一种维生素B12注射液的检测方法与流程

本发明涉及药物分析，更具体地说，涉及一种维生素b12注射液的检测方法。

背景技术：

1、维生素b12是一种水溶性维生素，对人体的造血功能、神经系统功能以及dna合成等都有重要作用。而维生素b12的注射液在临床上被广泛应用。然而，由于维生素b12注射液的成分复杂，其中，除了含有维生素b12外，还含有苯甲醇、氯化钠等物质。因此，如何有效地检测维生素b12注射液中的维生素b12含量，保证其质量和安全性，是药物分析技术领域和高效液相色谱技术领域的重要研究课题。

2、目前，现有的维生素b12注射液的检测方法主要是高效液相色谱法。这种方法通过将样品注入高效液相色谱仪，利用色谱柱将样品中的各种成分分离开来，然后通过检测器进行检测，从而得到各成分的含量。

3、然而，现有的高效液相色谱法在检测维生素b12注射液时，仍存在一些问题。现有方法的操作步骤较为复杂，且检测时间较长，通常需要几个小时，这影响了检测效率。因此，如何改进现有的高效液相色谱法，提高其检测效率和降低检测成本，是当前亟待解决的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种维生素b12注射液的检测方法，该方法具有较高的灵敏度，选择性好，检测限为1.3ng/ml。

2、为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

3、一种维生素b12注射液的检测方法，包括：

4、取待测品溶液进行液相色谱分析，测定待测品溶液中的维生素b12的含量；

5、所述液相色谱分析的条件包括：

6、(1)流动相a为磷酸氢二钠，流动相b为乙腈；所述流动相a的ph值为3.0～3.5；

7、(2)采用梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序包括：

8、0～1min，维持所述流动相b的体积百分比为20％，

9、1min～16min，所述流动相b的体积百分比由20％上升至30％，

10、16min～23min，所述流动相b的体积百分比由30％上升至40％，

11、23min～23.5min，所述流动相b的体积百分比由40％下降至20％，

12、23.5min～35min，维持所述流动相b的体积百分比为20％；

13、(3)检测波长包括355nm～365nm。

14、在本发明中，所述流动相a的ph值优选为3.5。

15、在本发明中，检测波长优选为361nm。

16、优选的，所述待测品溶液包括维生素b12；所述待测品溶液还包括苯甲醇、氯化钠、水中的一种或多种。

17、优选的，所述待测品溶液中，维生素b12的浓度为1～1.5mg/ml，优选为1mg/ml。

18、优选的，所述测定维生素b12的含量的步骤还包括：

19、取对照品的维生素b12，加溶剂溶解，制得对照品溶液，所述溶剂优选为15vol％的乙腈的水溶液；

20、取不同浓度的所述对照品溶液，分别按照所述液相色谱分析的条件进行测定并记录峰面积，根据不同浓度的峰面积建立线性方程；

21、将所述供试品的检测结果代入所述线性方程进行计算。

22、优选的，所述梯度洗脱的流速为0.8～1.2ml/min，优选为1.0ml/min。

23、优选的，所述流动相a中，所述磷酸氢二钠的浓度为0.020～0.028mol/l，优选为0.028mol/l。

24、所述流动相b中，所述乙腈的体积分数为15～20％，优选为15vol％的乙腈；所述流动相b优选为15vol％的乙腈的水溶液。

25、优选的，所述液相色谱分析的进样量为10～15μl，优选为10μl。

26、优选的，所述液相色谱分析中的色谱柱的柱温为25～35℃，优选为30℃。

27、优选的，所述液相色谱分析的色谱柱为c18色谱柱；所述色谱柱的长度为150mm，直径为4.6mm，填料粒径为5μm。

28、本发明通过优化实验条件或改进实验流程，提高了检测效率。相比于现有技术，本发明缩短了检测时间，从几小时缩短至几十分钟，大大提高了检测效率。另外，本发明的维生素b12注射液的检测方法具有较高的灵敏度，选择性好，检测限为1.3ng/ml，定量限为3.9ng/ml，实用性强，检测过程简单、快捷。

技术特征：

1.一种维生素b12注射液的检测方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述待测品溶液包括维生素b12；所述待测品溶液还包括苯甲醇、氯化钠、水中的一种或多种。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述待测品溶液中，维生素b12的浓度为1～1.5mg/ml。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述测定维生素b12的含量的步骤还包括：

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的流速为0.8～1.2ml/min。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相a中，所述磷酸氢二钠的浓度为0.020～0.028mol/l。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相b中，所述乙腈的体积分数为15％～20％。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱分析的进样量为10～15μl。

9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱分析中的色谱柱的柱温为25～35℃。

10.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述液相色谱分析的色谱柱为c18色谱柱；所述色谱柱的长度为150mm，直径为4.6mm，填料粒径为5μm。

技术总结本发明涉及药物分析技术领域，具体提供了一种维生素B12注射液的检测方法。本发明的检测方法包括：取待测品溶液进行液相色谱分析，测定待测品溶液中的维生素B12的含量。与现有技术相比，本发明的维生素B12注射液的检测方法具有较高的灵敏度，选择性好，检测限为1.3ng/ml，定量限为3.9ng/ml，实用性强，检测过程简单、快捷。技术研发人员：兰信兵,代欢,兰子涵受保护的技术使用者：海南海和制药有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/5