一种微生物种衣剂及其应用

本发明属于微生物，具体涉及一种微生物种衣剂及其应用。

背景技术：

1、种衣剂是一种特殊的农药制剂，由活性组分(如微生物、杀虫剂、杀菌剂等)、成膜剂和其他助剂加工制成。它可以直接或经稀释后包裹在种子表面，形成一层具有一定强度和通透性的保护层膜。

2、相较于传统的浸种或拌种农药乳剂、粉剂，种衣剂具有显著优势。传统药剂附着性差，易脱落，既影响药效又可能污染环境，且对人畜安全构成威胁。而种衣剂不仅能在播种前对种子进行消毒，还能在种子发芽和苗成长过程中持续释放有效成分，对种子带菌和土壤病虫害起到持续的防治作用，还可以促进幼苗生长，提高产量。

3、然而，现有种衣剂也存在一些缺点。首先，成膜剂的通透性不佳，可能会影响种子的发芽率。其次，部分种衣剂的附着性差，导致作用成分极易脱落，与未包衣的种子无异。最后，绝大多数种衣剂以农药为主要成分，其中高毒高残留的农药如呋喃丹、克灵菌等使用广泛，这与农药和种衣剂高效低毒甚至无毒的发展趋势不符。

4、通过运用生物菌类间的拮抗作用，生物型种衣剂选择性地培养有益拮抗菌，以有效抵抗有害病菌的侵害和繁殖，从而达到防病的目的。其特点在于完全无污染、无毒害，代表着种子包衣技术和农药的未来趋势。

5、堆肥芽孢杆菌(bacillus stercoris)属于枯草芽孢杆菌的亚种，是一类能产生抗力内生孢子的革兰氏阳性菌，细胞呈杆状且外层覆盖大量的吡啶二羧酸钙，能够产生大量的次生代谢产物。目前多应用于污泥无害化处理、食品、微生物除臭剂、微生物腐熟剂和生物水溶有机肥中。

6、目前还未有一种利用包含堆肥芽孢杆菌(bacillus stercoris)的复合菌剂制备种衣剂，促进作物生长的技术方案。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种微生物种衣剂，该微生物种衣剂中采用复合微生物菌剂，所述复合微生物菌剂进一步为包含抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007及保藏编号为cctcc no：m 20221937贝莱斯芽孢杆菌的复合菌剂；采用复合菌剂的微生物种衣剂对小麦幼苗在盐碱土壤和含盐水溶液的生长起到促进作用。

2、本发明是通过以下技术方案实现的：

3、本发明提出一种微生物种衣剂，所述微生物种衣剂包含下列至少一种：

4、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007；或，

5、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007培养物或其加工物；或，

6、包含所述的抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007的菌剂；或，

7、复合微生物菌剂，所述复合微生物菌剂为包含所述的抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007的菌剂；

8、所述抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007，于2024年08月28日保藏于中国典型培养物保藏中心，其保藏编号：cctcc no:m 20241868。

9、在上述技术方案中，所述复合微生物菌剂还包括贝莱斯芽孢杆菌菌剂，所述贝莱斯芽孢杆菌选自保藏编号为cctcc no：m 20221937的贝莱斯芽孢杆菌。

10、在上述技术方案中，所述的复合微生物菌剂，其中抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007芽孢含量不低于1000亿cfu/g；

11、和/或，

12、所述贝莱斯芽孢杆菌菌剂中贝莱斯芽孢杆菌芽孢含量不低于1300亿cfu/g。

13、在上述技术方案中，所述的微生物种衣剂，包括以下重量份原料：

14、复合微生物菌剂100～200份；

15、成膜剂3～5份；

16、丝素蛋白1～3份；

17、海藻糖3～5份。

18、在上述技术方案中，所述复合微生物菌剂包括：45～55重量份的所述微生物堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007菌剂；45～55重量份的贝莱斯芽孢杆菌菌剂。

19、在上述技术方案中，其中成膜剂为羧甲基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、聚乙烯醋酸纤维盐或聚乙烯醇中的至少一种。

20、在本发明另一个方面，本发明提出一种微生物种衣剂制备方法，包括以下步骤：

21、培养有益微生物，收集细胞菌体，得到复合微生物菌剂；将复合微生物菌剂、成膜剂、丝素蛋白、海藻糖、蒸馏水进行混合，得到所述微生物种衣剂；

22、所述复合微生物菌剂制备过程为：微生物堆肥芽孢杆菌bacillus stercorisc007所用的培养基为玉米淀粉8g/l、豆饼粉8.5g/l、k2hpo42 g/l、kh2po41 g/l、znso40.1 g/l、mgso42mg/l、cuso42 mg/l、na2moo41 mg/l；

23、贝莱斯芽孢杆菌所用的培养基为玉米淀粉6g/l、豆饼粉7g/l、大米粉1.5g/l、麸皮1.5g/l、玉米浆1g/l、碳酸钙0.5g/l、硝酸钾0.2g/l、硫酸镁0.3g/l、k2hpo40.2 g/l、na2hpo40.2g/l；两个菌株均使用20l发酵罐发酵，每4h取样，当芽孢成熟度50％停罐；

24、所得两种菌液分别采用高温离心干燥的方式进行菌液直喷分别得到微生物堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007菌剂及贝莱斯芽孢杆菌菌剂，二者混合后获得复合微生物菌剂；所述复合微生物菌剂包括：45～55重量份的所述微生物堆肥芽孢杆菌bacillusstercoris c007菌剂；45～55重量份的贝莱斯芽孢杆菌菌剂；

25、所述贝莱斯芽孢杆菌选自保藏编号为cctcc no：m 20221937的贝莱斯芽孢杆菌。

26、在本发明另一个方面，本发明提出一种种子包衣方法，采用上述技术方案中所述的微生物种衣剂用于种子包衣，以质量比计，所述微生物种衣剂:种子＝1:10～40；

27、进一步的，采用上述技术方案中所述的微生物种衣剂用于种子包衣，以质量比计，复合微生物种衣剂:种子:溶剂＝1:10～40:10；进一步的，所述溶剂为蒸馏水。

28、在上述技术方案中，当对种子完成包衣后，每粒种子包裹的所述微生物种衣剂中芽孢含量为1×106～1×108cfu/粒种子。

29、在本发明另一个方面，本发明提出上述技术方案中所述的微生物种衣剂在下列至少一种中的应用：

30、提高作物抗逆性，特别的，抗盐碱性；

31、促进作物生长。

32、本发明种所述的一株从堆肥中分离纯化获得的抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007，该菌株已经进行保藏，中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，于2024年08月28日保藏，其保藏编号：cctcc no:m 20241868。

33、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007具有将无机磷(p)活化能力，能够以难溶性磷酸盐为磷源进行生长，并将其转化为可溶性磷酸盐。在实验室摇瓶条件下，所述堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007对磷酸三钙的转化量达189.17mg/l。

34、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007，可以在l-色氨酸诱导下分泌吲哚乙酸(iaa)，分泌量可达5.29mg/l。

35、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007可在盐碱环境中生长，其生长耐受的nacl浓度＞14％(w/v，140g/l)，能耐受的ph值为8.0～10.5。

36、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007具有纤维素降解能力，以羧甲基纤维素钠为唯一碳源时，该菌株的纤维素酶活性为6.12u/ml。

37、本发明的优点和有益效果为：

38、本发明公开的微生物种衣剂，其中包含上述复合菌剂，不仅能够增强有益微生物在盐碱地农田土壤和植物根系的存活和定殖，还具有固氮、解磷及分泌植物生长素(iaa)的功能，对植物起到促生作用。该微生物种衣剂不仅能够为农作物的种子提供必要的营养物质和保护，还能够提高种子发芽率，改进种苗质量，增强种苗的抗逆性，能起到杀虫、防病和促生等作用。并且生物型种衣剂中的微生物活体可以快速大量繁殖和定殖，能够分泌多种蛋白类和激素类活性物质，天然无毒害，并持续性地发挥作用，可影响植物的整个生长期。

39、抗盐碱溶磷堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris与贝莱斯芽孢杆菌菌剂(保藏编号为cctcc no：m 20221937，具体可见申请号为2023113257516的专利申请中公开内容)复合制作的复合菌剂，能够互相协同，实现1+1大于2的效果。

40、保藏信息

41、堆肥芽孢杆菌bacillus stercoris c007，该菌株已进行保藏，保藏单位：中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏日期：2024年08月28日，保藏编号：cctcc no:m 20241868。