JAK2抑制剂的结晶形式的制作方法

jak2抑制剂的结晶形式
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求2019年2月12日提交的法国申请号fr1902018的优先权，所述申请的全文据此以引用的方式并入。
发明领域
3.本发明提供了可用作蛋白激酶抑制剂的化合物及其组合物。
4.发明背景
5.近年来，通过更好地了解与疾病相关的酶和其它生物分子的结构，对寻找新的治疗剂有很大帮助。已经成为广泛研究主题的一类重要的酶是蛋白激酶。
6.蛋白激酶构成一大家族的结构相关酶，这些酶负责控制细胞内的多种信号转导过程。由于结构和催化功能的保守性，蛋白激酶被认为是从共同的祖先基因进化而来的。几乎所有激酶都含有类似的250-300个氨基酸催化结构域。激酶可以根据它们磷酸化的底物(例如，蛋白质-酪氨酸、蛋白质-丝氨酸/苏氨酸、脂质等)归类到家族中。
7.一般来说，蛋白激酶通过影响从三磷酸核苷到参与信号传导途径的蛋白受体的磷酰基转移来介导细胞内信号传导。这些磷酸化事件充当可以调节或调控靶蛋白生物功能的分子打开/关闭开关。这些磷酸化事件最终响应多种细胞外和其它刺激而触发。此类刺激的实例包括环境和化学应激信号(例如，渗透性休克、热休克、紫外辐射、细菌内毒素和h2o2)、细胞因子(例如，白细胞介素-1(il-1)和肿瘤坏死因子α(tnf-α))和生长因子(例如，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(gm-csf)和成纤维细胞生长因子(fgf))。细胞外刺激可以影响与细胞生长、迁移、分化、激素分泌、转录因子激活、肌肉收缩、葡萄糖代谢、蛋白质合成控制和细胞周期调控有关的一种或多种细胞反应。
8.如上文所描述，许多疾病与由蛋白激酶介导的事件触发的异常细胞反应相关。这些疾病包括但不限于自身免疫性疾病、炎性疾病、骨病、代谢疾病、神经和神经退行性疾病、癌症、心血管疾病、过敏和哮喘、阿尔茨海默氏病(alzheimer's disease)和激素相关疾病。因此，仍然需要找到可用作治疗剂的蛋白激酶抑制剂。


技术实现要素：

9.在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的一种或多种结晶形式：
[0010][0011]
在一些实施方案中，化合物1可用于治疗骨髓增生性病症。在一些实施方案中，骨髓增生性病症选自骨髓纤维化、真性红细胞增多症和原发性血小板增多症。在一些实施方
案中，骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化或继发性骨髓纤维化。在一些实施方案中，继发性骨髓纤维化选自真性红细胞增多症后骨髓纤维化和原发性血小板增多症后骨髓纤维化。
[0012]
在一些实施方案中，本公开提供了一种抑制生物样品中jak2激酶或其突变体的活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)或其组合物接触的步骤。
[0013]
根据另一个实施方案，本公开涉及一种抑制患者中jak2激酶或其突变体的活性的方法，所述方法包括向所述患者施用化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)或其组合物的步骤。在其它实施方案中，本公开提供了一种治疗有需要的患者的jak2介导的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述患者施用化合物1或其组合物的步骤。
附图说明
[0014]
图1描绘了化合物1的形式a的ft-拉曼光谱。
[0015]
图2描绘了化合物1的形式a的x射线粉末衍射(xrpd)图样。
[0016]
图3a描绘了化合物1的形式a的热重分析(tga)图样。图3b描绘了化合物1的形式a的差示扫描量热法(dsc)图样。
[0017]
图4描绘了化合物1的形式b的ft-拉曼光谱。
[0018]
图5描绘了化合物1的形式b的xrpd图样。
[0019]
图6a描绘了化合物1的形式b的tga图样。图6b描绘了化合物1的形式b的dsc图样。
[0020]
图7描绘了化合物1的形式c的xrpd图样。
[0021]
图8描绘了化合物1的形式d的xrpd图样。
[0022]
图9描绘了化合物1的形式e的xrpd图样。
[0023]
图10描绘了化合物1的形式f的xrpd图样。
[0024]
图11描绘了化合物1的形式f的tga图样。
[0025]
图12描绘了化合物1的形式f的动态蒸气吸附(dvs)等温线。
[0026]
图13描绘了化合物1的形式g的xrpd图样。
[0027]
图14描绘了化合物1的形式g的tga图样。
[0028]
图15描绘了化合物1的形式g的dvs等温线。
[0029]
图16描绘了化合物1的形式h的xrpd图样。
[0030]
图17描绘了化合物1的形式h的tga图样。
[0031]
图18描绘了化合物1的形式h的dvs等温线。
[0032]
图19描绘了化合物1的形式i的xrpd图样。
具体实施方式
[0033]
本发明的某些方面的一般描述
[0034]
据此以引用的方式并入本文中的2009年5月5日颁发的美国专利7,528,143(“'143专利”)描述了某些2,4-二取代嘧啶化合物，所述化合物可用于治疗骨髓增生性疾病，包括真性红细胞增多症、原发性血小板增多症和骨髓纤维化(例如原发性骨髓纤维化和继发性骨髓纤维化，如真性红细胞增多症后骨髓纤维化和原发性血小板增多症后骨髓纤维化)。此
类化合物包括n-叔丁基-3-[(5-甲基-2-{[4-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)氨基]苯磺酰胺：
[0035][0036]
n-叔丁基-3-[(5-甲基-2-{[4-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)氨基]苯磺酰胺，指定为化合物编号lvii，并且在'143专利的实施例90中详细描述了它的合成。
[0037]
n-叔丁基-3-[(5-甲基-2-{[4-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)氨基]苯磺酰胺在证明对janus激酶2(jak2)的抑制的多种测定和治疗模型中有活性。因此，n-叔丁基-3-[(5-甲基-2-{[4-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)氨基]苯磺酰胺及其盐、水合物或溶剂化物可用于治疗一种或多种与jak2活性相关的病症。
[0038]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的一种或多种结晶形式：
[0039][0040]
应了解，化合物1的结晶形式可以呈纯净或未溶剂化形式、水合形式和/或溶剂化形式存在。在一些实施方案中，化合物1的结晶形式是纯净或未溶剂化晶体形式，并且因此没有任何水或溶剂并入晶体结构中。在一些实施方案中，化合物1的结晶形式是水合或溶剂化形式。在一些实施方案中，化合物1的结晶形式是水合物/溶剂化物形式(在本文中也称为“杂溶剂化物”)。
[0041]
因此，在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的一种或多种结晶无水形式：
[0042][0043]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的一种或多种结晶水合物形式：
[0044][0045]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的一种或多种结晶溶剂化物形式：
[0046][0047]
在一些实施方案中，本公开提供包含化合物1的结晶形式的样品，其中所述样品基本上不含杂质。如本文所用，术语“基本上不含杂质”意指样品不含显著量的外来物质。在一些实施方案中，包含化合物1的结晶形式的样品基本上不含无定形化合物1。在某些实施方案中，样品包含至少约90重量％的化合物1的结晶形式。在某些实施方案中，样品包含至少约91重量％、至少约92重量％、至少约93重量％、至少约94重量％的化合物1的结晶形式。在某些实施方案中，样品包含至少约95重量％的化合物1的结晶形式。在其它实施方案中，样品包含至少约99重量％的化合物1的结晶形式。
[0048]
根据一些实施方案，样品包含至少约95、97、97.5、98.0、98.5、99、99.5、99.8重量百分比(wt％)的化合物1的结晶形式，其中百分比基于样品的总重量。根据一些实施方案，包含化合物1的结晶形式的样品包含不超过约5.0％的总有机杂质。在一些实施方案中，包含化合物1的结晶形式的样品包含不超过约3.0％的总有机杂质。在一些实施方案中，包含化合物1的结晶形式的样品包含不超过约1.5％的总有机杂质。在一些实施方案中，包含化合物1的结晶形式的样品包含不超过约1.0％的总有机杂质。在一些实施方案中，包含化合物1的结晶形式的样品包含不超过约0.6％的总有机杂质。在一些实施方案中，包含化合物1的结晶形式的样品包含不超过约0.5％的总有机杂质。在一些实施方案中，通过hplc测量总有机杂质的百分比。
[0049]
已经发现化合物1可以呈至少九种不同的晶体形式或多晶型物存在。
[0050]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的结晶水合物形式。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶水合物形式是一水合物。在一些实施方案中，化合物1的结晶一水合物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自4.3、9.6、10.0、12.4、12.7和17.0
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶一水合物形式是形式a。
[0051]
在一些实施方案中，形式a的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0052][0053][0054]
在一些实施方案中，形式a的特征在于图1中所描绘的ft-拉曼光谱。
[0055]
在一些实施方案中，形式a的特征在于图2中所描绘的xrpd图样。
[0056]
在一些实施方案中，形式a的特征在于图3a中所描绘的tga图样。在一些实施方案中，形式a的特征在于图3b中所描绘的dsc图样。
[0057]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的结晶三水合物形式。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶三水合物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自5.4、6.2、11.6、13.9、16.4和16.7
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶三水合物形式是形式b。
[0058]
在一些实施方案中，形式b的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0059][0060][0061]
在一些实施方案中，形式b的特征在于图4中所描绘的ft-拉曼光谱。
[0062]
在一些实施方案中，形式b的特征在于图5中所描绘的xrpd图样。
[0063]
在一些实施方案中，形式b的特征在于图6a中所描绘的tga图样。在一些实施方案中，形式b的特征在于图6b中所描绘的dsc图样。
[0064]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的结晶无水形式。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶无水形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自4.3、6.2、8.6、9.7、13.6和17.3
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶无水形式是形式c。
[0065]
在一些实施方案中，形式c的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0066]
[0067][0068]
在一些实施方案中，本公开提供了一种制备化合物1的结晶无水形式的方法，所述方法包括在惰性气氛下将形式a自约40℃加热至约80℃。因此，在一些实施方案中，本公开提供了一种制备形式c的方法，所述方法包括：
[0069]
(a)提供形式a；以及
[0070]
(b)在惰性气氛下将形式a自约40℃加热至约80℃。
[0071]
在一些实施方案中，形式c的特征在于图7中所描绘的xrpd图样。
[0072]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的结晶无水形式，所述形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自12.8、13.6、14.9、16.1和17.2
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶无水形式是形式d。
[0073]
在一些实施方案中，形式d的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0074][0075][0076]
在一些实施方案中，本公开提供了一种制备化合物1的结晶无水形式的方法，所述方法包括在惰性气氛下将形式b自约25℃加热至约70℃。因此，在一些实施方案中，本公开提供了一种制备形式d的方法，所述方法包括：
[0077]
(c)提供形式b；以及
[0078]
(d)在惰性气氛下将形式b自约25℃加热至约70℃。
[0079]
在一些实施方案中，形式d的特征在于图8中所描绘的xrpd图样。
[0080]
在一些实施方案中，本公开提供了化合物1的结晶溶剂化物形式。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶溶剂化物形式是单溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶单溶剂化物形式是单异丙醇溶剂化物。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶单异丙醇溶剂化物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自7.2、10.4、10.8、13.2和17.5
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶单异丙醇溶剂化物形式是形式e。
[0081]
在一些实施方案中，形式e的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0082][0083][0084]
在一些实施方案中，形式e的特征在于图9中所描绘的xrpd图样。
[0085]
在一些实施方案中，化合物1的结晶溶剂化物形式是四溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶四溶剂化物形式是四异丙醇溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶四异丙醇溶剂化物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自5.3、6.4、8.2、10.5、15.3和15.7
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶四异丙醇溶剂化物形式是形式f。
[0086]
在一些实施方案中，形式f的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0087][0088]
在一些实施方案中，形式f的特征在于图10中所描绘的xrpd图样。
[0089]
在一些实施方案中，形式f的特征在于图11中所描绘的tga图样。
[0090]
在一些实施方案中，形式f的特征在于图12中所描绘的dvs等温线。
[0091]
在一些实施方案中，化合物1的结晶溶剂化物形式是杂溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶杂溶剂化物形式是水-异丙醇杂溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶水-异丙醇杂溶剂化物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自7.3、7.6、10.4、
10.8和17.5
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶水-异丙醇杂溶剂化物形式是形式g。
[0092]
在一些实施方案中，形式g的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0093][0094]
在一些实施方案中，形式g的特征在于图13中所描绘的xrpd图样。
[0095]
在一些实施方案中，形式g的特征在于图14中所描绘的tga图样。
[0096]
在一些实施方案中，形式g的特征在于图15中所描绘的dvs等温线。
[0097]
在一些实施方案中，化合物1的结晶溶剂化物形式是六氟异丙醇溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶六氟异丙醇溶剂化物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自4.3、6.0、6.9、10.9、11.5、14.7和17.1
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶六氟异丙醇溶剂化物形式是形式h。
[0098]
在一些实施方案中，形式h的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0099][0100]
在一些实施方案中，形式h的特征在于图16中所描绘的xrpd图样。
[0101]
在一些实施方案中，形式h的特征在于图17中所描绘的tga图样。
[0102]
在一些实施方案中，形式h的特征在于图18中所描绘的dvs等温线。
[0103]
在一些实施方案中，化合物1的结晶溶剂化物形式是乙醇溶剂化物。在一些实施方案中，化合物1的结晶乙醇溶剂化物形式的特征在于其x射线粉末衍射图样中选自5.3、10.6和15.9
±
0.2度2θ的一个或多个峰。在一些此类实施方案中，化合物1的结晶乙醇溶剂化物形式是形式i。
[0104]
在一些实施方案中，形式i的特征在于其x射线粉末衍射图样中的以下峰：
[0105][0106][0107]
在一些实施方案中，形式i的特征在于图19中所描绘的xrpd图样。
[0108]
用途、配制和施用
[0109]
药学上可接受的组合物
[0110]
根据另一个实施方案，本公开提供了一种组合物，所述组合物包含化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)，以及药学上可接受的载体、佐剂或媒剂。在某些实施方案中，本公开的组合物中化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的量得以有效地可测量地抑制生物样品中或患者中的jak2或其突变体。在某些实施方案中，配制本公开的组合物用于向需要此种组合物的患者施用。在一些实施方案中，配制本公开的组合物用于向患者经口施用。
[0111]
根据本发明的方法，使用有效治疗本文所提供的病症(即，jak2介导的疾病或病症)或减轻其严重性的任何量和任何施用途径来施用化合物和组合物。所需的确切量因受试者而异，这取决于受试者的物种、年龄和一般状况、感染的严重性、特定药剂、其施用模式等。化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)优选配制成单位剂型以便于施用和剂量均匀。
[0112]
可以经口、肠道外、通过雾化吸入、局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道、腹腔内、脑池内或经由植入的贮库施用本公开的组合物。在一些实施方案中，经口、腹腔内或静脉内施用组合物。
[0113]
本公开的组合物的无菌可注射形式可以是水性或油性悬浮液。这些悬浮液可以根据本领域中已知的技术，使用适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂来配制。无菌可注射制剂也可以是无毒肠道外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如1,3-丁二醇中的溶液。在可接受的媒剂和溶剂中，可以采用水、林格氏溶液(ringer's solution)和等渗氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油常规地用作溶剂或悬浮介质。
[0114]
为达成此目的，可以采用任何温和的不挥发性油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。脂肪酸，如油酸及其甘油酯衍生物，可用于制备可注射剂，如同天然的药学上可接受的油，如橄榄油或蓖麻油(尤其是呈聚氧乙烯化型式)一样。这些油溶液或悬浮液还可以含有长链醇稀释剂或分散剂，如羧甲基纤维素或通常用于配制药学上可接受的剂型(包括乳液和悬浮液)的类似分散剂。其它通常使用的表面活性剂，如tween、span和通常用于制造药学上可接受的固体、液体或其它剂型的其它乳化剂或生物利用度增强剂也可以用于达成配制的目的。
[0115]
可注射配方可以例如通过经细菌截留过滤器过滤或通过并入呈无菌固体组合物形式的灭菌剂进行灭菌，所述无菌固体组合物可以在使用前溶解或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中。
[0116]
为了延长化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的作用，常常需要使皮下或肌肉内注射的化合物的吸收减缓。这可以通过使用水溶性不良的结晶或无定形物质的液体悬浮液来达成。化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的吸收速率则取决于它的溶解速率，所述溶解速率又可以取决于晶体大小和结晶形式。或者，肠道外施用的化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的延迟吸收是通过将化合物溶解或悬浮于油媒剂中来达成。通过在诸如聚丙交酯-聚乙交酯等生物可降解聚合物中形成化合物的微胶囊基质来制备可注射储库形式。取决于化合物与聚合物的比率和所采用的特定聚合物的性质，可以控制化合物释放的速率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还通过将化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)包埋于与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备储库式可注射配方。
[0117]
在一些实施方案中，配制所提供的药学上可接受的组合物用于经口施用。此类配方可以与食物一起或不与食物一起施用。在一些实施方案中，本公开的药学上可接受的组合物不与食物一起施用。在其它实施方案中，本公开的药学上可接受的组合物与食物一起施用。
[0118]
本公开的药学上可接受的组合物可以呈任何口服可接受的剂型经口施用，所述剂型包括但不限于胶囊、片剂、水性悬浮剂或溶液。在供经口使用的片剂的情况下，通常使用的载体包括乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，如硬脂酸镁。对于以胶囊形式经口施用，可用的稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。当需要水性悬浮液供经口使用时，将活性成分与乳化剂和悬浮剂组合。如有需要，还可以添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。
[0119]
用于经口施用的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒剂。在此类固体剂型中，化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)与至少一种惰性的药学上可接受的赋形剂或载体(如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下物质混合：a)填充剂或增量剂，如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和硅酸；b)粘合剂，如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；c)保湿剂，如甘油；d)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，如石蜡；f)吸收促进剂，如季铵化合物；g)湿润剂，如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；h)吸附剂，如高岭土和膨润土；和/或i)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。
[0120]
在使用诸如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软填充和硬填充明胶胶囊中还可以采用类似类型的固体组合物作为填充剂。可以制备具有诸如肠溶包衣和药物配制领域中熟知的其它包衣的包衣和外壳的片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型。它们可以任选地含有乳浊剂，并且还可以具有使其在肠道的某一部分中任选地以延迟方式仅仅或优先释放一种或多种活性成分的组成。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。在使用诸如乳糖(lactose/milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等
赋形剂的软填充和硬填充明胶胶囊中还可以采用类似类型的固体组合物作为填充剂。
[0121]
化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)也可以是具有一种或多种上述赋形剂的微囊形式。可以制备具有诸如肠溶包衣、控释包衣和药物配制领域中熟知的其它包衣的包衣和外壳的片剂、糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂的固体剂型。在此类固体剂型中，化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)可以与至少一种惰性稀释剂，如蔗糖、乳糖或淀粉混合。通常的做法是，此类剂型还可以包含除惰性稀释剂以外的另外的物质，例如制片润滑剂以及诸如硬脂酸镁和微晶纤维素等其它制片助剂。在胶囊、片剂和丸剂的情况下，剂型还可以包含缓冲剂。它们可以任选地含有乳浊剂，并且还可以具有使其在肠道的某一部分中任选地以延迟方式仅仅或优先释放一种或多种活性成分的组成。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。
[0122]
用于经口施用的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)以外，液体剂型还可以含有本领域中通常使用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂；增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯以及它们的混合物。除了惰性稀释剂以外，口服组合物还可以包括佐剂，如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂以及芳香剂。
[0123]
或者，本公开的药学上可接受的组合物可以呈栓剂形式施用以供直肠施用。这些可以通过将化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)与适合的非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在室温下是固体但在直肠温度下是液体，并且因此将在直肠中熔化以释放药物。此类物质包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
[0124]
用于直肠或阴道施用的组合物优选为栓剂，所述栓剂可以通过将化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)与诸如可可脂、聚乙二醇或栓剂蜡等适合的非刺激性赋形剂或载体混合来制备，所述赋形剂或载体在环境温度下是固体但在体温下是液体，并且因此在直肠或阴道腔中熔化并释放活性化合物。
[0125]
本公开的药学上可接受的组合物还可以局部施用，尤其当治疗目标包括通过局部应用容易到达的区域或器官(包括眼、皮肤或下肠道的疾病)时更是如此。容易制备适合的局部配方用于这些区域或器官中的每一者。
[0126]
对于下肠道的局部应用可以用直肠栓剂配方(见上文)或适合的灌肠配方来实现。还可以使用局部经皮贴片。
[0127]
对于局部应用来说，可以将所提供的药学上可接受的组合物配制成适合的软膏，所述软膏含有悬浮或溶解于一种或多种载体中的化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)。用于化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的局部施用的载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，
可以将所提供的药学上可接受的组合物配制成适合的洗剂或乳膏，所述洗剂或乳膏含有悬浮或溶解于一种或多种药学上可接受的载体中的化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)。适合的载体包括但不限于矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
[0128]
对于眼科使用来说，可以将所提供的药学上可接受的组合物在等渗的、ph调节的无菌盐水中配制成微粉化悬浮液，或者优选地，在使用或不使用诸如氯化苯甲烃铵等防腐剂的情况下在等渗的、ph调节的无菌盐水中配制成溶液。或者，对于眼科使用来说，可以将药学上可接受的组合物配制成诸如凡士林等软膏。
[0129]
本发明的药学上可接受的组合物也可以通过鼻用气雾剂或吸入施用。根据药物配制领域中熟知的技术制备此类组合物，并且可以采用苯甲醇或其它适合的防腐剂、增强生物利用度的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常规增溶或分散剂制备成盐水中的溶液。
[0130]
用于化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的局部或经皮施用的剂型包括软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、粉末、溶液、喷雾、吸入剂或贴片。如有需要，化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)在无菌条件下与药学上可接受的载体和任何所需的防腐剂或缓冲剂混合。眼用配方、滴耳剂和滴眼剂也涵盖于本发明的范围内。另外，本公开涵盖使用经皮贴片，所述经皮贴片具有增加的优点，即，提供化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)向身体的受控递送。此类剂型可以通过将化合物溶解或分配于适当的介质中来制备。吸收增强剂也可以用于增加化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)穿过皮肤的通量。可以通过提供速率控制膜或通过将化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)分散于聚合物基质或凝胶中来控制速率。
[0131]
在一些实施方案中，本文所描述的组合物包含一定量的化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)，所述量是游离碱n-叔丁基-3-[(5-甲基-2-{[4-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)氨基]苯磺酰胺的摩尔当量。举例来说，n-叔丁基-3-[(5-甲基-2-{[4-(2-吡咯烷-1-基乙氧基)苯基]氨基}嘧啶-4-基)氨基]苯磺酰胺(例如，化合物1的未溶剂化游离碱母体，mw＝524.26)的100mg配方包含117.30mg形式a(mw＝614.22)。
[0132]
在一些实施方案中，本公开提供了一种组合物，所述组合物包含化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)和一种或多种药学上可接受的赋形剂。在一些实施方案中，一种或多种药学上可接受的赋形剂选自粘合剂和润滑剂。
[0133]
在一些实施方案中，粘合剂是微晶纤维素。在一些此类实施方案中，微晶纤维素是硅化微晶纤维素。
[0134]
在一些实施方案中，粘合剂是硬脂酰富马酸钠。
[0135]
在一些实施方案中，组合物包含：
[0136][0137]
在某些实施方案中，组合物包含：
[0138][0139]
化合物和药学上可接受的组合物的用途
[0140]
本文所描述的化合物和组合物一般可用于抑制一种或多种酶的激酶活性。由本文所描述的化合物和组合物抑制并且本文所描述的方法可用于的激酶的实例包括jak2或其突变体。
[0141]
可以在体外、体内或在细胞系中测定用作jak2激酶或其突变体的抑制剂的化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)的活性。体外测定包括确定磷酸化活性和/或后续功能结果或者激活的jak2激酶或其突变体的atpase活性的抑制的测定。
[0142]
根据一个实施方案，本发明涉及一种抑制生物样品中的蛋白激酶活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)或其组合物接触的步骤。
[0143]
根据另一个实施方案，本发明涉及一种抑制生物样品中jak2激酶或其突变体的活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)或其组合物接触的步骤。
[0144]
根据另一个实施方案，本发明涉及一种抑制患者中jak2激酶或其突变体的活性的方法，所述方法包括向所述患者施用化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)或其组合物的步骤。在其它实施方案中，本公开提供了一种治疗有需要的患者的jak2介导的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述患者施用化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)或其药学上可接受的组合物的步骤。此类病症在本文中详细描述。
[0145]
本文所描述的晶体形式可用于治疗多种病症，包括但不限于例如骨髓增生性病症、增生性糖尿病视网膜病变和其它血管生成相关病症，包括实体瘤和其它类型的癌症、眼病、炎症、牛皮癣和病毒感染。可以治疗的癌症种类包括但不限于消化道/胃肠道癌、结肠癌、肝癌、皮肤癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、淋巴瘤、白血病(包括急性骨髓性白血病和慢性骨髓性白血病)、肾癌、肺癌、肌肉癌、骨癌、膀胱癌或脑癌。
[0146]
可以治疗的疾病和病症的一些实例还包括眼部新血管形成、婴儿血管瘤；器官缺氧、血管增生、器官移植排斥反应、狼疮、多发性硬化症、类风湿性关节炎、牛皮癣、1型糖尿病和糖尿病并发症、炎性疾病、急性胰腺炎、慢性胰腺炎、哮喘、过敏、成人呼吸窘迫综合征、心血管疾病、肝病、其它血液病症、哮喘、鼻炎、特应性、皮炎、自身免疫性甲状腺病症、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病(crohn's disease)、转移性黑色素瘤、卡波西氏肉瘤(kaposi's sarcoma)、多发性骨髓瘤、与细胞因子相关的疾患；以及其它自身免疫性疾病，包括肾小球肾炎、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯氏病(graves'disease)、自身免疫性胃炎、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性中性粒细胞减少症、血小板减少症、特应症(例如，过敏性哮喘、特应性皮炎或过敏性鼻炎)、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化症、炎性肠病、移植物抗宿主病；神经退行性疾病，包括运动神经元病、阿尔茨海默氏病、帕金森氏病(parkinson's disease)、肌萎缩侧索硬化症、亨廷顿氏病(huntington's disease)、脑缺血或由外伤性损伤、撞击、谷氨酸盐神经毒性或缺氧引起的神经退行性疾病；中风、心肌缺血、肾缺血、心脏病发作、心脏肥大、动脉粥样硬化和动脉硬化、器官缺氧和血小板聚集中的缺血/再灌注损伤。
[0147]
可以治疗的一些其它疾病和病症的实例还包括细胞介导的超敏症(过敏性接触性皮炎、超敏性肺炎)、风湿性疾病(例如，全身性红斑狼疮(sle)、幼年型关节炎、斯耶格伦氏综合征(sjogren's syndrome)、硬皮病、多肌炎、强直性脊柱炎、牛皮癣关节炎)、病毒性疾病(爱泼斯坦巴尔病毒(epstein barr virus)、乙型肝炎、丙型肝炎、hiv、htlvi、水痘-带状疱疹病毒、人乳头瘤病毒)、食物过敏、皮肤炎症以及由实体瘤诱发的免疫抑制。
[0148]
在一些实施方案中，化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)可用于治疗骨髓增生性病症。在一些实施方案中，骨髓增生性病症选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症和原发性血小板增多症。在一些实施方案中，骨髓增生性病症选自原发性骨髓纤维化和继发性骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是继发性骨髓纤维化。在一些此类实施方案中，继发性骨髓纤维化选自真性红细胞增多症后骨髓纤维化和原发性血小板增多症后骨髓纤维化。
[0149]
在一些实施方案中，所提供的方法包括向先前用jak2抑制剂治疗的患者施用化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)。在一些此类实施方案中，所提供的方法包括向先前用鲁索替尼(ruxolitinib)治疗的患者施用化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)。
[0150]
在一些实施方案中，所提供的方法包括向罹患或经诊断患有对鲁索替尼无反应的骨髓增生性病症的患者施用化合物1(例如，结晶无水形式、结晶水合物形式、结晶溶剂化物形式或结晶杂溶剂化物形式)。在一些实施方案中，患者罹患或已经诊断患有鲁索替尼难治或抗性的骨髓增生性病症。
[0151]
在一些实施方案中，患者在鲁索替尼疗法期间或之后已复发。
[0152]
在一些实施方案中，患者对鲁索替尼不耐受。在一些实施方案中，患者对鲁索替尼的不耐受由血液毒性(例如，贫血、血小板减少症等)或非血液毒性来证明。
[0153]
在一些实施方案中，患者对羟基脲的反应不足或不耐受。
[0154]
在一些实施方案中，患者在用鲁索替尼治疗期间正在展现或经历或已经展现或经历以下一者或多者：在鲁索替尼治疗期间的任何时间，反应缺乏、疾病进展或反应丧失。在一些实施方案中，疾病进展通过鲁索替尼治疗期间脾脏大小的增加来证明。
[0155]
在一些实施方案中，先前用鲁索替尼治疗的患者具有与骨髓增生性病症相关或指示骨髓增生性病症的体细胞突变或克隆标记。在一些实施方案中，体细胞突变选自jak2突变、calr突变或mpl突变。在一些实施方案中，jak2突变是v617f。在一些实施方案中，calr突变是外显子9中的突变。在一些实施方案中，mpl突变选自w515k和w515l。
[0156]
在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗复发性或难治性骨髓增生性病症的方法，其中所述骨髓增生性病症是复发性的或鲁索替尼难治的。
[0157]
在一些实施方案中，骨髓增生性病症选自中风险骨髓纤维化和高风险骨髓纤维化。
[0158]
在一些实施方案中，中风险骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(pv后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(et后)骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓纤维化是中风险1级(也称为中等1级风险)。在一些实施方案中，骨髓纤维化是中风险2级(也称为中等2级风险)。
[0159]
在一些实施方案中，高风险骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(pv后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(et后)骨髓纤维化。
[0160]
在一些实施方案中，本公开提供了一种制品，所述制品包括包装材料和所述包装材料内所含的药物组合物。在一些实施方案中，包装材料包括标签，所述标签指示药物组合物可以用于治疗上文所鉴定的一种或多种病症。
[0161]
实施例1.溶解度评估
[0162]
在一批多样化溶剂中评估溶解度以有助于选择溶剂系统和相应给送策略用于后续的晶体形式筛选实验。在室温下并且在适用情况下在40℃下于12种溶剂中通过将溶剂的小等分试样给送至固定量的api(10.0mg)中直至达到溶解点或1.8ml的最大体积来视觉上估算形式a的溶解度。如表1中所示，形式a于dmso、meoh和水中展现高溶解度(》100mg/ml)，但在评价的所有其它溶剂中展现低溶解度(≤5mg/ml)。
[0163]
表1-在室温和40℃下于12种溶剂中形式a的估算溶解度
[0164][0165][0166]
n/a-不适用
[0167]
实施例2.晶体形式筛选
[0168]
ft-拉曼光谱法.使用配备有1064nm nd:yvo4激发激光器、ingaas和液态n2冷却的ge检测器以及microstage的nicolet nxr9650或nxr 960光谱仪(thermo electron)收集拉曼光谱。以4cm-1
分辨率、64次扫描、使用happ-genzel切趾函数和通过玻璃盖的2级零填充获得所有光谱。
[0169]
粉末x射线衍射(pxrd).在panalytical x'pert pro衍射仪上使用ni过滤的cu ka(45kv/40ma)辐射和0.02
°
2θ步长以及x'celerator
tm rtms(实时多条)检测器获得pxrd衍射图。入射光束侧的配置：固定发散狭缝(0.25
°
)、0.04rad soller狭缝、防散射狭缝(0.25
°
)和10mm光束掩模。衍射光束侧的配置：固定发散狭缝(0.25
°
)和0.04rad soller狭缝。
[0170]
差示扫描量热法(dsc).使用配备有自动进样器和冷冻冷却系统的ta instruments q100差示扫描量热仪在40ml/min n2吹扫下进行dsc。除非另有注释，否则以15℃/min在卷曲的al盘中获得dsc热谱图。
[0171]
热重分析(tga).除非另有注释，否则使用ta instruments q500热重分析仪在40ml/min n2吹扫下以15℃/min在al盘中获得tga热谱图。
[0172]
热重分析与红外废气检测(tga-ir).使用与配备有外部tga-ir模块与气流池和dtgs检测器的nicolet 6700ft-ir光谱仪(thermo electron)对接的ta instruments q5000热重分析仪进行tga-ir。除非另有注释，否则以60ml/min n2流量和15℃/min加热速率在pt或al盘中进行tga。以4cm-1
分辨率和32次扫描在每个时间点收集ir光谱。
[0173]
调制式差示扫描量热法(mdsc).使用配备有自动进样器和冷冻冷却系统的ta instruments q200差示扫描量热仪在40ml/min n2吹扫下进行mdsc。每60秒使用调制 /-0.32℃获得mdsc温谱图，并且等温保持5.00分钟，然后以2.00℃/min匀变至200℃。在卷曲的al盘中制备样品。
[0174]
冻干：在virtis lyo-centre benchtop 3.5dbtzl(序号：41712)上进行冻干。这个
单元在《10mtorr压力和《-100℃冷凝器温度下操作。
[0175]
离子色谱法(ic).在dionex ics-3000上进行离子色谱法。柱：dionex ionpac as12a 4x200mm；检测：抑制电导率，具有22ma抑制电流的asrs 300；洗脱液(2.7mm na2co3/0.3mm nahco3)，1.5ml/min。
[0176]
溶剂选择.晶体形式筛选涉及48种溶剂系统。溶剂以纯净和二元混合物形式利用以提供一组多样化极性、介电常数、偶极矩和氢键供体/受体属性。还包括了具有多种水分活度的含水溶剂。
[0177]
结晶模式.晶体形式筛选研究采用了使用无定形输入材料的以下结晶模式：
[0178]
(1)搅拌悬浮液同时在45-5℃之间温度循环三天(tc，n＝48)
[0179]
(2)将澄清的溶液从45℃冷却至5℃，继而保持四天(rc，n＝48)
[0180]
(3)在室温下经过7-10天从溶液中缓慢蒸发溶剂(ev，n＝48；形式a输入)。
[0181]
筛选产物的分析.选择ft-拉曼光谱法作为用于样品的分析和分组的主要方法。通过pxrd分析来自分组的代表性样品以验证它们的独特型。在可能/实际情况下，通过偏振光显微术、dsc和/或tga-ir进一步表征独特形式的代表性样品。
[0182]
筛选的结果.观察到形式a作为筛选实验的主要输出。在15种不同浆液和蒸发实验中观察到形式b，水合形式。如表2中所示，化合物1的晶体形式筛选产生以下形式：
[0183]
表2-初步晶体形式筛选
[0184]
[0185][0186]
符号表：
[0187][0188]
形式a的表征.形式a是白色粉末并且通过拉曼(图1)和pxrd分析(图2)确定为结晶的。dsc显示25-150℃有宽而浅的吸热线，继而在216.4℃下出现吸热线伴有分解(图3b)。tga-ir分析显示25-150℃释放2.9％水(1当量，一水合物)，这对应于宽的dsc吸热线(图3a)。
[0189]
形式b的表征.形式b是在筛选期间观察到的水合物形式。拉曼(图4)和pxrd(图5)
分析指示形式b是结晶的。dsc显示25-110℃有宽的吸热线(图6b)，通过tga-ir，这与9.4重量％的水损失(3.4当量)相关(图6a)。dsc分析还显示在147.7℃处有小的低能量吸热线。通过ic确认形式b是二盐酸盐。
[0190]
实施例3.形式a和b的相对稳定性研究
[0191]
在25℃下对一水合物形式a和水合物形式b进行相对稳定性研究以确定在各种水分活度水平下的稳定水合物。
[0192]
通过在指定溶剂系统中搅拌过量形式a来制备形式a的饱和悬浮液。在25℃下搅拌悬浮液过夜。进行澄清过滤，并且将滤液添加至含有约10mg形式a和约10mg形式b的2ml小瓶中。在25℃下搅拌所得悬浮液七天，分离，在真空下干燥45分钟，并且通过ft-拉曼进行分析。
[0193]
在熟化研究之后获得形式a。研究所概述的结果示于表3中并且指示形式a在25℃下在整个水分活度范围内是稳定水合物。
[0194]
表3-竞争性熟化研究的结果
[0195][0196]
实施例4.额外晶体形式筛选
[0197]
仪器
[0198]
高分辨率x射线粉末衍射(高分辨率xrpd).在周围条件下于使用bragg-brentano(垂直θ-2θ配置)仲聚焦几何结构联合x'celerator检测器的panalytical x'pert pro mpd粉末衍射仪上记录高分辨率图。使用在45kv和40ma水平下操作的密封铜阳极x射线管。入射光束单色仪(约翰逊型：对称切割的弯曲锗(111)晶体)产生纯的cukα1辐射使产物的薄层沉积于单晶硅晶圆上，根据si(510)晶体方位进行切割，所述晶体方位通过系统消光阻碍了任何布拉格反射。为了使更多的微晶进入衍射位置并且因此减少粒子统计学对测量的影响，使用样品旋转器。将旋转器的旋转速度设定为1转/秒。角度范围以0.017
°
的2θ步长从2
°
延伸至50
°
2θ。使用每步500至5000秒的可变计数时间。
[0199]
x射线粉末衍射(xrpd).在使用bragg-brentano(垂直θ-2θ配置)仲聚焦几何结构的siemens-bruker d5000 matic粉末衍射仪上进行xrpd分析。样品进样器使工作自动化成为可能。如果足够的产物是可用的，那么将粉末顶部负载至凹形不锈钢样品架上。否则，使产物的薄层沉积于单晶硅晶圆上，根据si(510)晶体方位进行切割，所述晶体方位通过系统消光阻碍了任何布拉格反射。使用在40kv和30ma水平下操作的密封铜阳极x射线管。通常发射两条线：cokα1射两条线：cokα1和cokα2置于检测器与试样之间的铁β-滤光片并不完全消除cokβ辐射，它仍然促成检测器处约1％的衍射光束(制造商的数据)。初级光束穿过平行板准直器(0.2mm索勒狭缝)，然后穿过发散狭缝(0.2mm)。
braun 50m多道线性检测器完成设置。所述检测器的2θ角具有8
°
宽检测窗口。图形应在以下条件下记录：2θ角以2
°
至50.0
°
扫描，20秒计数时间/度2θ，以及压力、温度和相对湿度的周围条件。
[0200]
温度和相对湿度x射线粉末衍射.使用配备有bragg-brentano仲聚焦(θ-θ)几何结构和anton-paar ttk450温度室的siemens-bruker d5000衍射仪进行测试。对于某些测试，使用干氮或rh流。使粉末沉积于凹形不锈钢样品架中。使用在40kv和30ma水平下操作的密封铜阳极x射线管。通常发射两条线：cokα1和cokα2置于检测器与试样之间的铁β-滤光片并不完全消除cokβ辐射，它仍然促成检测器处约1％的衍射光束(制造商的数据)。使用soller狭缝瞄准光束，以改善它的平行性。可变发散狭缝使样品的照明面积保持恒定。1mm准直仪将漫射限制于管与样品之间。braun 50-m多道线性检测器完成设置。所述检测器的2θ角具有8
°
宽检测窗口。使温度以0.05℃/sec的速率升高。图形通常在以下条件下记录：2θ角以1.5至50.0度扫描，10至15秒计数时间/度2θ。当达到所要求的温度时，以等温线模式撷取数据。
[0201]
同时热重分析联合ftir光谱仪(tga-ftir).使用tg209c netzsch仪器联合tensor 27bruker ftir光谱仪进行分析。这个系统允许对释出的化合物(水和溶剂)同时进行热重分析(tga)和ftir化学鉴定。将释出的气体通过加热至476k的转移管线携带至ftir光谱仪以防止释出的产物冷凝。使5至10mg的样品质量沉积于铝坩埚中。在干氮流下以10ml/min进行tga-ftir分析。通常，将样品以5k/min的速率从298加热至520-570k。4000至700cm-1的谱域、4cm-1的分辨率和20次扫描/光谱用于ftir光谱记录。对于有待通过ftir分析的每种溶剂，必须选择与溶剂类型有关的特定波数范围。
[0202]
热重分析.在t.a.仪器tgaq500或tgaq5000分析仪上进行分析。使用10和100mg认证质量进行质量校准，并且使用铝镍合金和镍标准(居里点分别为154℃和354℃)对仪器进行温度校准。使样品暴露于60ml/min的恒定氮流并且温度以5℃/min的速率在20至250℃的范围内。产物的量处于2与5mg之间。使粉末沉积于敞口铝样品盘中，这个铝盘本身置于铂盘中。
[0203]
差示扫描量热法(dsc).在氮流下使用t.a.instruments q1000(或q200)分析仪进行分析。使用铟和铅(起始温度分别为156.6℃和327.5℃)对量热计进行温度校准。使用认证的铟校准器(熔化焓为28.45j/g)完成能量校准。机械压缩机用于获得和平衡温度程序：在55ml/min(分别为50ml/min)的恒定氮流下以5℃/min的速率从0至270℃。所分析的产物量处于1与5mg之间，并且置于卷曲的或铝样品盘中。
[0204]
水分吸附/解吸等温线.在dvs-1自动化重量蒸气吸附分析仪(surface measurement systems ltd.,london,uk)上进行所有实验。dvs使用具有
±
0.1μg质量分辨率的cahn d200记录超微量天平以重量分析方式测量蒸气的吸收和损失。通过混合不同比例的干燥和水饱和载气流(由质量流量控制器监测)来产生受控的相对湿度。通过将整个系统封闭于温度受控的保温箱中使温度维持恒定，
±
0.1℃。使用约10mg样品量。在暴露于任何水蒸气之前，在0％相对湿度(rh)下干燥样品以去除所存在的任何表面水并且建立干燥的基线质量。接下来，使样品暴露于以5％rh的步长从0％升至95％rh(或90％rh)的渐增相对湿度。在每个阶段，在增加或减少相对湿度之前使样品质量达到平衡(考虑到当dm/dt比
率(m＝质量；t＝时间)在30分钟内不超过3.3 10-4mg/s的值时建立平衡)。如果未达到平衡状态，那么在600分钟后自动发生相对湿度的变化。记录两个连续循环。从完整的水分吸附和解吸型态，使用dvs高级分析套件3.6版计算等温线。在25.0℃下进行所有实验。
[0205]
使用不同溶剂、过饱和、温度和水分活度进行多晶型物筛选。一般来说，所使用的条件为：
[0206]
·
通过在室温下缓慢蒸发、在高温下于大气压或真空下蒸发、在回流温度下溶解继而在室温下缓慢冷却进行结晶
[0207]
·
通过添加非溶剂、通过共沸蒸馏转移溶剂进行沉淀
[0208]
·
在室温下于无水溶剂或水性溶剂中对纯的形式或形式的混合物进行制浆
[0209]
表4中提供了通过使用xrpd结果进行结晶研究所鉴定的多晶型物：
[0210]
表4-结晶研究的结果
[0211][0212]
实施例5.形式a和形式b的可变温度t-xrpd分析.
[0213]
实施例4中所鉴定的晶体形式表征如下。
[0214]
在氮气气氛下通过t-xrpd原位研究在加热下形式a的结构行为。使温度以10℃步长从室温升至230℃。观察到因加热所致的xrpd图的结构变化(图7)。从40℃至80℃，记录形式c的出现，这对应于形式a的脱水形式。然后在80℃至90℃之间观察到结构变化。在90℃下出现新的xrpd图样，这对应于另一个无水结晶相。在160℃至170℃之间观察到主要结构变
化。
[0215]
在氮气气氛下通过t-xrpd原位研究在加热下形式b的结构行为。使温度以10℃步长从室温升至160℃。从室温至70℃观察到因热诱导的水分子损失和晶格的膨胀所致的xrpd图的变化，得到形式d(图8)。在90℃至120℃之间未观察到结构变化。最后在130℃下，xrpd图是平坦的并且类似于无定形材料。
[0216]
实施例6.晶体形式的表征
[0217]
实施例4中所鉴定的晶体形式表征如下。
[0218]
形式f.图10中描绘了四异丙醇溶剂化物的xrpd。
[0219]
在25℃下“0％p/p
0”预处理之后，在25℃下进行四异丙醇溶剂化物的dvs(图12)。一旦使样品暴露于分压渐增的异丙醇，在0与45％p/p
0(ipa)
之间测得极轻微和连续的异丙醇吸附(在45％p/p
0(ipa)
下为2.1％)。在50与55％p/p
0(ipa)
之间，观察到重要的异丙醇吸收，达到25％。在60％p/p
0(ipa)
与90％p/p
0(ipa)
之间，观察到连续的异丙醇吸收，达到3％。在90％p/p
0(ipa)
与40％p/p
0(ipa)
之间，观察到极轻微和连续的异丙醇损失，达到3％。此后，在35％p/p
0(ipa)
与0％p/p
0(ipa)
之间，观察到极其重要的异丙醇损失，达到30％。在dvs之后四异丙醇溶剂化物样品的xrpd揭示通过xrpd表征为单异丙醇溶剂化物形式e的新形式(图9)。
[0220]
形式f的tga-ir曲线示于图11中。从室温至约90℃记录22％的第一重量损失，这对应于3摩尔的异丙醇。从90℃至约160℃记录7％的第二重量损失，这对应于1摩尔的异丙醇。超过210℃，观察到热分解。
[0221]
形式g.水:异丙醇杂溶剂化物的xrpd图样示于图13中。
[0222]
水:异丙醇杂溶剂化物的tga-ir曲线示于图14中。从室温至约100℃记录3％的第一重量损失，这对应于水的吸附。从100℃至约160℃记录5％的第二重量损失，这对应于0.5摩尔的异丙醇。超过210℃，观察到热分解。
[0223]
在25℃下“0％rh”预处理之后，在25℃下进行水:异丙醇杂溶剂化物的dvs(在25℃下预处理观察到部分脱水)(图15)。在25℃下于0％rh下暴露一天后，观察到样品的部分脱水和去溶剂化，伴有7.7％的水和ipa损失。一旦使样品暴露于渐增的相对湿度，在5与65％rh之间测得重要和连续的水吸附(在65％rh下为7.4％)。在70％与90％rh之间观察到轻微和连续的水吸收，达到0.7％。在90％rh与10％rh之间观察到连续的水吸收，达到2.5％。在10％rh下，测得重要的水损失，达到7.1％。在0％rh下，记录第一个循环与第二个循环之间的差异(达到0.6％)，这可以对应于结晶相的结构变化。
[0224]
形式h.六氟异丙醇溶剂化物的xrpd图样示于图16中。
[0225]
六氟异丙醇溶剂化物的tga曲线示于图17中。从60℃至约100℃记录14.8％的第一重量损失(可能对应于0.5摩尔的六氟异丙醇，未进行tga-ir或tga-ms测量)。从100℃至约160℃记录8.5％的第二重量损失。超过180℃，观察到热分解。
[0226]
在25℃下对六氟异丙醇溶剂化物进行dvs曲线(图18)。在氮气下6小时后，记录5％的重量损失(在25℃下预处理观察到部分去溶剂化)。在第一个吸附循环期间，在0％与75％rh之间记录重要的重量损失(约30％)。这种重量损失对应于结构变化，指示去溶剂化，伴有水蒸气诱导的溶剂交换。确认了形式h转化为形式b。
[0227]
形式i.乙醇溶剂化物的xrpd图样示于图19中。形式i在周围条件下是晶化的溶剂化物。