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与苹果树分枝角度相关基因关联的分子标记及其应用

2022-04-14 00:04:55 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.indel分子标记在鉴定、区分和/或预测苹果分枝角度中的应用;所述indel分子标记位于苹果基因组7号染色体的mdtac1a基因的启动子上,序列为gagaga。2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述鉴定、区分和/或预测苹果分枝角度的标准为:如果存在gagaga序列或出现370bp条带,所述苹果分枝角度<30
°
,或30
°
≤所述苹果分枝角度<60
°
;如果缺失gagaga序列或出现364bp条带,所述苹果分枝角度≥60
°
。3.扩增如权利要求1或2所述应用中的所述indel分子标记的引物组。4.如权利要求3所述的引物组,其特征在于,包括:(i)、正向引物,具有如seq id no.2所示的核苷酸序列;和/或(ii)、反向引物,具有如或seq id no.3所示的核苷酸序列;和/或(iii)、具有如(i)或(ii)所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列,且与(i)或(ii)所示的核苷酸序列功能相同或相似;和/或(iv)、具有与如(i)~(iii)任意所示的核苷酸序列至少有80%同源性的核苷酸序列;所述多个为2个~10个。5.试剂盒,其特征在于,包括如权利要求3或4所述的引物组以及可接受的辅料和/或助剂。6.如权利要求3或4所述的引物组或如权利要求5所述的试剂盒在鉴定、区分和/或预测苹果分枝角度和/或选择育种中的应用。7.鉴定、区分和/或预测苹果分枝角度的方法,其特征在于,所述鉴定、区分和/或预测苹果分枝角度的标准为:如果存在gagaga序列或出现370bp条带,所述苹果分枝角度<30
°
,或30
°
≤所述苹果分枝角度<60
°
;如果缺失gagaga序列或出现364bp条带,所述苹果分枝角度≥60
°
。8.如权利要求7所述的方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤(a)、引物设计:设计并筛选,得到引物组;步骤(b)、dna提取:提取待检测苹果总dna;步骤(c)、pcr扩增:以步骤(b)获得的所述苹果总dna为模板,采用步骤(a)所述的引物组进行pcr扩增,获得pcr产物;步骤(d)、电泳图谱分析:对所述pcr产物进行电泳,根据条带大小及位置关系确定所属基因型。9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(c)中所述引物组中任一引物的浓度均不小于10μmol/l;步骤(c)中所述pcr扩增的反应体系包括100ng/μl苹果总dna 2μl、正向引物1μl、反向引物1μl、2
×
green taq mix 10μl、ddh2o 6μl;反应程序为:
10.选择育种的方法,其特征在于,使用如权利要求7~9任一项所述的方法对苹果进行选择育种。

技术总结
本发明涉及分子遗传育种技术领域,特别涉及与苹果树分枝角度相关基因关联的分子标记及其应用。本发明在苹果7号染色体的基因的上游启动子区域中,筛选到一个InDel位点,该位点在苹果分枝角度小(≤30


技术研发人员:朱元娣 李永洲 王利敏 胡恩月 赵芫
受保护的技术使用者:中国农业大学
技术研发日:2022.01.19
技术公布日:2022/4/12
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本文用于企业家、创业者技术爱好者查询,结果仅供参考。

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