一种药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法与流程

本发明涉及药桑组培，更具体地说，本发明涉及一种药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法。

背景技术：

1、药桑在植物分类学上属桑科moraceae桑属morus l.黑桑种morus nigra l.，染色体倍数2n＝22x＝308，是自然界内极为罕见的半栽培型野生桑树珍稀资源，是珍贵的药物和营养制品资源，其果、枝、叶、根均具有较高营养价值和药用价值，是重要的药用果树、珍贵的保健水果，具有补血、镇静等医疗功效。

2、药桑遗传背景极为复杂且染色体倍性高(22x)，且药桑开雌花，其桑椹结实性差，种子不能萌发，在生产中大量采用嫁接、扦插等方式进行栽培。药桑扦插极不易生根，嫁接成活率较低，亲和力弱、愈合部位显著膨大；此外，药桑嫁接出圃率低、建园缓慢，极大地限制了药桑种植的规模化发展和药食用功能成分的产业化开发利用。

3、为解决困扰药桑引种的难题，扩大药桑栽培面积、增加药桑植株数量和原材料供应，2020年，发明人基于药桑冬芽为外植体，以dkw为基本培养基，结合植物激素zt、6-ba和iba，进一步优化、建立了药桑冬芽离体组培再生快繁技术体系，并授权发明专利1项：一种药桑冬芽组织培养再生快速繁殖方法，发明专利号：zl2020109510861。该专利采用外植体消毒-初代培养(诱导，30d，得无菌苗)-继代培养(增殖，25d，得丛生苗)-生根培养(生根，15d见不定根，25d生根率96.5％，得不定根植株)-炼苗移栽(炼苗培养瓶于大棚，闭盖2d，松盖2d，去盖1d；清晰附着于根部的培养基，然后移栽至基质，倒扣保湿，7d去倒扣，30d成活率96％)，但步骤繁多，培养耗时较长。

4、为了进一步简化药桑组培苗生根诱导、炼苗、根系清洗、移栽成苗等技术操作流程，本发明基于药桑无根组培苗为试材，建立了药桑组培苗瓶内诱导瓶外移栽生根成苗技术体系，将原来的“瓶内诱导生根(25d形成不定根)、炼苗、清洗根系培养基、移栽成苗”等步骤简化为“瓶内诱导(10d未形成不定根)、瓶外移栽生根成苗”，极大地简化了药桑组培苗繁育技术流程，有效地避免了瓶内生根苗移栽过程中，对根系附着培养基清洗时造成的物理损伤，杜绝了因培养基清洗不干净导致微生物滋生造成移栽成苗率低等问题，提升了药桑种苗繁育效率，降低了人工投入、节约了时间成本，为后续药桑组培苗工厂化周年繁育提供了坚实的技术保障。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明提供了一种药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，简化步骤，提高苗木繁育效率。

2、为了实现本发明的这些目的，本发明提供的一种药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，包括：

3、药桑无根组培苗接种至生根诱导培养基1/2dkw+iba2.5mg/l+蔗糖30g/l+琼脂7.0g/l+pvp-k30 3.0g/l，诱导培养5～10d，未见不定根形成；诱导培养的培养温度24～26℃，光照强度1500～2500lux，16h光照，8h黑暗；

4、将诱导培养5～10d但未见不定根形成的组培苗移栽至基质中，提供炼苗环境，进行炼苗培养得到药桑成苗。

5、优选的，诱导培养天数为5d或10d。

6、优选的，炼苗环境为：

7、温室环境，温度24～26℃，光照强度1500～2500lux，16h光照，8h黑暗；或

8、室外环境，温度22～28℃，避免阳光直射。

9、优选的，炼苗方法为：

10、第一阶段，使用无孔杯体罩住组培苗进行培养；

11、第二阶段，使用3孔杯体罩住组培苗继续培养；

12、第三阶段，使用6孔杯体罩住组培苗继续培养。

13、优选的，针对温室环境：

14、第一阶段持续20～30d，第二阶段持续2～4d，第三阶段持续2～4d，炼苗时长共26～34d。

15、优选的，针对室外环境：

16、第一阶段持续25～35d，第二阶段持续5～7d，第三阶段持续7～8d，炼苗时长共36～45d。

17、优选的，杯体为一次性透明塑料杯。

18、优选的，移栽时期为3月份或4月份或5月份；更优选的，3月份或4月份采用温室环境炼苗；5月份使用室外环境炼苗。

19、优选的，所述药桑无根组培苗为继代培养25d的药桑无根组培苗。

20、优选的，基质为泥炭土。

21、本发明至少包括以下有益效果：

22、1、相比专利号zl2020109510861的现有专利技术，本发明的方法不但减少和简化生根、炼苗、移栽等过程步骤，缩短了时间，且能够保证极高的存活率。

23、2、本发明基于药桑无根组培苗为试材，建立了药桑组培苗瓶内诱导瓶外移栽生根成苗技术体系，将现有技术的“瓶内诱导生根(25d基本形成不定根)、炼苗、清洗根系培养基、移栽成苗”等步骤简化为“瓶内诱导(10d未形成不定根)、瓶外移栽生根成苗”，极大地简化了药桑组培苗繁育技术流程，有效地避免了瓶内生根苗移栽过程中，对根系附着培养基清洗时造成的物理损伤，杜绝了因培养基清洗不干净导致微生物滋生造成移栽成苗率低等问题，提升了药桑种苗繁育效率，降低了人工投入、节约了时间成本，为后续药桑组培苗工厂化周年繁育提供了坚实的技术保障。

24、3、在一个实施例中，生根培养基诱导培养5d和10d后移栽，30d后统计成活率分别为62.86％和88.57％，显著高于通过植物生长激素诱导瓶外移栽生根的成活率。

25、4、在另外一个实施例中，生根培养基诱导培养5d和10d后移栽炼苗，结合炼苗环境、炼苗方法和炼苗时长等方面的优化，炼苗时间共26～34d，统计成活率可达90.5％～100％。

26、本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

技术特征：

1.一种药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，包括：

2.如权利要求1所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，诱导培养天数为5d或6d或7d或8d或9d或10d。

3.如权利要求1所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，炼苗环境为：

4.如权利要求3所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，炼苗方法为：

5.如权利要求4所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，针对温室环境：

6.如权利要求4所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，针对室外环境：

7.如权利要求4所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，杯体为一次性透明塑料杯。

8.如权利要求4所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，移栽时期为3月份或4月份或5月份。

9.如权利要求1所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，所述药桑无根组培苗为继代培养25d的药桑无根组培苗。

10.如权利要求1所述的药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，其特征在于，基质为泥炭土。

技术总结本发明公开了一种药桑组培苗瓶内诱导瓶外生根一步成苗方法，属于药桑组培技术领域，包括：药桑无根组培苗接种至生根诱导培养基1/2DKW+IBA2.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7.0g/L+PVP‑K30 3.0g/L，诱导培养5～10d，未见不定根形成；诱导培养的培养温度24～26℃，光照强度1500～2500lux，16h光照，8h黑暗；将诱导培养5～10d但未见不定根形成的组培苗移栽至基质中，提供炼苗环境，进行炼苗得到药桑成苗。本发明不但减少和简化生根、炼苗、移栽等过程步骤，缩短了时间，且能够保证极高的存活率。技术研发人员：莫荣利,张娜,林强,邱长玉,韦伟,黄胜,张朝华,刘丹,曾燕蓉,陆晓媚,朱光书,石华月受保护的技术使用者：广西壮族自治区蚕业技术推广站（广西壮族自治区蚕种质量检验检疫站、广西壮族自治区蚕业科学研究院）技术研发日：技术公布日：2024/10/10