一种桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法与流程

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法。

背景技术：

1、桂枝加厚朴杏子汤出自《伤寒论·辨太阳病脉证并治》，原文第18 条:“太阳病，下之微喘者，表未解故也，桂枝加厚朴杏子汤主之”。 桂枝加厚朴杏子汤是桂枝汤加厚朴、杏仁2味所组成。桂枝汤解肌祛风、调和营卫、阴阳平补、和中；加厚朴、杏仁理气利肺以降气平喘。因此，对于外感风寒或营卫不和或正气不足兼有咳喘，脉浮缓，有汗，而无明显热象者，均可用此方。

2、中药指纹图谱较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。hplc 指纹图谱可有效控制中药质量，即使色谱峰属于未知化合物，hplc 指纹图谱也能提供充分可靠的信息，可用于鉴别中药的质量。

3、桂枝加厚朴杏子汤是国家中医药管理局公布的第二批古代经典名方目录品种，位列第十位。其应用广泛、疗效确切、具有明显特色与优势的古代中医典籍所记载的方剂。目前桂枝加厚朴杏子汤缺少相关的质量控制方法，无法精确的判断药物的质量。因此，研究一种能够精确的判断桂枝加厚朴杏子汤质量的方法成为了亟待解决的问题。

技术实现思路

1、针对现有技术中存在的技术空白等问题，本发明提供了一种桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法。

2、本发明为了实现上述目的所采用的技术方案为：

3、本发明提供了一种桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，包括以下步骤：

4、（1）对照品溶液的制备：精密称定肉桂酸、甘草苷及厚朴酚对照品，加甲醇制成混合对照品溶液；

5、（2）供试品溶液的制备：按照处方比例称取过筛的桂枝加厚朴杏子汤的样品粉末，加入水，浸泡后煎煮，趁热过滤，药渣再加水煎煮，过滤，合并水煎液，减压浓缩，得桂枝加厚朴杏子汤的供试品溶液；

6、（3）采用高效液相色谱法进行检测，建立指纹图谱。

7、进一步的，步骤（1）中，所述混合对照品溶液中，肉桂酸、甘草苷及厚朴酚的浓度分别为10 μg·ml-1、20 μg·ml-1及40 μg·ml-1。

8、进一步的，步骤（2）中，所述桂枝加厚朴杏子汤的样品粉末过4号筛。

9、进一步的，步骤（2）中，桂枝加厚朴杏子汤的样品粉末首先加入10倍量的水；药渣中加入8倍量水；所述浸泡的时间为30 min；所述煎煮的时间为20-30 min。

10、进一步的，步骤（3）中，所述高效液相色谱法的条件为：色谱柱：phenomenex luna-c18色谱柱，250×4.60 mm，5 μm；柱温：30 ℃；流动相：流动相 a为乙腈，b为体积比为0.2%磷酸，梯度洗脱；检测波长：240 nm(0～30 min)、290 nm(30～65 min)、270 nm(65～90min)；流速：1.0 ml/min；进样量：10μl。

11、上述梯度洗脱的程序为：

12、。

13、本发明的有益效果为：

14、（1）本发明采用了不同的梯度洗脱对桂枝加厚朴杏子汤进行高效液相色谱检测，分离效果好；

15、（2）本发明提供的方法，通过合理选择对照品成分，并根据成分的最大吸收波长，采用定时波长的方法，能够有效的表示样品间成分量的变化，从而更加精确的评判样品的质量；

16、（3）本发明提供的方法针对桂枝加厚朴杏子汤的药效、所含成分的结构特点等，对对照品、供试品溶液等的配置进行了筛选和优化，制定的方法重复性及稳定性好，能够更加全面的对桂枝加厚朴杏子汤进行质量监控，本方法为中药汤剂的质量评价和标准化提供有价值的参考。

技术特征：

1.一种桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（1）中，所述混合对照品溶液中，肉桂酸、甘草苷及厚朴酚的浓度分别为10 μg·ml-1、20μg·ml-1及40 μg·ml-1。

3.根据权利要求1所述的桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（2）中，所述桂枝加厚朴杏子汤的样品粉末过4号筛。

4.根据权利要求1或3所述的桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（2）中，桂枝加厚朴杏子汤的样品粉末首先加入10倍量的水；药渣中加入8倍量水；所述浸泡的时间为30 min；所述煎煮的时间为20-30 min。

5.根据权利要求1所述的桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（3）中，所述高效液相色谱法的条件为：色谱柱：phenomenex luna-c18色谱柱，250×4.60 mm，5 μm；柱温：30 ℃；流动相：流动相 a为乙腈，b为体积比为0.2%磷酸，梯度洗脱；检测波长：240 nm，0～30 min、290 nm，30～65 min、270 nm，65～90 min；流速：1.0 ml/min；进样量：10μl。

6.根据权利要求5所述的桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：

技术总结本发明属于药物分析领域，具体涉及一种桂枝加厚朴杏子汤的中药指纹图谱的建立方法。该方法通过以下步骤实现：首先制备对照品溶液和供试品溶液，然后采用高效液相色谱法进行检测，建立指纹图谱。本发明提供的方法，通过合理选择对照品成分，并根据成分的最大吸收波长，采用定时波长的方法，能够有效的表示样品间成分量的变化，从而更加精确的评判样品的质量；本发明提供的方法针对桂枝加厚朴杏子汤的药效、所含成分的结构特点等，对对照品、供试品溶液等的配置进行了筛选和优化，制定的方法重复性及稳定性好，能够更加全面的对桂枝加厚朴杏子汤进行质量监控，本方法为中药汤剂的质量评价和标准化提供有价值的参考。技术研发人员：苏本正,刘月程受保护的技术使用者：山东省中医药研究院技术研发日：技术公布日：2024/8/1