一种香合欢组培苗瓶外生根的方法与流程

本发明属于植物繁殖，具体地说是涉及一种香合欢组培苗瓶外生根的方法。

背景技术：

1、香合欢，又名黑格、香茜藤、香须树，是豆科合欢属常绿乔木，高达20m，胸径60cm。在我国主要分布在海南、广西、云南、四川、贵州、广东、浙江和台湾等省区，是广西的乡土珍贵树种。香合欢生长迅速，树干通直，冠幅小，天然更新能力强，根系发达，固氮根瘤丰富，出材率高，是优良的高价值造林树种。黑格材性优良，木材美观，尺寸稳定性好，耐腐抗虫，为上等家具、建筑、造船、车辆、雕刻和各种装饰等用材，并可做栲胶原料；具有极高的药用价值，以根入药，可用于治疗风湿关节痛、跌打损伤、疮癣、失眠等症状。其枝叶较稀疏，宜与多种树种营造混交林，对改良土壤、改善林间生态环境、提高单位面积蓄积量有良好的作用。

2、目前，香合欢主要以种子园和采种母树林的有性繁殖为主。然而有性繁殖存在着遗传分化、繁殖效率不高等问题，不能最大限度的获得改良增益，而无性繁殖能有效克服上述有不足。然后，传统的扦插繁殖生根难、成苗率低、周期长，无法在短时间内获得大量无性系苗木；嫁接等其他无性繁殖技术很难满足大规模造林需求。组织培养是一种快速有效的无性繁殖途径，能有效扩增优良种源/家系，短期内获得大量优质香合欢苗木。

3、现有研究和实践表明，香合欢组培苗瓶内生根具有成本高、周期长等问题。近年来，组培苗瓶外生根技术得到了充分实践和发展。该技术的关键是将组培苗生根阶段中的生根和移栽驯化结合起来，省去了组培苗瓶内生根程序，直接将继代增殖扩繁培养的香合欢组培苗单株进行温室移植。与传统的组培苗生产程序比较，该技术的应用不仅减少了一次无菌操作步骤，节约了培养室空间，减少了生根培养的原料和劳力投入，降低了生产成本，提高了生产效率。并避免了香合欢瓶内生根苗到移植温室所需的适应期，从而缩短育苗周期，达到简化生产程序和降低生产成本的目的，本发明的目的是为了简化香合欢组培苗生产程序，在公开号（cn112088776a）的基础上开发出一种提高香合欢组培苗生根效率、缩短育苗周期并降低生产成本的瓶外生根技术。

技术实现思路

1、本发明简化香合欢组培苗生产程序。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供了一种香合欢组培苗瓶外生根的方法，包括外植体材料消毒处理、组培苗增殖培养、组培苗瓶外扦插、扦插后管理，获得香合欢组培瓶外生根苗，其操作步骤如下：

3、（1）外植体材料消毒处理：选取优良单株，对其进行环割/切割促萌，萌芽后晴天采集带有腋芽或顶芽的嫩茎作为外植体；减去大部分叶，剪成3-5 cm的带芽茎段，用无菌水冲洗干净，用75%酒精浸泡30 s后，再用无菌水冲洗3-5次，将其放入2%次氯酸钠溶液中10min，冲洗干净后用0.1%升汞消毒8 min，晃动瓶子让茎段和消毒液充分接触，再用无菌水冲洗6-8次，最后用灭菌吸水纸吸干水分。

4、（2）组培苗增殖培养：对消毒过的材料进行初代诱导、继代增殖和伸长培养。

5、 （3）组培苗瓶外扦插：将步骤（2）中获得的组培苗移出培养室，置于自然环境中放置7 d，然后打开瓶口放置1-2 d；取出2-6 cm长的继代苗，洗净培养基，将带芽茎段进行扦插；扦插前将茎段下部1-2 cm浸泡在生根水100-150 mg/l abt中10-15 min，取出后再置于生根水100-150 mg/l naa中浸泡10-15 min，然后扦插于消毒过的细沙基质中，扦插深度为1-2 cm；

6、 （4）扦插后管理：扦插后淋透水，覆盖薄膜保温保湿，控制湿度80%-90%；2周后，揭去薄膜，每10 d喷施1次叶面肥，每20 d喷施1次杀菌剂；50-60 d后待苗木长出稳定根系后，剪开扦插杯袋，将苗木移栽到装有营养土的营养杯中，营养土原料及配比为黄心土：椰糠：蔗渣：蛭石=3:3:2:2；移栽后按照常规方法进行水肥和病虫害等常规育苗管理。

7、 进一步，所述的步骤（1）中环割/切割促萌方法为选择香合欢优树树干基部距离地面10-30 cm处，用工具刀切入树皮至木质部，切割宽度为0.5-1.0 cm，随后喷洒3%硝钠·萘乙酸水剂，打破休眠，促进萌芽。

8、 进一步，所述的外植体消毒方法为75%酒精30 s+2%次氯酸钠10 min+0.1%升汞8min，每一步消毒后均要用无菌水冲洗干净。

9、 进一步，所述的步骤（3）中进行瓶外扦插前先将组培苗移出培养室，置于自然环境中放置7 d，然后再打开瓶口放置1-2 d。

10、进一步，所述的扦插基质细沙用0.5%高锰酸钾溶液进行消毒。

11、进一步，所述的步骤（4）中叶面肥为叶脉动浓缩型和大量元素水溶肥料交替使用，杀菌剂为200 mg/l百菌清和250 mg/l甲基托布津混合溶液。

12、本发明所提供的一种香合欢组培苗瓶外生根的方法，其有益效果是：

13、1. 本发明与常规的组织培养方法相比，省去了香合欢瓶内生根环节，避免了香合欢瓶内生根苗到移植温室所需的适应期，从而缩短育苗周期，减少了生根培养的原料和劳力投入，降低了生产成本，提高了生产效率；

14、 2. 本发明采用瓶外生根，将香合欢的生根过程与驯化过程结合到一起，提高了组培苗存活率，加速了种苗繁殖的进程，有利于实现香合欢的工厂化育苗；

15、3.本发明对其他木本植物工厂化育苗的生根提供了一定的参考价值。

技术特征：

1.一种香合欢组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2. 根据权利要求1所述的香合欢组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，步骤（1）中环割/切割促萌方法为选择香合欢优树树干基部距离地面10-30 cm处，用工具刀切入树皮至木质部，切割宽度为0.5-1.0 cm，随后喷洒3%硝钠·萘乙酸水剂，打破休眠，促进萌芽。

3. 根据权利要求1所述的香合欢组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，步骤（1）中外植体消毒方法为75%酒精30 s+2%次氯酸钠10 min+0.1%升汞8 min，每一步消毒后均要用无菌水冲洗干净。

4. 根据权利要求1所述的香合欢组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，步骤（3）中进行瓶外扦插前先将组培苗移出培养室，置于自然环境中放置7 d，然后再打开瓶口放置1-2 d。

5.根据权利要求1所述的香合欢组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，步骤（3）中扦插基质细沙用0.5%高锰酸钾溶液进行消毒。

6. 根据权利要求1所述的香合欢组培苗瓶外生根的方法，其特征在于，步骤（4）中叶面肥为叶脉动浓缩型和大量元素水溶肥料交替使用，杀菌剂为200 mg/l百菌清和250 mg/l甲基托布津混合溶液。

技术总结本发明公开了一种香合欢组培苗瓶外生根的方法，包括以下步骤：外植体材料消毒处理、组培苗增殖培养、组培苗瓶外扦插、扦插后管理，获得香合欢组培瓶外生根苗。本方法将组培苗生根阶段中的生根和移栽驯化结合起来，提高了组培苗存活率，加速了香合欢种苗繁殖的进程。技术研发人员：罗群凤,杨章旗,陈博雯,胡拉,谭健晖,冯源恒,林珠,贾婕受保护的技术使用者：广西壮族自治区林业科学研究院技术研发日：技术公布日：2024/6/5