一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法与流程

技术特征：
1.一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，包括如下步骤：（1）对饲料样品进行预处理得到待测液；（2）配制九种有机酸的标准溶液；九种有机酸为：草酸、酒石酸、苹果酸、乙酸、乳酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸；（3）用高效液相色谱仪对标准溶液进行检测，得到标准曲线；然后对待测液进行检测，通过外标法计算待测液中的九种有机酸的含量；检测时采用的流动相由体积比为5~6:95~94的甲醇和质量浓度为0.04~0.06%的磷酸水溶液组成。2.根据权利要求1所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步骤（1）中的预处理方法为：将称取好的饲料样品置于离心管中，加入水摇匀后超声提取，然后离心分离，转移上清液后向残渣中加水再提取两次，合并三次提取得到的上清液并定容，得到待测液。3.根据权利要求2所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，饲料样品与三次提取时加入的水的添加量之比为0.1g:35~45ml:10~20ml:10~20ml；饲料样品与待测液的质量体积比为0.1g:100~150ml。4.根据权利要求2或3所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，超声提取时间10~15min；离心分离时的转速2000~4000r/min，离心时间5~10min。5.根据权利要求1所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步骤（2）所述的标准溶液中九种有机酸的浓度范围为20~200μg/ml。6.根据权利要求1所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步骤（3）中的检测条件为：柱温25~35℃；流速0.75~0.85ml/min；进样量10.0~10.2μl；检测波长214nm。7.根据权利要求1所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步骤（3）中使用的色谱柱内径为4.5~5mm，长度200~250mm，固定相为季铵盐和氨基改性硅胶；所述季铵盐和氨基改性硅胶的制备方法为：a）将n,n-二甲基苄胺加入无水乙醇中，搅拌均匀后加热至75~85℃，搅拌状态下向溶液中滴加γ-氯丙基三甲氧基硅烷，75~85℃回流反应36~48h后得到硅烷改性季铵盐；b）将硅胶颗粒用2~4mol/l的盐酸溶液回流6~10h，过滤、洗涤、干燥后得到活化后的硅胶颗粒；c）将活化后的硅胶颗粒分散在干燥的甲苯中，然后加入硅烷改性季铵盐及γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷，搅拌均匀后氮气保护下回流反应24~36h，将产物过滤、洗涤、干燥后得到季铵盐和环氧基改性硅胶；d）将季铵盐和环氧基改性硅胶分散在无水乙醇中，然后加入季戊四胺，氮气保护下搅拌反应60~72h，将产物过滤、洗涤、干燥后得到所述季铵盐和氨基改性硅胶。8.根据权利要求7所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步骤a）中n,n-二甲基苄胺与γ-氯丙基三甲氧基硅烷的摩尔比为1:1~1.2。9.根据权利要求7所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步骤c）中硅胶颗粒、硅烷改性季铵盐、γ-缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷的添加量之比为1g:0.5~0.7ml:0.3~0.5ml。10.根据权利要求7所述的一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，其特征是，步
骤d）中季铵盐和环氧基改性硅胶与季戊四胺的质量比为1:0.2~0.3。

技术总结
本发明涉及饲料检测领域，公开了一种同时检测饲料中九种有机酸含量的方法，步骤为：（1）对饲料样品进行预处理得到待测液；（2）分别配制九种有机酸的标准溶液，并将标准溶液稀释成不同浓度梯度的标准工作液；九种有机酸为：草酸、酒石酸、苹果酸、乙酸、乳酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸和富马酸；（3）用高效液相色谱仪对九种有机酸的标准工作液进行检测，得到标准曲线；然后对待测液进行检测，通过外标法计算待测液中的九种有机酸的含量；检测时采用的流动相由体积比为5~6:95~94的甲醇和质量浓度为0.04~0.06%的磷酸水溶液组成。本发明通过对检测条件的优化，可同时测定饲料中的九种有机酸含量，大大提升了检测效率。大大提升了检测效率。大大提升了检测效率。


技术研发人员：代兵 蒋宗莉 汪行舟 刘有根 吕凯凯 李华 方静
受保护的技术使用者：浙江国正检测技术有限公司
技术研发日：2021.12.07
技术公布日：2022/5/5