GPR139受体激活检测方法、生理功能评价方法及应用与流程

本发明涉及生物。具体地，涉及gpr139受体激活检测方法、生理功能评价方法及应用。

背景技术：

1、糖皮质激素(glucocorticoid，gc)的功能主要通过糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor，gr)和盐皮质激素受体(mineralocorticoid receptor，mr)完成，gr介导关于情感、认知和神经元的生存能力、可塑性、基因表达方面的损伤作用，而mr则起着保护作用。mr/gr的平衡对神经元兴奋性、应激反应及行为适应起关键作用。应激状态mr/gr mrna比例异常，使神经元处于易损状态，易于发生应激损伤性疾病如抑郁症。gc水平长期升高会导致海马神经元的退行性变化，使抑郁症患者发生认知障碍，表现出情绪低下、失眠等症状。

2、临床上，常用检测糖皮质激素的方法评价原发性醛固酮增高症，继发性醛固酮增多症，柯兴氏综合征，垂体acth瘤等。

3、当应激刺激机体时皮质激素会上升，应激事件过去后皮质激素下降。长时间的应激刺激与hpa通路亢奋、睡眠时间缩短以及减少深度睡眠和快速动眼睡眠相关，从而导致睡眠质量较差、记忆力受损、情绪调节功能较差，这反过来又会导致更多的压力。压力越大，睡眠质量越差。

4、因此，开发出可使受到应激刺激的机体恢复平衡的药物或方法尤为重要。

5、因此，本领域迫切需要开发出可高效、应对应激刺激下减缓皮质激素上升或降低皮质激素的方法。

技术实现思路

1、本发明提供了gpr139受体激活检测方法、生理功能评价方法及应用。

2、在本发明的第一方面，提供了一种评价测试物对gpr139受体活性的调控功能的方法，包括步骤：

3、(a)提供一测试物；

4、(b)在测试组中，提供第一检测样本，并检测所述第一检测样本中皮质激素的水平，记为y1；并且在阴性对照组中，提供第二检测样本，并检测所述第二检测样本中皮质激素的水平，记为y0；

5、其中，所述第一检测样本和第二检测样本为血浆样本或血液样本或组织样本，并且为相同类型的样本；

6、其中，所述测试组中，所述第一检测样本来自于施用了所述测试物的模型动物；而所述阴性对照组中，所述第二检测样本来自于未施用了所述测试物的模型动物；除了施用和未施用所述测试物的区别之外，所述测试组和所述阴性对照组的测试条件相同；

7、(c)将第一检测样本中皮质激素的水平y1与第二检测样本中皮质激素的水平y0进行比较，

8、其中，当皮质激素的水平y1显著低于第二检测样本中皮质激素的水平y0时，表明所述测试物为gpr139受体活性的激动剂；当皮质激素的水平y1显著高于第二检测样本中皮质激素的水平y0时，表明所述测试物为gpr139受体活性的抑制剂。

9、在另一优选例中，当所述测试物是激动剂时，还包括步骤：

10、(d)将所述测试物施用于模型动物，并测量所述测试物对模型动物睡眠的影响。

11、在另一优选例中，当所述测试物是激动剂时，还包括步骤：

12、(e)将所述测试物与助眠药物联合应用于模型动物，并测量联合应用对模型动物睡眠的影响。

13、在另一优选例中，所述助眠药物包括：戊巴比妥钠。

14、在另一优选例中，所述测量包括测量模型动物的入睡潜伏时间、睡眠时间、或其组合。

15、在另一优选例中，所述方法包括：基于步骤(c)的比较结果和/或步骤(d)的测量结果，对所述测试物作为gpr139受体相关药物的疗效进行评价。

16、在另一优选例中，所述测试物包括小分子化合物、核酸药物、抗体、植物提取物或其组合。

17、在另一优选例中，所述测试物是gpr139配体。

18、在另一优选例中，所述测试物为gpr139受体活性的激动剂或gpr139受体活性的抑制剂。

19、在另一优选例中，所述测试物为gpr139受体活性的激动剂。

20、在另一优选例中，第二检测样本中皮质激素的水平y0与第一检测样本中所述皮质激素的水平y1之比(y0/y1)≥120％，较佳地≥150％，更佳地≥200％，则表明所述所述测试物为gpr139受体活性的激动剂；或

21、第一检测样本中皮质激素的水平y1与第二检测样本中所述皮质激素的水平y0之比(y1/y0)≥120％，较佳地≥150％，更佳地≥200％，则表明所述所述测试物为gpr139受体活性的抑制剂。

22、在另一优选例中，所述皮质激素选自下组：糖皮质激素、盐皮质激素、或其组合。

23、在另一优选例中，所述皮质激素是糖皮质激素。

24、在另一优选例中，所述模型动物包括啮齿动物(如小鼠、大鼠)、人和非人灵长动物。

25、在另一优选例中，所述糖皮质激素可采用下组的方法检测：酶联免疫吸附法(elisa)、放射免疫法(eia)、高效液相法(hplc)、液质联用法(lc-ms)、荧光检测法、同位素标记法、非同位素标记法、或其组合。

26、在另一优选例中，所述测试物为液态、固体、或半固体。

27、在另一优选例中，所述测试物通过以下方式施用于模型动物：口服、静脉注射、局部施用。

28、在另一优选例中，所述“显著低于”指y0/y1≥1.2，较佳地，≥1.5，更佳地，≥2。

29、在另一优选例中，所述“显著高于”指y1/y0≥1.2，较佳地，≥1.5，更佳地，≥2。

30、在另一优选例中，所述方法是非诊断性和非治疗性的。

31、在另一优选例中，所述方法为体外的方法。

32、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

技术特征：

1.一种评价测试物对gpr139受体活性的调控功能的方法，其特征在于，包括步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，当所述测试物是激动剂时，还包括步骤：

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述测量包括测量模型动物的入睡潜伏时间、睡眠时间、或其组合。

4.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述方法包括：基于步骤(c)的比较结果和/或步骤(d)的测量结果，对所述测试物作为gpr139受体相关药物的疗效进行评价。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述测试物包括小分子化合物、核酸药物、抗体、植物提取物或其组合。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述测试物是gpr139配体。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，第二检测样本中皮质激素的水平y0与第一检测样本中所述皮质激素的水平y1之比(y0/y1)≥120％，较佳地≥150％，更佳地≥200％，则表明所述所述测试物为gpr139受体活性的激动剂；或

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述皮质激素选自下组：糖皮质激素、盐皮质激素、或其组合。

9.权利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖皮质激素采用下组的方法检测：酶联免疫吸附法(elisa)、放射免疫法(eia)、高效液相法(hplc)、液质联用法(lc-ms)、荧光检测法、同位素标记法、非同位素标记法、或其组合。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述“显著低于”指y0/y1≥1.2，较佳地≥1.5，更佳地≥2。

技术总结本发明提供了一种GPR139受体激活检测方法、生理功能评价方法及应用。具体地，本发明方法包括步骤：(a)提供一测试物；(b)在测试组中，提供第一检测样本，并检测所述第一检测样本中皮质激素的水平，记为Y1；并且在阴性对照组中，提供第二检测样本，并检测所述第二检测样本中皮质激素的水平，记为Y0；(c)将第一检测样本中皮质激素的水平Y1与第二检测样本中皮质激素的水平Y0进行比较，并判断所述测试物是否是GPR139受体活性的激动剂或抑制剂。本发明方法操作简便，快速、重复性高，且易于转化到临床应用。技术研发人员：陈景才受保护的技术使用者：浙江友宁生物医药科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/17