一种电泳用分离胶及其制备方法与流程

本发明涉及分离胶领域，具体为一种电泳用分离胶及其制备方法。

背景技术：

1、电泳是指荷电的胶体颗粒在电场中的移动，通常，按照样品分离原理的不同，电泳可以分为：区带电泳、移动界面电泳、稳态电泳；在溶液中进行电泳时，往往会出现扩散与对流的现象，这会严重影响到分离的效率，为了消除这些影响，目前广泛采用高分子凝胶作为支持介质，如琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。

2、聚丙烯酰胺凝胶已成为生物实验室分离生物蛋白质最基本也是最常用的分离介质材料，聚丙烯酰胺凝胶不仅能够分离生物大分子样品（核酸、蛋白质等），而且还可以研究生物大分子的分子量、带电荷数和等电点等，本文介绍了一种具有良好的机械性能和自愈合能力的电泳用分离胶。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种电泳用分离胶及其制备方法，以解决现有技术中存在的问题。

2、一种电泳用分离胶，所述电泳用分离胶是将去离子水、烯丙基胺贮液、丙烯酰氯贮液、丙烯醛贮液、分离胶缓冲液贮液、sds贮液、过硫酸铵和n,n,n’,n’-四甲基乙二胺在玻璃板之间反应后，再依次在异佛尔酮二异氰酸酯贮液、2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液和醋酸钙贮液中浸泡制得。

3、一种电泳用分离胶的制备方法，所述电泳用分离胶的制备方法主要包括以下制备步骤：

4、将两块清洁平整的玻璃置于制胶架上；将去离子水、烯丙基胺贮液、丙烯酰氯贮液、丙烯醛贮液、分离胶缓冲液贮液、sds贮液、过硫酸铵和n,n,n’,n’-四甲基乙二胺按体积比40~60：20~24：16~18：1~3：24~26：1：1：0.06~0.1混合均匀，倒入玻璃板之间，用去离子水液封，静置1.5~2.5h，制得凝胶；

5、将凝胶浸没在异佛尔酮二异氰酸酯贮液10~20s，取出，至无液滴滴落，再浸没在2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液中10~20s，取出，至无液滴滴落，室温下静置1.5~2.5h，浸没在醋酸钙贮液中2~3min，取出，制得分离胶。

6、作为优化，步骤（1）所述烯丙基胺贮液是将烯丙基胺与去离子水按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

7、作为优化，步骤（1）所述丙烯酰氯贮液是将丙烯酰氯与乙醇按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

8、作为优化，步骤（1）所述丙烯醛贮液是将丙烯醛与乙醇按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

9、作为优化，步骤（1）所述分离胶缓冲液贮液是将三羟甲基氨基甲烷与去离子水按质量比17~19：75~85混合均匀，并用3mol/l的盐酸溶液将ph调至8.5~9制得。

10、作为优化，步骤（1）所述sds贮液是将十二烷基硫酸钠与去离子水按质量比1：8~10混合均匀，配制而成。

11、作为优化，步骤（2）所述异佛尔酮二异氰酸酯贮液是将异佛尔酮二异氰酸酯与丙酮按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

12、作为优化，步骤（2）所述2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液是将2,2′-硫代双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)与去离子水按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

13、作为优化，步骤（2）所述醋酸钙贮液是将醋酸钙与去离子水按质量比1：8~10混合均匀，配制而成。与现有技术相比，本发明所达到的有益效果是：

14、本发明在制备电泳用分离胶时，将去离子水、烯丙基胺贮液、丙烯酰氯贮液、丙烯醛贮液、分离胶缓冲液贮液、sds贮液、过硫酸铵和n,n,n’,n’-四甲基乙二胺在玻璃板之间反应后，再依次在异佛尔酮二异氰酸酯贮液、2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液和醋酸钙贮液中浸泡，制得电泳用分离胶。

15、首先，将去离子水、烯丙基胺贮液、丙烯酰氯贮液、丙烯醛贮液、分离胶缓冲液贮液、sds贮液、过硫酸铵和n,n,n’,n’-四甲基乙二胺在玻璃板之间反应，利用双键与双键之间的聚合，酰氯与氨基之间的反应，使分离胶拥有更多的交联点，增强分离胶的机械性能；

16、其次，再依次在异佛尔酮二异氰酸酯贮液、2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液和醋酸钙贮液中浸泡，制得电泳用分离胶，分离胶中引入希夫碱钙配合物，可以使分离胶拥有更多的交联点，形成新的网格结构，增强分离胶的机械性能，分离胶还可以通过希夫碱与钙离子的结合达到自修复的效果。

技术特征：

1.一种电泳用分离胶，其特征在于，所述电泳用分离胶是将去离子水、烯丙基胺贮液、丙烯酰氯贮液、丙烯醛贮液、分离胶缓冲液贮液、sds贮液、过硫酸铵和n,n,n’,n’-四甲基乙二胺在玻璃板之间反应后，再依次在异佛尔酮二异氰酸酯贮液、2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液和醋酸钙贮液中浸泡制得。

2.一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，所述电泳用分离胶的制备方法主要包括以下制备步骤：

3.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述烯丙基胺贮液是将烯丙基胺与去离子水按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

4.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述丙烯酰氯贮液是将丙烯酰氯与乙醇按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

5.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述丙烯醛贮液是将丙烯醛与乙醇按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

6.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述分离胶缓冲液贮液是将三羟甲基氨基甲烷与去离子水按质量比17~19：75~85混合均匀，并用3mol/l的盐酸溶液将ph调至8.5~9制得。

7.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述sds贮液是将十二烷基硫酸钠与去离子水按质量比1：8~10混合均匀，配制而成。

8.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述异佛尔酮二异氰酸酯贮液是将异佛尔酮二异氰酸酯与丙酮按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

9.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述2-(3,4-二羟基苯基)乙胺贮液是将2,2′-硫代双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)与去离子水按质量比2~4：6~8混合均匀，配制而成。

10.根据权利要求2所述的一种电泳用分离胶的制备方法，其特征在于，步骤（2）所述醋酸钙贮液是将醋酸钙与去离子水按质量比1：8~10混合均匀，配制而成。

技术总结本发明公开了一种电泳用分离胶及其制备方法，涉及分离胶领域。本发明在制备电泳用分离胶时，将去离子水、烯丙基胺贮液、丙烯酰氯贮液、丙烯醛贮液、分离胶缓冲液贮液、SDS贮液、过硫酸铵和N,N,N’,N’‑四甲基乙二胺在玻璃板之间反应后，再依次在异佛尔酮二异氰酸酯贮液、2‑(3,4‑二羟基苯基)乙胺贮液和醋酸钙贮液中浸泡，制得电泳用分离胶。本发明制备的电泳用分离胶具有良好的机械性能和自愈合能力。技术研发人员：顾正达,刘玲,吴宇清受保护的技术使用者：万莱福生物技术（深圳）有限责任公司技术研发日：技术公布日：2024/9/26