一种检测水疱性口炎病毒滴度的引物、试剂盒及方法与流程

技术特征：
1.温度稳定性逆转录酶在水疱性口炎病毒滴度检测中的应用，其特征在于，所述温度稳定性逆转录酶的逆转录温度为65℃～75℃。2.一组检测水疱性口炎病毒的引物，其特征在于，包括逆转录引物和扩增引物，逆转录引物的退火温度与逆转录温度相匹配，逆转录引物的退火温度为65℃～75℃。3.根据权利要求2所述引物，其特征在于，所述逆转录引物的核苷酸序列为：ggcagagtgcacatttgaagcatcgggagaaggggtc；所述扩增引物的核苷酸序列为：vsv-p-qpf1：tctctgtcggaggtaacgga；vsv-m-qpr1：gaccttgatctgccaataccg。4.一种检测水疱性口炎病毒滴度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有权利要求1所述温度稳定性逆转录酶和权利要求3所述逆转录引物和扩增引物。5.一种水疱性口炎病毒滴度的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：1)稀释水疱性口炎病毒并提取其rna，利用权利要求3所述逆转录引物将rna在权利要求1所述温度稳定性逆转录酶的作用下反转录为cdna；2)以cdna为模板，利用权利要求3所述扩增引物进行qpcr扩增反应获得扩增产物；3)依据扩增产物的拷贝数及稀释倍数计算得到水疱性口炎病毒滴度值。6.根据权利要求5所述检测方法，其特征在于，在步骤1)反转录过程中，逆转录引物的退火温度为65℃～75℃。

技术总结
本发明属于病毒滴度检测领域，具体涉及一种检测水疱性口炎病毒滴度的引物、试剂盒及方法，通过构建并筛选出水疱性口炎病毒的特异性逆转录引物和特异性扩增引物，并利用上述引物对提取的水疱性口炎病毒的RNA在温度稳定性逆转录酶的作用下进行逆转录及扩增，进而基于扩增结果计算得到水疱性口炎病毒的滴度，该方法能够在1


技术研发人员：施金秀 王娟 刘泽宇 罗燕
受保护的技术使用者：云舟生物科技（广州）股份有限公司
技术研发日：2021.12.28
技术公布日：2022/5/5