白杨素增敏VS4718或普纳替尼在治疗食管鳞癌中的应用

本发明涉及药物组合物领域，具体而言，本发明涉及白杨素增敏vs4718或普纳替尼在治疗食管鳞癌中的应用。

背景技术：

1、食管癌是世界范围内严重危害人类健康的实体肿瘤。从组织学类型来看，食管癌主要分为食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，escc）和食管腺癌两种类型。escc的发生发展由多种因素协同调控而成。现阶段、流行病学、病因学、诊断学及分子生物学等多学科交叉研究虽然取得了一定进展。但是escc防治工作仍然十分严峻。临床escc治疗主要为常规化疗药和一些免疫疗法，但是在治疗后极易出现肿瘤复发和转移。如何发现新的靶点及研究其靶向药抗escc在提升药物抗escc中十分重要。

2、黏着斑激酶(focal adhesion kinase，fak)与其互作分子src是一类胞质非受体蛋白酪氨酸激酶(ptks)，属于蛋白酪氨酸激酶超家族，fak/src信号轴在细胞信号转导中起到枢纽作用，通过协调细胞内外信号，促进肿瘤发生与侵袭转移。多个靶向fak与src的小分子激酶抑制剂，尤其是fak抑制剂vs4718和src抑制剂普纳替尼已用于临床试验，但是其抗escc效果仍有待进一步研究。

3、近年来，中药因其多组分、多途径、多靶点的综合作用而被研究人员广泛用于与其它药物联用发挥增效减毒作用，且部分中药具有抗肿瘤作用，故中医药辅助化疗药物抗肿瘤的研究成为当前的热点。

4、白杨素（chrysin，chr）是一类黄酮类小分子化合物，主要分布在紫葳科木蝴蝶、蜂胶中，其结构式如下：

5、

6、白杨素具有广泛的生物活性，如抗炎、抗氧化、预防心脑血管疾病等。近年来，也有报道，白杨素通过抑制肿瘤细胞生长，起到抗癌效应。然而，尚未有白杨素增强fak抑制剂和src家族激酶抑制剂抗癌效应方面的研究。

技术实现思路

1、本发明发现，将白杨素与fak抑制剂或src家族激酶抑制剂联用时，白杨素能够大大增强fak抑制剂及src家族激酶抑制剂的抗食管鳞癌作用，取得了协同增效的作用。

2、因此，本发明提供了一种药物组合物，其包含白杨素或其药学上可接受的盐和fak抑制剂或src家族激酶抑制剂。

3、本发明还提供了一种试剂盒，其包含白杨素或其药学上可接受的盐和fak抑制剂或src家族激酶抑制剂。

4、优选的，白杨素或其药学上可接受的盐与fak抑制剂或src家族激酶抑制剂的摩尔比为5-50：1，优选为20-30：1，更优选为25：1。

5、优选的，所述fak抑制剂包括vs4718或其药学上可接受的盐；所述src家族激酶抑制剂包括普纳替尼或其药学上可接受的盐。

6、本发明中，所述vs4718的cas登记号为1061353-68-1，化学名称为2-[[2-(2-methoxy-4-morpholin-4-ylanilino)-5-(trifluoromethyl)pyridin-4-yl]

7、amino]-n-methylbenzamide（2-[[2-(2-甲氧基-4-吗啉基-4-基苯胺基)-5-(三氟甲基)吡啶基-4-基]氨基]-n-甲基苯甲酰胺）；所述普纳替尼的cas登记号为943319-70-8，化学名称为3-(2-imidazo[1,2-b]pyridazin-3-ylethynyl)-4-methyl

8、-n-[4-[(4-methyl-1-piperazinyl)methyl]-3-(trifluoromethyl)phenyl]benzamide（3-(2-咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基乙炔基)-4-甲基-n-[4-[(4-甲基-1-哌嗪基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺）。

9、优选的，白杨素或其药学上可接受的盐与vs4718或其药学上可接受的盐的摩尔比为5-50：1，优选为20-30：1，更优选为25：1；所述白杨素或其药学上可接受的盐与普纳替尼或其药学上可接受的盐的摩尔比为5-50：1，优选为20-30：1，更优选为25：1。

10、此外，本发明还提供了所述药物组合物在制备治疗食管鳞癌的药物中的应用。

11、在另一方面，本发明提供了白杨素或其药学上可接受的盐在增强fak抑制剂或src家族激酶抑制剂治疗食管鳞癌效果中的应用。

12、最后，本发明还提供了白杨素或其药学上可接受的盐在制备药物中的应用，所述药物用于增强fak抑制剂或src家族激酶抑制剂治疗食管鳞癌的效果。

13、本发明中，所述治疗食管鳞癌，包括抑制食管鳞癌细胞的生长、抑制转移灶食管鳞癌细胞的侵袭、抑制食管鳞癌细胞系的糖代谢、抑制食管鳞癌细胞系的脂肪酸代谢。

14、在一个优选的实施方案中，所述食管鳞癌细胞包括食管鳞癌细胞kyse410、食管鳞癌细胞系kyse450、食管鳞癌细胞kyse510，更优选为食管鳞癌细胞kyse450。

15、本发明中，术语“药学上可接受的盐”是指这样的盐，其保留给定化合物的生物有效性和性质，并且在生物学上或在其它方面不是不期望的。药学上可接受的盐包括药学上可接受的碱加成盐和药学上可接受的酸加成盐。药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱来制备。衍生自无机碱的盐包括(仅以举例的方式)钠、钾、锂、铵、钙和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺以及叔胺的盐，如烷基胺、二烷基胺、三烷基胺、取代的烷基胺、二(取代的烷基)胺、三(取代的烷基)胺、烯基胺、二烯基胺、三烯基胺、取代的烯基胺、二(取代的烯基)胺、三(取代的烯基)胺、单环烷基胺、二环烷基胺或三环烷基胺、单芳基胺、二芳基胺或三芳基胺或混合胺等的盐。合适的胺的具体实例包括(仅以举例的方式)异丙基胺、三甲基胺、二乙基胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、哌嗪、哌啶、吗啉、n-乙基哌啶等。药学上可接受的酸加成盐可以由无机酸和有机酸来制备。从其可以衍生盐的无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。从其可以衍生盐的有机酸包括醋酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、丙二酸、丁二酸、马来酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。

16、在一个实施方案中，本发明所述药物或药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。

17、术语“药学上可接受的载体或赋形剂”是指无毒的惰性固体、半固体或液体填充剂、稀释剂、形成胶囊的材料或任何类型的制剂助剂。一些可作为药学上可接受载体的材料的例子是糖类，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素和它的衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；粉状西黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，例如可可脂和栓剂蜡；油类，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大 豆油；乙二醇，例如丙二醇；酯类，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原的水；等渗的盐水；林格氏溶液；乙醇和磷酸盐缓冲液，和其它无毒的可配伍的 润滑剂，例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂等等。

18、本发明的药物组合物或药物可以口服、胃肠外、通过吸入喷雾、局部、直肠、鼻腔、向颊、阴道或经植入体贮存器给药，优选通过口服给药或通过注射给药。在此使用的术语胃肠外包括皮下、皮内、静脉内、肌内、关节内、动脉内、滑膜内、胸骨内、鞘内、伤口内和颅内注射或输液技术。

19、用于口服给药的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物与至少一种惰性的、药学上可接受的赋形剂或载体(例如，柠檬酸钠或磷酸氢钙)和/或：a)填充剂或膨 胀剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸，b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和 阿拉伯胶，c)润湿剂，例如甘油，d)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液缓速剂，例如石蜡，f)吸收促进剂，例如季铵化合物，g)润湿剂，例如鲸蜡 醇和单硬脂酸甘油酯，h)吸收剂，例如陶土和皂土，和i)润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠 及其混合物混合。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型中也可以包含缓冲剂。

20、口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、悬浮液、糖浆剂和酏剂。除了活性化合物，所述液体剂型可包含本领域通常所用的惰性稀释剂，例如，水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺；油类(特别是棉籽、落花生、玉米、 胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山 梨糖醇的脂肪酸酯，及其混合物。除了惰性稀释剂之外，口服组合物还可以包括助剂，例如润湿剂、乳化剂和助悬剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。

21、可注射的制剂(例如，无菌的可注射的水性或油性悬浮液)可以根据已知的技术使用适当的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。无菌的可注射制剂也可以是无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌的可注射的溶液、悬浮液或乳剂，例如在1,3-丁二醇中的溶液。另外，通常将无菌的不挥发性油类用作溶剂或悬浮介质。用于这一目的，可以使用任何温和的不挥发性油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。

22、局部或经皮给予本发明药物组合物或药物的剂型包括软膏、糊剂、乳膏剂、 洗剂、凝胶、粉剂、溶液、喷雾、吸入剂或贴片。在无菌条件下，活性组分与药学上可接受的载体和任何需要的防腐剂或所需的缓冲液混合。眼用制剂、滴耳剂、眼膏、粉剂和溶液也包括在本发明的范围内。

23、在一个实施方案中，本发明所述药物组合物、试剂盒或药物中的白杨素或其药学上可接受的盐和fak抑制剂或src家族激酶抑制剂可以在相同或不同的药物制剂中施用。白杨素或其药学上可接受的盐与fak抑制剂或src家族激酶抑制剂的药物剂型可以相同或者不同。白杨素或其药学上可接受的盐与fak抑制剂或src家族激酶抑制剂的可以同时或顺序施用。

24、在本文所述的医药用途中，对于白杨素或其药学上可接受的盐和fak抑制剂或src家族激酶抑制剂的给药时间、给药次数和给药频率等等，需要根据病情的具体诊断结果而定，这在本领域技术人员掌握的技术范围之内。

25、例如，将对小鼠或大鼠的治疗方案应用于人体上，所有药物对人的有效剂量可以通过该药物对小鼠或大鼠的有效剂量进行换算，这对于本领域的普通技术人员而言也是容易实现的。

26、本发明的药物或药物组合物可以以本领域技术人员已知的方式生产，例如通过溶解、混合、粒化、制备糖衣、磨细、乳化、形成胶囊、包埋或冻干过程。

27、有益效果

28、本发明提供了白杨素增敏vs4718和普纳替尼在治疗食管鳞癌中的应用。通过mts法和软琼脂克隆形成实验评估，白杨素能够增敏vs4718和普纳替尼介导的食管鳞癌细胞kyse450生长抑制作用。通过transwell法评估，白杨素能够增敏vs4718和普纳替尼介导的食管鳞癌细胞侵袭抑制作用。白杨素显著增强vs4718和普纳替尼对食管鳞癌细胞系kyse450的代谢，包括降低escc细胞中乳酸、葡萄糖及脂肪酸的含量。白杨素分别联用vs4718与普纳替尼，取得了协同的抗食管鳞癌效果，从而能够降低药物用量，减少患者对fak抑制剂及src家族激酶抑制剂的耐药性。