产红青霉菌PR1发酵提取液在抗植物病毒中的应用的制作方法

本发明属于微生物应用，特别是涉及产红青霉菌pr1发酵提取液在抗植物病毒中的应用。

背景技术：

1、17世纪时，荷兰农户在种植郁金香的过程中偶然发现了被病毒病侵染的植株，经过表观形态的观察，这些植株表现出与其他常见的病害不同的发病症状，这是关于病毒性疾病最早的报道。

2、目前尚无有效控制植物病毒病的化学农药，并且随着病毒抗药性的增强，化学农药在环境和生态安全方面面临的压力也不断增加。

3、生物防治在起到良好防治效果的同时，还能够减少对环境的污染；此外，还具有可开发资源丰富，病毒不易产生抗药性的优点。生物防治已成为当前国内外植物病害防治研究热点，有利于农业生产的持久稳定发展。

4、因此，在研究植物、病虫害和生物农药之间关系过程中，发现了新型生物农药——植物免疫诱抗剂。植物免疫诱抗剂以其对环境良好、生产安全等方面的诸多优势获得了广泛的应用，符合现代社会的绿色发展要求，成为了世界上备受关注的生物农药之一，并且在提高农用化学品的利用率、促进植物产量和改善植物品质方面发挥着重要作用，并为相关产业提供了一种可靠的替代方案，未来应用前景十分广阔。

5、植物免疫诱抗剂的运用使基于植物自身生长发育的规律，诱发自身对病害发生的潜在能力，普遍具有促进植物生长和提高植物抗病水平的作用，有些还可以提高化肥农药的使用效率，可以适度缓解因农药化肥过度使用对环境和农产品带来的危害。

6、专利cn106399131a《一株产红青霉菌及其应用》提供了一种产红青霉菌菌株(penicillium rubens)pr1，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称cgmcc，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，菌种保藏号为cgmcc no.13189；并公开了所述菌丝提取物在促进农作物生长或增产中的应用；专利cn115067363b《产红青霉菌pr1菌丝提取物的应用》中公开了所述提取物提高番茄对根结线虫的抗性、提升番茄和黄瓜果实品质的应用；专利cn117617269b《产红青霉菌pr1菌丝提取物作为植物免疫诱抗剂的应用》公开了包括诱导植物体内活性氧的爆发、提高水杨酸含量、提高植物抵抗细菌病害的能力。

7、植物免疫诱抗剂在抗植物病毒中的应用尚未有深入研究公开。

技术实现思路

1、针对现有技术的缺陷，本发明的目的在于，提供产红青霉菌pr1发酵提取液在抗植物病毒中的应用，本发明包括如下技术方案：

2、作为本发明的一个方面，在于提供产红青霉菌pr1发酵提取液在抗植物病毒中的应用。

3、所述产红青霉菌pr1发酵提取液采用菌种保藏号为cgmcc no.13189的菌株经培养活化、发酵，将发酵液离心过滤，得到菌丝体，采用乙醇提取所得，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

4、具体地，所述产红青霉菌pr1发酵提取液为巴西野生花生中分离、纯化出一株产红青霉(penicillium rubens)pr1，菌株在pda上培养7d。发酵上述的产红青霉菌pr1，将发酵液离心过滤，得到菌丝体；接着采用乙醇提取菌丝体。将菌丝体干燥、粉碎后加入乙醇冷浸20-30h，然后进行超声提取0.5-1.5h；重复提取2-4次，最后将各次提取液合并过滤，即可获得产红青霉菌pr1发酵提取液。

5、优选的，所述植物病毒包括马铃薯x病毒(pvx)、马铃薯y病毒(pvy)、斯里兰卡木薯花叶病毒(slcmv)。

6、优选的，本发明的实施例提供的所述应用包括对植物病毒的预防。

7、优选的，本发明的实施例提供的所述应用包括对植物病毒的治疗。

8、产红青霉菌pr1发酵提取液诱导植物抗病毒的机制具体包括：诱导植物体内活性氧爆发、降低植物体内丙二醛含量、促进植物体内水杨酸的合成、促进rna沉默。

9、所述植物包括马铃薯、本生烟。

10、本发明的实施例中，提供的产红青霉菌pr1发酵提取液的使用浓度为50～300ng/ml；更优选为100～250ng/ml；最佳使用浓度为150ng/ml。

11、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

12、1，本发明提供了产红青霉菌pr1发酵提取液作为植物免疫诱抗剂在抗植物病毒方面的新用途；所述产红青霉菌pr1发酵提取液作为植物免疫诱抗剂能够激发植物体内活性氧爆发、降低植物体内丙二醛含量、促进植物体内水杨酸的合成、促进rna沉默；

13、2，本发明所述产红青霉菌pr1发酵提取液用于植物抗病毒应用时，使用浓度在50～300ng/ml时即可发挥显著的诱抗效果，使用浓度低；

14、3，本发明所述的产红青霉菌pr1发酵提取液诱导植物对病毒的抗性具有广谱性，对不同植物的不同病毒均具有良好的抗病毒诱导效果，在植物病毒病防治方面应用潜力巨大。

技术特征：

1.产红青霉菌pr1发酵提取液在抗植物病毒中的应用，其特征在于，所述产红青霉菌pr1发酵提取液采用菌种保藏号为cgmcc no.13189的菌株经培养活化、发酵，将发酵液离心过滤，得到菌丝体，采用乙醇提取所得，该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物病毒包括马铃薯x病毒、马铃薯y病毒、斯里兰卡木薯花叶病毒。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，包括对植物病毒的预防。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，包括对植物病毒的治疗。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，降低植物体内丙二醛含量。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，促进rna沉默。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述植物包括马铃薯、本生烟。

8.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，产红青霉菌pr1发酵提取液的使用浓度为50～300ng/ml。

9.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，产红青霉菌pr1发酵提取液的使用浓度为100～250ng/ml。

10.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，产红青霉菌pr1发酵提取液的使用浓度为150ng/ml。

技术总结本发明公开了产红青霉菌PR1发酵提取液在抗植物病毒中的应用，属于微生物应用技术领域。本发明公开了产红青霉菌PR1发酵提取液的抗病毒效能及机理，具体为产红青霉菌PR1发酵提取液诱导植物抗病毒提供了理论依据，所述产红青霉菌PR1发酵提取液作为一种植物免疫诱抗剂，可以显著提高植物对植物病毒病的防治效果。使用剂量极少，仅使用纳克级别即可取得显著的诱抗效果，在植物病毒病防治方面应用潜力巨大。技术研发人员：朱常香,王彦菲,张晓英,尚凯杰,王洪凤,竺晓平,代丽丽受保护的技术使用者：山东蓬勃生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/12