异色瓢虫协同昆虫病原真菌防治蚜虫的方法及应用

本发明属于生物防治，具体涉及异色瓢虫协同昆虫病原真菌防治蚜虫的方法及应用。

背景技术：

1、蚜虫，又称腻虫、蜜虫，是一类植食性昆虫，主要以刺吸植物组织汁液造成植物变形、枯焦、落叶，使植株生长势逐渐衰弱直至死亡。不仅直接为害农林作物，给农林生产造成巨大的经济损失，在迁飞扩散寻找寄主植物时要反复转移尝食，所以也会传播多种病毒病对农林作物进行间接为害，目前已知的600种植物病毒中有将近50％以蚜虫作为传播媒介，仅桃蚜就能传播100多种植物病毒，例如马铃薯蚜虫即桃蚜(myzuspersicae)寄生马铃薯，传播马铃薯病毒病，影响马铃薯的产量和品质，造成严重经济损失，同时也是蔬菜田的重要害虫。玉米蚜(rhopalosiphummaidis)寄生玉米、高粱等，危害玉米心叶，使玉米不能拔节抽穗，严重威胁玉米生产。豆类主要受苜蓿蚜(aphiscraccivora)和豌豆蚜(acyrthosiphonpisum)危害，这两种蚜虫寄生菜豆、豌豆、大豆、蚕豆等，危害植株叶、花及幼苗，是苜蓿花叶病毒、豌豆耳突花叶病毒等病毒的主要传播者，危害严重时，植株成片矮化枯死等，对农林业生产构成巨大的威胁。

2、目前，防治蚜虫的方式包括化学防治和生物防治。其中，化学防治主要依赖化学杀虫剂，通过害虫的口腔、气门和体壁等途径进入害虫体内进而引起中毒或死亡。但化学杀虫剂长期施用，不仅易造成农药残留，还破坏生态环境，造成严重的环境污染，削弱了农业生态系统中的自然控制作用，亦使蚜虫的抗药性不断增强，成为危害农作物的又一因素。生物防治蚜虫主要是利用天敌昆虫和昆虫病原真菌进行防治，不使用化学农药，可以减少环境负面影响，实现长期防治，也是目前实现蚜虫防治的主要手段。

3、异色瓢虫，又叫亚洲瓢虫，属鞘翅目多食亚目扁甲系昆虫，原属扁甲总科的瓢虫科，原产于亚洲，主要分布在中国、蒙古国、朝鲜和日本等国家。据记载，全世界瓢虫超过5000余种，中国记载瓢虫725种。异色瓢虫属于完全变态昆虫，整个发育历期包括，卵期、幼虫期、预蛹期、蛹期和成虫期，通过化学信息物质和利用颜色来辨析猎物在寄主植物上的丰度并追踪捕猎害虫。异色瓢虫具有较宽的捕食范围，可捕食蚜虫、螨和介壳虫等同翅目昆虫以及鞘翅目、膜翅目、双翅目和鳞翅目昆虫，主要以捕食蚜虫为主。

4、昆虫病原真菌(entomopathogenicfungus)是一种能侵入昆虫体内寄生、使昆虫发病致死的真菌，可以在昆虫群体中自然引起流行病，形成可持续控制能力，从而被用来控制害虫数量，在害虫生物防治中具有重要利用价值。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供异色瓢虫协同昆虫病原真菌防治蚜虫的方法，利用异色瓢虫携载具有可持续防控能力的昆虫病原真菌，提升异色瓢虫对蚜虫可持续防控效果，实现协同增效。为此，本发明还提供了异色瓢虫协同昆虫病原真菌在防治害虫方面的相关应用，包括：异色瓢虫携载昆虫病原真菌方法，携载昆虫病原真菌的异色瓢虫田间释放方法，昆虫病原真菌培养基配方及培养方法，异色瓢虫携载昆虫病原真菌数量指标等，可实现载菌异色瓢虫在防治豌豆蚜虫或玉米蚜虫及其引起的病害中，具有良好的效果。

2、本发明通过下述技术方案实现：

3、(一)本发明提供了异色瓢虫协同昆虫病原真菌防治蚜虫的方法，使异色瓢虫携载昆虫病原真菌分生孢子，对蚜虫进行防治。

4、在本方法中，涉及异色瓢虫携载昆虫病原真菌的方法，即：使用浓度25％(w/v)蜂蜜水均匀喷雾于异色瓢虫虫体使其润湿后，引入含有昆虫病原真菌分生孢子的载菌装置内进行载菌，最终通过性诱剂或蚜虫引诱到成品释放瓶中，获得携载昆虫病原真菌分生孢子的异色瓢虫成虫。

5、进一步的，在所述载菌装置两侧设置异色瓢虫进出通道，顶部安装一个昆虫病原真菌分生孢子补料口，底部中央安装1个以上防爆风扇，防爆风扇朝向顶部吹风，进行载菌时打开防爆风扇，通过防爆风扇使昆虫病原真菌分生孢子均匀悬浮于载菌装置中，增大异色瓢虫黏附昆虫病原真菌分生孢子的几率。

6、在所述成品释放瓶内放置性诱剂或蚜虫及蚜虫饲料豌豆茎，将成品释放瓶的瓶口通过管道与载菌装置连接，使异色瓢虫经过载菌装置黏附昆虫病原真菌后被性诱剂或蚜虫引入成品释放瓶中。

7、具体而言，性诱剂可采用异色瓢虫聚集信息素(-)-β-石竹烯或蚜虫利它素(e)-β-法尼烯或二者混合物，瓶中浓度控制在10～100μg/ml，优选20μg/ml；每瓶成品释放瓶中可装入蚜虫数量为2000头左右，蚜虫饲料豌豆茎为20g。

8、每只异色瓢虫的昆虫病原真菌分生孢子载菌数量不低于3.0×105个孢子，昆虫病原真菌分生孢子由昆虫病原真菌菌丝经“液-固两相”发酵而制得。

9、具体而言，发酵过程中，采用的液体培养基是在每1000ml蒸馏水中加入麦芽糖20～50g、胰蛋白胨5～20g、酵母粉5～20g和甲壳素0.5～2g而制得，采用液体培养基于26℃下培养5d，获得液体培养产物。优选的，每1000ml蒸馏水中加入麦芽糖30g、胰蛋白胨8g、酵母粉8g和甲壳素1g。

10、发酵过程中，采用的固体培养基是在每1000g麦麸中加入麦芽糖2～5g、胰蛋白胨0.5～2g、酵母粉0.5～2g和甲壳素0.05～0.2g而制得，将液体培养产物与固体培养基按照1ml∶100g的比例进行接种后，于26℃下培养20d，然后通过振荡分离和过筛后，即得昆虫病原真菌分生孢子。优选的，每1000g麦麸中加入麦芽糖2g、胰蛋白胨0.5g、酵母粉0.5g和甲壳素0.05g。

11、在本方法中，还涉及对蚜虫进行防治的方法，其对蚜虫进行防治的步骤包括：

12、(1)调查田间蚜虫密度，得出虫口基数：调查采用五点取样调查法，即在一定范围内先将对角线的中点确定为中心调查取样点，再在对角线上选取4个与中心点距离10m的点作为其他调查取样点，每个调查点选择10株作物，共计调查50株作物，统计并记录作物上蚜虫数量；

13、(2)田间释放：按照异色瓢虫∶蚜虫＝1∶50的比例，将所需数量的成品释放瓶(500头载菌异色瓢虫/瓶)均匀防治于田间，打开瓶盖，释放携载昆虫病原真菌分生孢子的异色瓢虫。

14、(二)作为本发明的进一步保护，本发明还提供了异色瓢虫协同昆虫病原真菌在防治豌豆蚜虫及其引起的病害中的应用，采用上述方法进行防治，其防治指标满足：

15、在人工气候室内，载菌异色瓢虫对豌豆蚜防治效果在第5d时达到100％，显著高于现有单独使用异色瓢虫的70.20％和单独使用昆虫病原真菌的38.10％；

16、在田间，载菌异色瓢虫对豌豆蚜防治效果在第7d时达到83.59％。

17、(三)作为本发明的进一步保护，本发明还提供了异色瓢虫协同昆虫病原真菌在防治玉米蚜虫及其引起的病害中的应用，同样采用上述方法进行防治，其防治指标满足：

18、在人工气候室内，载菌异色瓢虫对玉米蚜防治效果在第5d时达到100％，显著高于现有单独使用异色瓢虫的84.15％和单独使用昆虫病原真菌的61.06％；

19、在田间，载菌异色瓢虫对玉米蚜防治效果在第8d时达到86.07％。

20、本发明与现有技术相比，具有以下优点及有益效果：

21、本发明利用异色瓢虫和昆虫病原真菌在防治蚜虫方面的不同机理，将两者有效结合，使异色瓢虫协同昆虫病原真菌可以实现对蚜虫的生物防治，经实验证明，昆虫病原真菌对异色瓢虫无不良影响，使异色瓢虫在不影响自身前提下携带着生防真菌，进行觅食捕食等行为时，将生防真菌带入蚜虫种群中流行发生，实现蚜虫可持续防控，达到协同增效，提高蚜虫的防治效果，降低成本，节约劳动力。

22、本发明的目的在于提出一种液固两相发酵制备分生孢子，利用本发明的载菌装置将被浓度为25％(w/v)的蜂蜜水喷湿的异色瓢虫成功携载昆虫病原真菌的方法，以及利用载菌异色瓢虫进行害虫生物防治方法，实现对蚜虫的可持续生物防治。