无花果杂交育种方法与流程

本发明涉及无花果育种，尤其涉及无花果杂交育种方法。

背景技术：

1、无花果为桑科榕属落叶小乔木，起源于地中海流域，依据所含花的种类分为4种类型：野生型、斯密尔那型、圣比罗型和普通型。野生型为雄树，果实内含有短柱雌花、雄花；斯密尔那型为授粉类型的雌树，果实内含长柱雌花；普通型为单性结实类型的雌树，果实内含长柱雌花；圣比罗型为春果不需授粉、夏果需授粉的雌树，果实内含长柱雌花。雄花在雄树果实成熟时散粉，其授粉媒介为无花果小黄蜂。由于缺少雄树及其专用授粉媒介等原因，国内现种植的品种为单性结实的普通型无花果，且均为国外引种或其引种后的芽变品种。

2、目前国内无花果自主杂交育种空白，难于获取无花果的花粉，且无花果为隐头花絮，雌花在果实内部，雌花发育状态不可见，阻碍无花果杂交授粉。

3、在所述背景技术部分公开的上述信息仅用于加强对本发明的背景的理解，因此它可以包括不构成对本领域普通技术人员已知的现有技术的信息。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服上述现有技术的不足，提供一种能够获取杂交后种子的无花果杂交育种方法。

2、本发明的额外方面和优点将部分地在下面的描述中阐述，并且部分地将从描述中变得显然，或者可以通过本发明的实践而习得。

3、根据本发明的一个方面，一种无花果杂交育种方法，包括如下步骤：

4、花粉活性检测：配置花粉萌发培养基，用丝状物蘸取花粉后，把花粉再蘸到载玻片上的培养基上，把载玻片放到底部平铺湿润纱布的培养皿中，盖好培养皿并置于25℃下暗培养40～48h，用显微镜观察花粉萌发情况，选择萌发率大于30％的花粉为合格的花粉；

5、配制授粉液：配置授粉液，按照0.5～1g/100ml的比例加入花粉。

6、无花果雌树杂交授粉：选择具有优良性状的无花果雌树做母本，在其果实横径1.5～2.0cm时，用注射器将授粉液从果孔处注射到果实内；

7、种子的分离与保存：采集成熟的授粉果实，分离带有种子的果肉，用纱布揉捏后流水冲洗，再淘洗掉部分果肉和漂浮的空瘪种子，晾干，4～8℃低温保存。

8、根据本发明的一实施方式，还包括如下步骤：

9、杂交种子萌芽率检测：培养皿中放置与培养皿大小相同滤纸，用无菌水打湿，均匀放置授粉后的种子，盖好培养皿后置于温度25±2℃、光照14h/d条件下培养15d，记录萌芽率。

10、根据本发明的一实施方式，所述花粉萌发培养基制造方法为：称取蔗糖8-12g、硼酸4-6mg、琼脂0.8-1.2g后，无菌蒸馏水定容至100ml，调ph6.0～6.5,水浴锅中溶解混匀，玻璃棒蘸滴到载玻片上。

11、根据本发明的一实施方式，所述花粉萌发培养基制造时称取蔗糖10g、硼酸5mg、琼脂1g。

12、根据本发明的一实施方式，所述授粉液制造方法为：称取8～12g蔗糖和4～6mg硼酸后，蒸馏水定容至100ml，蒸馏水、配置容器均为高温灭菌处理。

13、根据本发明的一实施方式，所述授粉液制造时称取10g蔗糖和5mg硼酸。

14、根据本发明的一实施方式，在花粉活性检测步骤前，还包括如下从无花果雄树获取花粉步骤：

15、(1)无花果雄树出果处理：新梢长至10～15片叶时打顶，抑制营养生长，促进萌发二次枝，喷施0.2～0.4％的葡萄糖溶液以提高碳氮比，促进花芽分化；二次枝长至5片叶时，叶柄与新梢处同时生长出叶芽、果芽，人工剥除叶芽，促进果芽发育；

16、(2)无花果雄树坐果处理：配制1～2％氯吡脲溶液，喷施到幼果及枝条上，促进坐果及其发育成熟；

17、(3)花粉的采集与分离：采集发育成熟的无花果雄树果实，劈开后分离花药，使花药散粉，过滤花粉，将花粉封装保存。

18、根据本发明的一实施方式，使花药散粉时，使用25w白炽灯照花药2～4h，花药距离灯泡10～20cm。

19、根据本发明的一实施方式，氯吡脲有效成分0.1％，配制的1～2％氯吡脲溶液有效成分10～20mg/l。

20、根据本发明的一实施方式，所述丝状物为头发丝。

21、由上述技术方案可知，本发明的优点和积极效果在于：

22、本发明的无花果杂交育种方法，通过配制无花果花粉授粉液以及采用注射的方法，实现无花果授粉杂交，能够获取杂交后的无花果种子。实现自主杂交选育无花果品种，填补国内无花果的杂交育种空白。同时，也打破国内无花果品种为国外引进或自然芽变的局面，进一步推动了国内无花果产业发展。本发明还通过配制花粉培养基、培养花粉等措施，实现花粉活性的检测，为花粉的检测提供科学方法。

技术特征：

1.一种无花果杂交育种方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，还包括如下步骤：

3.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，所述花粉萌发培养基制造方法为：称取蔗糖8-12g、硼酸4-6mg、琼脂0.8-1.2g后，无菌蒸馏水定容至100ml，调ph6.0～6.5,水浴锅中溶解混匀，玻璃棒蘸滴到载玻片上。

4.根据权利要求3所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，所述花粉萌发培养基制造时称取蔗糖10g、硼酸5mg、琼脂1g。

5.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，所述授粉液制造方法为：称取8～12g蔗糖和4～6mg硼酸后，蒸馏水定容至100ml，蒸馏水、配置容器均为高温灭菌处理。

6.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，所述授粉液制造时称取10g蔗糖和5mg硼酸。

7.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，在花粉活性检测步骤前，还包括如下从无花果雄树获取花粉步骤：

8.根据权利要求7所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，使花药散粉时，使用25w白炽灯照花药2～4h，花药距离灯泡10～20cm。

9.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，氯吡脲有效成分0.1％，配制的1～2％氯吡脲溶液有效成分10～20mg/l。

10.根据权利要求1所述的无花果杂交育种方法，其特征在于，所述丝状物为头发丝。

技术总结本发明提出一种无花果杂交育种方法，包括花粉活性检测：配置花粉萌发培养基，用丝状物蘸取花粉后，把花粉再蘸到载玻片上的培养基上，把载玻片放到培养皿中，盖好培养皿并置于25℃下暗培养40～48h，用显微镜观察花粉萌发情况，选择萌发率大于30％的花粉为合格的花粉；配制授粉液：配置授粉液，按照0.5～1g/100ml的比例加入花粉。无花果雌树杂交授粉：无花果果实横径1.5～2.0cm时，用注射器将授粉液从果孔处注射到果实内；种子的分离与保存：采集成熟的授粉果实，分离带有种子的果肉，用纱布揉捏后流水冲洗，淘洗掉果肉和漂浮的空瘪种子，晾干，4～8℃低温保存。本发明通过配制无花果花粉授粉液以及采用注射的方法，实现无花果授粉杂交，能够获取杂交后的无花果种子。技术研发人员：乔峰,姜婷婷,成梦,闫蓉,冯帅帅,黄爱玲,央宗,韩葳,李爱花,李全希,安萌萌,刘恬,张晓明,谭德云,王光明受保护的技术使用者：山东橙梦农业科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/11