细胞培养基的制作方法

技术特征：
1.一种用于培养哺乳动物细胞的基础细胞培养基和补料细胞培养基的组合，其中所述基础细胞培养基包含相对于异亮氨酸的下述摩尔比(mm/mm)的下述氨基酸：约1.2-2.2的l-亮氨酸/l-异亮氨酸，约0.5-0.9的l-苯丙氨酸/l-异亮氨酸，约1.5-2.7的l-酪氨酸/l-异亮氨酸，约1.0-1.9的l-苏氨酸/1-异亮氨酸，和约1.0-1.9的l-缬氨酸/l-异亮氨酸，其中所述基础细胞培养基具有约25至150mm的总氨基酸含量，其中所述补料细胞培养基包含相对于异亮氨酸的下述摩尔比(mm/mm)的下述氨基酸：约2.3-4.2的l-亮氨酸/l-异亮氨酸，约0.6-1.1的l-苯丙氨酸/l-异亮氨酸，约1.3-2.4的l-苏氨酸/1-异亮氨酸，和约1.1-2.0的l-缬氨酸/l-异亮氨酸，其中所述补料培养基具有约100至1000mm的总氨基酸含量。2.权利要求1的组合，其中所述基础细胞培养基进一步包含相对于异亮氨酸约1.6-2.9的摩尔比(mm/mm)的l-赖氨酸。3.权利要求1或2的组合，其中所述基础细胞培养基进一步包含相对于异亮氨酸的下述摩尔比(mm/mm)的下述氨基酸中的至少一种：约0.3-0.5的l-色氨酸/l-异亮氨酸，约1.6-3.0的l-脯氨酸/l-异亮氨酸；或约0.4-0.7的l-甲硫氨酸/l-异亮氨酸。4.权利要求1至3中任一项的组合，其中所述基础细胞培养基另外包含浓度为约0.1至5.0mm、约0.2至2.0mm、约0.2至1.0mm或约0.4至1.0mm的胆酸亚铁。5.权利要求1至4中任一项的组合，其中所述补料细胞培养基进一步包含相对于异亮氨酸的下述摩尔比(mm/mm)的下述氨基酸：约0.6-1.1的l-酪氨酸/l-异亮氨酸和/或约1.1-2.1的l-赖氨酸/l-异亮氨酸，优选约0.6-1.1的l-酪氨酸/l-异亮氨酸和约1.1-2.1的l-赖氨酸/l-异亮氨酸。6.权利要求1至5中任一项的组合，其中所述补料细胞培养基进一步包含相对于异亮氨酸的下述摩尔比(mm/mm)的下述氨基酸中的至少一种：约0.3-0.6的l-色氨酸/l-异亮氨酸，约0.9-1.8的l-脯氨酸/l-异亮氨酸；或约0.4-0.8的l-甲硫氨酸/l-异亮氨酸。7.权利要求1至6中任一项的组合，其中所述补料细胞培养基另外包含浓度为约0.4至5mm、约0.4至1.0mm或约0.5至1.0mm，优选约0.5至0.6mm的胆酸亚铁。8.一种培养哺乳动物细胞的方法，其包括下述步骤：a)提供哺乳动物细胞，b)在权利要求1至7中任一项定义的基础细胞培养基中培养所述细胞，和c)任选地将权利要求1至7中任一项定义的补料培养基加入所述基础细胞培养基中；其中所述细胞在允许所述细胞增殖的条件下进行培养。
9.一种产生目的蛋白质的方法，其包括下述步骤：a)提供包含编码目的蛋白质的目的基因的哺乳动物细胞，b)在权利要求1至7中任一项定义的基础细胞培养基中培养所述细胞，和c)任选地将权利要求1至7中任一项定义的补料培养基加入所述基础细胞培养基中，d)任选地从细胞培养物中分开和/或分离和/或纯化所述目的蛋白质；其中所述细胞在允许所述目的蛋白质表达的条件下进行培养。

技术总结
本发明提供了具有新型氨基酸比率和/或胆酸亚铁作为铁载体的基础细胞培养基和补料培养基，其导致哺乳动物细胞培养工艺如CHO培养和蛋白质生产工艺的改善性能，特别是增加的产物滴度(例如单克隆抗体的)。还提供的是使用所述基础细胞培养基和任选的补料培养基，用于培养哺乳动物细胞并产生目的蛋白质的方法。本发明还提供了包含(i)基础细胞培养基和(ii)补料培养基的培养基平台。培养基的培养基平台。


技术研发人员：C
受保护的技术使用者：勃林格殷格翰国际公司
技术研发日：2016.03.31
技术公布日：2022/4/29