一种组合生物标志物在预测、诊断或监测儿童脓毒症中的应用的制作方法

本发明属于生物医药，具体涉及一种组合生物标志物在预测、诊断或监测儿童脓毒症中的应用。

背景技术：

1、脓毒症(sepsis)是儿科重症监护病房患儿死亡的主要原因之一。美国流行病学资料显示，儿童严重脓毒症病死率为10.3％，有基础疾病者病死率可高至l2.8％。在中国，儿童脓毒症同样存在着较高的发病率和病死率，由于重症脓毒症来势凶猛，病情进展迅速，给临床救治丁作带来极大挑战。因此，尽早明确脓毒症的诊断，及时治疗是改善其预后、降低病死率之关键。

2、现有脓毒症临床诊断依据主要包括：细菌、真菌培养，血凝(凝血因子，fg，d-dimer)、白细胞计数、c-反应蛋白等辅助诊断。但是以上方法及时性、检出灵敏度以及特异性不足，细菌、真菌培养耗时长，儿科起病急，从早期发病到重度病程短，及时性不足，而且目前能进行培养的病原体主要为细菌、真菌，其他种类病原微生物无法进行培养，白细胞计数和c-反应蛋白为传统炎症相关指标，灵敏度及特异性不足，对于脓毒症诊断，以特异性和灵敏度做roc分析，auc线下面积在0.85左右，因此发现新的兼具高敏感性和特异性的生物标志物应用于儿童脓毒症的预测对其早发现、早诊断、早治疗至关重要。

技术实现思路

1、本发明提供一种组合生物标志物在预测、诊断或监测儿童脓毒症中的应用，本发明发现lbp、lcn2联合crp以及lf与lbp、lcn2及crp中的任意一个或两个联合可作为儿童脓毒症的诊断标志物，组合生物标志物的预测效果明显高于单一指标的预测价值，具有高效、特异性、灵敏度高及高可信度、直观、准确度高的优点。

2、本发明中涉及的术语：

3、本发明中，lbp(lps-binding protein)是一种血清蛋白，其主要功能是与脂多糖(lps)结合并将其传递给细胞，从而诱导免疫反应。

4、本发明中，lcn2(lipocalin-2，也称为ngal)是一种小型蛋白质，属于lipocalin家族。它在炎症、损伤和肿瘤等多种生理和病理状态中都有表达，并参与了多种生物学过程，如铁离子代谢、细胞增殖和凋亡等。

5、本发明中，crp(c-reactive protein)是一种急性相蛋白，在炎症、感染、组织损伤和恶性肿瘤等疾病状态下通常会显著上升。

6、本发明中，lf(lactoferritin)是指人乳铁蛋白。

7、本发明中，cd14是一种细胞表面分子，参与免疫系统中的免疫反应。

8、本发明中，fgf19是一种成纤维生长因子，参与多种生物学过程，如细胞增殖和代谢调节。

9、本发明中，lcn2是一种小分子蛋白，参与炎症和铁代谢等生理过程。

10、本发明中，s100a8/s100a9是s100a8和s100a9是一对钙结合蛋白，参与炎症和免疫调节。

11、本发明中，trfr是指的是转铁蛋白受体(transferrin receptor)，参与铁的转运和代谢。

12、本发明中，ifnα1，ifnα2和ifnβ是干扰素家族的成员，参与免疫应答和抗病毒作用。

13、本发明为实现上述目的采用的技术方案是：一种组合生物标志物在制备用于对儿童脓毒症进行预测、诊断或监测或分阶段的产品中的应用；其中，所述组合标志物包括lbp、lcn2与crp联合和lf与lbp、lcn2及crp中的任意一个或两个联合；所述儿童的年龄为0天至18岁。

14、优选地，所述产品用于对儿童脓毒症的进展进行分阶段，其中，所述分阶段为普通感染、脓毒症或重症脓毒症。

15、优选地，所述对儿童脓毒症进行预测、诊断或监测或分阶段的方法为从所述儿童获得的生物样品中定量测定lbp、lcn2、crp和lf。

16、优选地，所述生物样品包括血浆、血清或全血样本。

17、优选地，采用基于免疫法反应原理测定lbp和lcn2分析所述生物样品；采用免疫法反应原理测定crp和lf分析所述生物样品。

18、优选地，与对照样品或参照样品相比，所述生物样品中lbp、lcn2和crp浓度水平显著升高，lf浓度水平显著降低，则表明发生脓毒症及重症脓毒症的风险显著增加。

19、本发明公开了一种用于儿童脓毒症及脓毒症进展的检测试剂，以lbp、lcn2、crp和lf为检测目的物。

20、本发明还公开了一种用于儿童脓毒症及脓毒性肠道损伤的检测试剂盒，包括权利要求7所述检测试剂。

21、本发明还公开了一种组合生物标志物在制备用于预测儿童脓毒症发生及进展的产品的应用，所述预测脓毒症发生及进展的方法为从所述儿童的生物样品中定量检测lbp和lcn2，并将所述lbp和lcn2中的至少一个与crp组合或从所述儿童的生物样品中定量检测lf，并将其与lbp、lcn2和crp中的任意一个或两个组合，并将组合结果与其他对照指标或单一指标进行比较。

22、与现有技术相比，本说明书实施例采用的上述至少一个技术方案能够达到的有益效果至少包括：

23、(1)本发明对144例临床儿童的进行前瞻性研究，首先用elisa法盲测：cd14、fgf19、lcn2、lf、s100a8/s100a9、trfr、lbp、ifnα1，ifnα2和ifnβ共计10种标志物，结果表明，ifnα1、ifnα2和ifnβ测定结果低于试剂盒检测下限，不能检出，然后对其余7个标志物的测定结果结合后续分组进行统计分析发现：与非感染组相比，lcn2及lbp脓毒症中显著升高；重症脓毒样本lf脓毒显著低于非重症脓毒；7个指标结合crp诊断重症脓毒的灵敏度和特异性分别做单独或组合auc分析，其中lcn2的auc线下面积可达0.955，crp+lbp+lcn2联合的auc线下面积达0.991，明显高于单一指标的预测价值，本发明具有高效、特异性、灵敏度高及高可信度、直观、准确度高的优点；

24、(2)本发明发现lbp、lcn2联合crp以及lf与lbp、lcn2及crp中的任意一个或两个联合可作为儿童脓毒症的诊断标志物，具有较好的前景，可在预后出现脓毒血症感染患者中特异性检测血清lcn2、lbp异常水平，用于提示儿科患者是否预后出现脓毒症并为患者预后好坏提供依据；

25、(3)本发明特异性强，通过免疫学方法检测患者外周血lcn2、lbp的表达情况预测脓毒症的出现，能够直接应用于临床，具有切实的临床使用价值。

技术特征：

1.一种组合生物标志物在制备用于对儿童脓毒症进行预测、诊断或监测或分阶段的产品中的应用；其中，所述组合标志物包括lbp、lcn2与crp联合和lf与lbp、lcn2及crp中的任意一个或两个联合；所述儿童的年龄为0天至18岁。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品用于对儿童脓毒症的进展进行分阶段，其中，所述分阶段为普通感染、脓毒症或重症脓毒症。

3.如权利要求1-2任一项所述的应用，其特征在于，所述对儿童脓毒症进行预测、诊断或监测或分阶段的方法为从所述儿童获得的生物样品中定量测定lbp、lcn2、crp和lf。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述生物样品包括血浆、血清或全血样本。

5.如权利要求3-4任一项所述的应用，其特征在于，采用基于免疫法反应原理测定lbp和lcn2分析所述生物样品；采用免疫法反应原理测定crp和lf分析所述生物样品。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，与对照样品或参照样品相比，所述生物样品中lbp、lcn2和crp浓度水平显著升高，lf浓度水平显著降低，则表明发生脓毒症及重症脓毒症的风险显著增加。

7.一种用于儿童脓毒症及脓毒症进展的检测试剂，其特征在于，以lbp、lcn2、crp和lf为检测目的物。

8.一种用于儿童脓毒症及脓毒性肠道损伤的检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求7所述检测试剂。

9.一种组合生物标志物在制备用于预测儿童脓毒症发生及进展的产品的应用，其特征在于，所述预测脓毒症发生及进展的方法为从所述儿童的生物样品中定量检测lbp和lcn2，并将所述lbp和lcn2中的至少一个与crp组合或从所述儿童的生物样品中定量检测lf，并将其与lbp、lcn2和crp中的任意一个或两个组合，并将组合结果与其他对照指标或单一指标进行比较。

技术总结本发明提供一种组合生物标志物在制备用于对儿童脓毒症进行预测、诊断或监测或分阶段的产品中的应用，所述组合标志物包括LBP、LCN2与CRP联合和LF与LBP、LCN2及CRP中的任意一个或两个联合；所述儿童的年龄为0天至18岁。本发明发现LBP、LCN2联合CRP以及LF与LBP、LCN2及CRP中的任意一个或两个联合可作为儿童脓毒症的诊断标志物，具有较好的前景，可在预后出现脓毒血症感染患者中特异性检测血清LCN2、LBP异常水平，用于提示儿科患者是否预后出现脓毒症并为患者预后好坏提供依据。本发明特异性强，通过免疫学方法检测患者外周血LCN2、LBP的表达情况预测脓毒症的出现，能够直接应用于临床，具有切实的临床使用价值。技术研发人员：周洁,徐锦,贾然,彭珊,史小娟受保护的技术使用者：上海科华生物工程股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/5