提供了通过向对象施用治疗有效量的作为gnrh拮抗剂的ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段来在该对象中治疗癌症或性激素相关病症或障碍的方法。在一些方面中，对象是人。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体是人源化ghr-106单克隆抗体。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体的抗原结合片段来源于人源化ghr-106单克隆抗体。

4、在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段具有效应物功能，例如，可以激活抗体依赖性细胞毒性(antibody-dependent cellular cytotoxicity，adcc)或补体依赖性细胞毒性(complement-dependent cytotoxicity，cdc)。在一些这样的方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段具有igg1、igg2或igg3亚型。在一些方面中，具有效应物功能的ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段用于治疗癌症。在一些方面中，所述癌症是这样的癌症：其中与该类型的健康细胞相比，gnrh受体在该类型的癌细胞中过表达。

5、在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段不激活效应物功能，例如，不能激活抗体依赖性细胞毒性(adcc)或补体依赖性细胞毒性(cdc)。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段抑制补体激活。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段是igg4亚型。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段在所述ghr-106单克隆抗体的重链中具有s228p突变或等同突变以抑制igg4fab臂交换。

6、在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段用于治疗性激素相关病症或障碍。在一些方面中，性激素相关病症或障碍是已知可通过施用已知的gnrh拮抗剂(例如十肽gnrh拮抗剂，例如抗排卵肽或西曲瑞克)治疗的病症。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段用于治疗这样的病症或障碍：其中期望活性治疗剂在循环中的更长的半衰期。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体或其抗原结合片段用于控制排卵。

7、在一些方面中，ghr-106单克隆抗体的抗原结合片段是igg抗体片段。在一些方面中，igg抗体片段是f(ab’)2、fab、scfab或scfv。在一些方面中，抗原结合片段在人循环中的半衰期为约12至20小时。在一些方面中，ghr-106单克隆抗体在人循环中的半衰期为约5至22天。

8、除了上述示例性的方面和实施方案之外，通过参考附图并通过研究以下详细描述，另外的方面和实施方案将变得明显。