含抗体制剂的制作方法

1.本发明涉及包含白介素-31(il-31)拮抗剂(例如，具有与il-31受体a(il-31ra)结合并抑制il-31结合至il-31ra的功能的单克隆抗体)的稳定制剂。


背景技术：

2.鉴定了具有与白介素31(il-31)受体a(il-31ra)结合并抑制il-31与il-31ra结合的功能的单克隆抗体(ptl1-3)。抗il-31ra抗体nemolizumab(cim331)是一种人源化igg2抗体，其用作il-31拮抗剂以抑制被称为瘙痒诱导细胞因子的il-31的功能；因此，目前正在进行针对特应性皮炎患者的临床试验。
3.为了提高稳定性，迄今为止已经开发了许多用于治疗性蛋白质(例如抗体)的冻干制剂(npl 1)。作为非抗体治疗性蛋白质的冻干制剂的添加剂，通常使用糖类例如蔗糖、海藻糖(npl 2)，也有使用精氨酸作为稳定剂的报告(ptl4和5)。
4.然而，对于包含作为il-31拮抗剂的抗il31ra抗体(cim331)的制剂，没有关于抑制对抗体稳定性有很大影响的聚集体形成和/或具有电荷异质性的成分的稳定制剂的报道。
5.引用列表
6.专利文献
7.[ptl 1]wo2007/142325
[0008]
[ptl 2]wo2009/072604
[0009]
[ptl 3]wo2010/064697
[0010]
[ptl 4]us6887852b1
[0011]
[ptl 5]wo2010/148253
[0012]
非专利文献
[0013]
[npl 1]pharm res.1997；14(8)：969-975.
[0014]
[npl 2]j pharm sci.1998；87(11)：1412-1420.


技术实现要素：

[0015]
技术问题
[0016]
本发明的目的是提供包含il-31拮抗剂抗il-31ra抗体(cim331)作为活性成分的的稳定制剂。
[0017]
解决问题的方案
[0018]
为实现上述目的，本发明人进行了专门研究，结果发现在包含上述il-31拮抗剂(特别是抗il-31ra抗体(cim331))的制剂中添加精氨酸或其盐增加了包含il-31拮抗剂的制剂的稳定性，无论是否存在冻干步骤。还发现当制剂处于冻干状态时，向制剂中添加蔗糖或海藻糖增加了包含il-31拮抗剂的制剂的稳定性。进一步发现，当制剂处于溶液状态时，向制剂中添加非离子表面活性剂增加了包含il-31拮抗剂的制剂的稳定性。
[0019]
在非限制性实施方案中，本公开涉及以下内容。
[0020]
[1]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其中所述制剂包含精氨酸和/或其盐、蔗糖和/或海藻糖。
[0021]
[2][1]所述的冻干制剂，其中精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐、精氨酸天冬氨酸盐或精氨酸谷氨酸盐。
[0022]
[3][1]或[2]所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)。
[0023]
[4][1]至[3]中任一项所述的冻干制剂，还含有tris缓冲液作为缓冲剂。
[0024]
[5][4]所述的冻干制剂，其中所述tris缓冲液是三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐。
[0025]
[6][5]所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。
[0026]
[7][5]或[6]所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)。
[0027]
[8][1]至[7]中任一项所述的冻干制剂，进一步包含泊洛沙姆188或聚山梨醇酯作为非离子表面活性剂。
[0028]
[9][8]所述的冻干制剂，其中所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。
[0029]
[10][1]至[9]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时ph为6至8。
[0030]
[11][1]至[10]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时ph为6.5至7.5。
[0031]
[12][1]至[11]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时ph为7。
[0032]
[13]包含il-31拮抗剂作为活性成分的溶液制剂，其中所述溶液制剂包含精氨酸和/或其盐。
[0033]
[14][13]所述的溶液制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)、精氨酸-天冬氨酸盐或精氨酸-谷氨酸盐。
[0034]
[15][13]或[14]所述的溶液制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)。
[0035]
[16][13]至[15]中任一项所述的溶液制剂，其进一步包含tris缓冲液作为缓冲剂。
[0036]
[17][16]所述的溶液制剂，其中所述tris缓冲液是三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐。
[0037]
[18][17]所述的溶液制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。
[0038]
[19][17]或[18]所述的溶液制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)。
[0039]
[20][13]至[19]中任一项所述的溶液制剂，进一步包含非离子表面活性剂，其中所述非离子表面活性剂是泊洛沙姆188或聚山梨醇酯。
[0040]
[21][20]所述的溶液制剂，其中所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯
80。
[0041]
[22][13]至[21]中任一项所述的溶液制剂，其中ph为6至8。
[0042]
[23][13]至[22]中任一项所述的溶液制剂，其中ph为6.5至7.5。
[0043]
[24][13]至[23]中任一项所述的溶液制剂，其中ph为7。
[0044]
[25]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0045]-1至200mg/ml il-31拮抗剂；
[0046]-1至200mmol/l tris缓冲液；
[0047]-4.5至1500mmol/l精氨酸或其盐；
[0048]-7.5至2500mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0049]-0.01至5mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0050]
其中当所述制剂在水中重构时ph为6至8：
[0051]
[26]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0052]-6至100mg/ml il-31拮抗剂；
[0053]-6至20mmol/l tris缓冲液；
[0054]-45至150mmol/l精氨酸或其盐；
[0055]-75至250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0056]-0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0057]
其中当所述制剂在水中重构时ph为6至8：
[0058]
[27]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其包含，每小瓶、药筒或注射器：
[0059]-1至800mg il-31拮抗剂；
[0060]-0.1至40mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0061]-0.8至400mg精氨酸；
[0062]-3至1100mg蔗糖或海藻糖；和
[0063]-0.01至7mg泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0064]
其中当所述制剂在水中重构时ph为6至8。
[0065]
[28]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其包含，每小瓶、药筒或注射器：
[0066]-10至80mg il-31拮抗剂；
[0067]-0.8至4mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0068]-8至40mg精氨酸；
[0069]-30至110mg蔗糖或海藻糖；和
[0070]-0.1至0.7mg泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0071]
其中当所述制剂在水中重构时ph为6至8。
[0072]
[29][1]至[28]中任一项所述的制剂，其中所述精氨酸和/或其盐与所述il-31拮抗剂的摩尔比为220∶1至1100∶1，和/或所述精氨酸与所述il-31拮抗剂的重量比为0.3∶1至1.3∶1。
[0073]
[30][1]至[12]和[25]至[28]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述蔗糖或海藻糖与所述il-31拮抗剂之间，摩尔比为370∶1至1840∶1和/或重量比为0.8∶1至4.3∶1。
[0074]
[31][25]至[30]中任一项所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)、精氨酸-天冬氨酸盐或精氨酸-谷氨酸盐。
[0075]
[32][25]至[31]中任一项所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)。
[0076]
[33][32]所述的冻干制剂，其中所述tris缓冲液是三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐。
[0077]
[34][33]所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。
[0078]
[35][33]或[34]所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)。
[0079]
[36][1]至[35]中任一项所述的制剂，其中所述il-31拮抗剂是抑制il-31信号传导的抗体。
[0080]
[37][36]所述的制剂，其中所述抑制il-31信号传导的抗体是抗il-31中和抗体或抗il-31ra中和抗体。
[0081]
[38][37]所述的制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是：
[0082]
(1)抗il-31ra抗体，其包含h链可变区和l链可变区，所述h链可变区包含seq id no：1的cdr1、seq id no：2的cdr2和seq id no：3的cdr3，所述l链可变区包含seq id no：4的cdr1、seq id no：5的cdr2和seq id no：6的cdr3；
[0083]
(2)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：7的h链可变区和seq id no：8的l链可变区；或者
[0084]
(3)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链。
[0085]
[39][37]或[38]所述的制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是igg抗体，优选地igg2抗体。
[0086]
[40][37]至[39]中任一项所述的制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是nemolizumab。
[0087]
[41][37]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中抗il-31ra中和抗体的浓度为68mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0088]
[42][37]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中抗il-31ra中和抗体的浓度为50mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0089]
[43][37]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中抗il-31ra中和抗体的浓度为15mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0090]
[44][37]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中抗il-31ra中和抗体的浓度为7.5mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0091]
[45][37]至[41]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中tris-hcl的浓度为13.6mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0092]
[46][37]至[40]和[42]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中tris-hcl的浓度为10mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0093]
[47][37]至[40]和[43]至[44]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中tris-hcl的
浓度为6mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0094]
[48][37]至[41]和[45]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中arg-hcl的浓度为102mmol/l的溶液冻干产生的组个物。
[0095]
[49][37]至[40]、[42]和[46]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中arg-hcl的浓度为75mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0096]
[50][37]至[40]、[43]至[44]和[47]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中arg-hcl浓度为45mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0097]
[51][37]至[41]、[45]和[48]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中蔗糖或海藻糖的浓度为170mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0098]
[52][37]至[40]、[42]、[46]和[49]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中蔗糖或海藻糖的浓度为125mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0099]
[53][37]至[40]、[43]至[44]、[47]和[50]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中蔗糖或海藻糖的浓度为75mmol/l的溶液冻干产生的组合物。
[0100]
[54][37]至[41]、[45]、[48]和[51]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20的浓度为0.34mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0101]
[55][37]至[40]、[42]、[46]、[49]和[52]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20的浓度为0.25mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0102]
[56][37]至[40]、[43]至[44]、[47]、[50]和[53]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20的浓度为0.15mg/ml的溶液冻干产生的组合物。
[0103]
[57][37]至[42]、[45]至[46]、[48]至[49]、[51]至[52]和[54]至[55]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中精氨酸和抗il-31ra中和抗体之间的摩尔比为220∶1和/或重量比为0.3∶1的溶液冻干产生的组合物。
[0104]
[58][37]至[40]、[43]、[47]、[50]、[53]和[56]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中精氨酸和抗il-31ra中和抗体之间的摩尔比为440∶1和/或重量比为0.5∶1的溶液冻干产生的组合物。
[0105]
[59][37]至[40]、[44]、[47]、[50]、[53]和[56]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中精氨酸和抗il-31ra中和抗体之间的摩尔比为880∶1和/或重量比为1.0∶1至1.1∶1的溶液冻干产生的组合物。
[0106]
[60][37]至[42]、[45]至[46]、[48]至[49]、[51]至[52]、[54]至[55]和[57]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中蔗糖与抗il-31ra中和抗体之间的摩尔比为370∶1和/或重量比为0.8∶1至0.9∶1的溶液冻干产生的组合物。
[0107]
[61][37]至[40]、[43]、[47]、[50]、[53]、[56]和[58]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中蔗糖与抗il-3ira中和抗体之间的摩尔比为740∶1和/或重量比为1.7∶1的溶液冻干产生的组合物。
[0108]
[62][37]至[40]、[44]、[47]、[50]、[53]、[56]和[59]中任一项所述的冻干制剂，其是将其中蔗糖与抗il-31ra中和抗体之间的摩尔比为1470∶1和/或重量比为3.4∶1至3.5∶1的溶液冻干产生的组合物。
[0109]
[63][25]至[62]中任一项所述的冻干制剂，其中当制剂在水中重构时的ph为6.5至7.5。
[0110]
[64][25]至[63]中任一项所述的冻干制剂，其中当制剂在水中重构时的ph为7。
[0111]
[65][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如注射器：
[0112]-75mg抗il-31ra中和抗体；
[0113]-1.8mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0114]-19mg精氨酸；
[0115]-64mg蔗糖；
[0116]-0.4mg泊洛沙姆188。
[0117]
[66][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如注射器：
[0118]-75mg抗il-31ra中和抗体；
[0119]-0.24mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0120]-23.6mg l-精氨酸盐酸盐；
[0121]-63.9mg蔗糖；
[0122]-0.37mg泊洛沙姆188；和
[0123]-三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐作为ph调节剂。
[0124]
[67][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如注射器：
[0125]-39mg抗il-3ira中和抗体；
[0126]-0.9mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0127]-10mg精氨酸；
[0128]-33mg蔗糖；和
[0129]-0.2mg泊洛沙姆188。
[0130]
[68][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如药筒：
[0131]-36mg抗il-31ra中和抗体；
[0132]-0.9mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0133]-9mg精氨酸；
[0134]-31mg蔗糖；和
[0135]-0.2mg泊洛沙姆188。
[0136]
[69][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如小瓶：
[0137]-51mg抗il-31ra中和抗体；
[0138]-2.5mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0139]-27mg精氨酸；
[0140]-88mg蔗糖；和
[0141]-0.5mg泊洛沙姆188。
[0142]
[70][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如小瓶：
[0143]-30mg抗il-31ra中和抗体；
[0144]-3.0mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0145]-32mg精氨酸；
[0146]-104mg蔗糖；和
[0147]-0.6mg泊洛沙姆188。
[0148]
[71][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如小瓶：
[0149]-19mg抗il-31ra中和抗体；
[0150]-1.9mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0151]-20mg精氨酸；
[0152]-66mg蔗糖；和
[0153]-0.4mg泊洛沙姆188。
[0154]
[72][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其包含，每容器例如小瓶：
[0155]-14mg抗il-3ira中和抗体；
[0156]-1.3mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0157]-15mg精氨酸；
[0158]-47mg蔗糖；和
[0159]-0.3mg泊洛沙姆188。
[0160]
[73][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将溶液冻干产生的组合物，所述溶液包含：
[0161]-68mg/ml抗il-31ra抗体，所述抗il-31ra抗体包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链；
[0162]-13.6mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0163]-102mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0164]-170mmol/l蔗糖；和
[0165]-0.34mg/ml泊洛沙姆188，
[0166]
其中当制剂在水中重构时ph为7。
[0167]
[74][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将溶液冻干产生的组合物，所述溶液包含：
[0168]-50mg/ml抗il-31ra抗体，所述抗il-31ra抗体包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链；
[0169]-10mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0170]-75mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0171]-125mmol/l蔗糖；和
[0172]-0.25mg/ml泊洛沙姆188，
[0173]
其中当制剂在水中重构时ph为7。
[0174]
[75][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将溶液冻干产生的组合物，所述溶液包含：
[0175]-15mg/ml抗il-31ra抗体，所述抗il-31ra抗体包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链；
[0176]-6mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0177]-45mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0178]-75mmol/l蔗糖；和
[0179]-0.15mg/ml泊洛沙姆188，
[0180]
其中当制剂在水中重构时ph为7。
[0181]
[76][25]至[40]中任一项所述的冻干制剂，其是将溶液冻干产生的组合物，所述
溶液包含：
[0182]-7.5mg/ml抗il-31ra抗体，所述抗il-31ra抗体包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链；
[0183]-6mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0184]-45mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0185]-75mmol/l蔗糖；和
[0186]-0.15mg/ml泊洛沙姆188，
[0187]
其中当制剂在水中重构时ph为7。
[0188]
[77]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，所述冻干制剂还包含tris缓冲液、精氨酸、蔗糖或海藻糖、和泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，其中，当所述制剂在水中重构时，包含：
[0189]-1至200mg/ml il-31拮抗剂；
[0190]-1至200mmol/l tris缓冲液；
[0191]-4.5至1500mmol/l精氨酸或其盐；
[0192]-7.5至2500mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0193]-0.01至5mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0194]
并且ph为6至8。
[0195]
[78]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，所述冻干制剂还包含tris缓冲液、精氨酸、蔗糖或海藻糖、和泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，其中，当所述制剂在水中重构时，包含：
[0196]-20至100mg/ml il-31拮抗剂；
[0197]-10至20mmol/l tris缓冲液；
[0198]-75至150mmol/l精氨酸或其盐；
[0199]-125至250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0200]-0.25至0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0201]
并且ph为6至8。
[0202]
[79][77]或[78]所述的冻干制剂，其中精氨酸和/或其盐与il-31拮抗剂的摩尔比为220∶1至1100∶1，和/或精氨酸与il-31拮抗剂的重量比为0.3∶1至1.3∶1。
[0203]
[80][77]至[79]中任一项所述的冻干制剂，其中，蔗糖或海藻糖与il-31拮抗剂之间的摩尔比为370∶1至1840∶1和/或重量比为0.8∶1至4.3∶1。
[0204]
[81][77]至[80]中任一项所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)、精氨酸-天冬氨酸盐或精氨酸-谷氨酸盐。
[0205]
[82][77]至[81]中任一项所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)。
[0206]
[83][77]至[82]中任一项所述的冻干制剂，其中所述tris缓冲液是三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐。
[0207]
[84][83]所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。
[0208]
[85][83]或[84]所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)。
[0209]
[86][77]至[85]中任一项所述的冻干制剂，其中所述il-31拮抗剂是抑制il-31信号传导的抗体。
[0210]
[87][86]所述的冻干制剂，其中所述抑制il-31信号传导的抗体是抗il-31中和抗体或抗il-31ra中和抗体。
[0211]
[88][87]所述的冻干制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是：
[0212]
(1)抗il-31ra抗体，其包含h链可变区和l链可变区，所述h链可变区包含seq id no：1的cdr1、seq id no：2的cdr2和seq id no：3的cdr3，所述l链可变区包含seq id no：4的cdr1、seq id no：5的cdr2和seq id no：6的cdr3；
[0213]
(2)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：7的h链可变区和seq id no：8的l链可变区；或者
[0214]
(3)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链。
[0215]
[89][87]或[88]所述的冻干制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是igg抗体，优选地igg2抗体。
[0216]
[90][87]至[89]中任一项所述的冻干制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是nemolizumab。
[0217]
[91][87]至[90]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时抗il-31ra中和抗体的浓度为]00mg/ml。
[0218]
[92][87]至[90]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时抗il-31ra中和抗体的浓度为61.5mg/ml。
[0219]
[93][87]至[90]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时抗il-31ra中和抗体的浓度为50mg/ml。
[0220]
[94][87]至[90]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时抗il-31ra中和抗体的浓度为25mg/ml。
[0221]
[95][87]至[91]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时tris-hcl的浓度为20mmol/l。
[0222]
[96][87]至[90]和[92]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时tris-hcl的浓度为12.3mmol/l。
[0223]
[97][87]至[90]和[93]至[94]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时tris-hcl的浓度为20mmol/l。
[0224]
[98][87]至[91]和[95]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时arg-hcl的浓度为150mmol/l。
[0225]
[99][87]至[90]、[92]和[96]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时arg-hcl的浓度为92mmol/l。
[0226]
[100][87]至[90]、[93]至[94]和[97]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时arg-hcl的浓度为150mmol/l.
[0227]
[101][87]至[91]、[95]和[98]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时蔗糖或海藻糖的浓度为250mmol/l。
[0228]
[102][87]至[90]、[92]、[96]和[99]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时蔗糖或海藻糖的浓度为154mmol/l.
[0229]
[103][87]至[90]、[93]至[94]、[97]和[100]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时蔗糖或海藻糖的浓度为250mmol/l。
[0230]
[104][87]至[91]、[95]、[98]和[101]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20的浓度为0.50mg/ml。
[0231]
[105][87]至[90]、[92]、[96]、[99]和[102]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20的浓度为0.31mg/ml。
[0232]
[106][87]至[90]、[93]至[94]、[97]、[100]和[103]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20的浓度为0.50mg/ml。
[0233]
[107][87]至[91]、[95]、[98]、[101]和[104]至[105]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述精氨酸和所述抗il-31ra中和抗体之间，摩尔比为220∶1和/或重量比为0.3∶1。
[0234]
[108][87]至[90]、[93]、[97]、[100]、[103]和[106]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述精氨酸和所述抗il-31ra中和抗体之间，摩尔比为440∶1和/或重量比为0.5∶1。
[0235]
[109][87]至[90]、[94]、[97]、[100]、[103]和[106]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述精氨酸和所述抗il-31ra中和抗体之间，摩尔比为880∶1和/或重量比为1.0∶1至1.1∶1。
[0236]
[110][87]至[91]、[95]、[98]、[101]、[104]至[105]和[107]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述蔗糖和所述抗il-31ra中和抗体之间，摩尔比为370∶1和/或重量比为0.8∶1至0.9∶1。
[0237]
[111][87]至[90]、[93]、[97]、[100]、[103]、[106]和[108]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述蔗糖和所述抗il-31ra中和抗体之间，摩尔比为740∶1和/或重量比为1.7∶1。
[0238]
[112][87]至[90]、[94]、[97]、[100]、[103]和[109]中任一项所述的冻干制剂，其中，在所述蔗糖和所述抗il-31ra中和抗体之间，摩尔比为1470∶1和/或重量比为3.4∶1至3.5∶1。
[0239]
[113][77]至[112]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时的ph为6.5至7.5。
[0240]
[114][77]至[113]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时的ph为6.7至7.3。
[0241]
[115][77]至[114]中任一项所述的冻干制剂，其中当所述制剂在水中重构时的ph为7。
[0242]
[116][87]至[91]、[95]、[98]、[101]、[104]、[107]和[110]中任一项所述的冻干制剂，其中所述冻干制剂是包含含有seq id no：9的h链和seq id no：10的l链的抗il-31ra抗体作为活性成分的药物组合物，并且通过冷冻干燥包含缓冲剂、稳定剂、赋形剂和非离子表面活性剂的溶液制备，并且其中当冻干制剂在水中重构时产生以下浓度：
[0243]-100mg/ml的抗il-31ra中和抗体；
[0244]-20mmol/l的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0245]-150mmol/l的精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0246]-250mmol/l的蔗糖；和
[0247]-0.50mg/ml的泊洛沙姆188。
[0248]
[117][87]至[90]、[92]、[96]、[99]、[102]、[105]、[107]和[110]中任一项所述的冻干制剂，其中所述冻干制剂是包含含有含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链的抗il-31ra抗体作为活性成分的药物组合物，并且通过冷冻干燥包含缓冲剂、稳定剂、赋形剂和非离子表面活性剂的溶液制备，当冻干制剂在水中重构时，产生以下浓度：
[0249]-61.5mg/ml的抗il-31ra中和抗体；
[0250]-12.3mmol/l的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0251]-92mmol/l的精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0252]-154mmol/l的蔗糖；和
[0253]-0.31mg/ml的泊洛沙姆188。
[0254]
[118][87]至[90]、[93]、[97]、[100]、[103]、[106]、[108]和[111]中任一项所述的冻干制剂，其中所述冻干制剂是包含含有seq id no：9的h链和seq id no：10的l链的抗il-31ra抗体作为活性成分的药物组合物，并且通过冷冻干燥包含缓冲剂、稳定剂、赋形剂和非离子表面活性剂的溶液制备，并且其中当冻干制剂在水中重构时产生以下浓度：
[0255]-50mg/ml的抗il-31ra中和抗体；
[0256]-20mmol/l的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0257]-150mmol/l的精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0258]-250mmol/l的蔗糖；和
[0259]-0.50mg/ml的泊洛沙姆188。
[0260]
[119][87]至[90]、[94]、[97]、[100]、[103]、[109]和[112]中任一项所述的冻干制剂，其中所述冻干制剂是包含含有seq id no：9的h链和seq id no：10的l链的抗il-31ra抗体作为活性成分的药物组合物，并且通过冷冻干燥包含缓冲剂、稳定剂、赋形剂和非离子表面活性剂的溶液制备，并且其中当所述冻干制剂在水中重构时产生以下浓度：
[0261]-25mg/ml的抗il-31ra中和抗体；
[0262]-20mmol/l的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液；
[0263]-150mmol/l的精氨酸盐酸盐(arg-hcl)；
[0264]-250mmol/l的蔗糖；和
[0265]-0.50mg/ml的泊洛沙姆188。
[0266]
[120]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0267]-1至200mg/ml il-31拮抗剂；
[0268]-1至200mmol/l tris缓冲液；
[0269]-4.5至1500mmol/l精氨酸或其盐；
[0270]-7.5至2500mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0271]-0.01至5mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0272]
其中，当所述制剂在水中重构时，包含：
[0273]-1至200mg/ml il-31拮抗剂；
[0274]-1至200mmol/l tris缓冲液；
[0275]-4.5至1500mmol/l精氨酸或其盐；
[0276]-7.5至2500mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0277]-0.01至5mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0278]
并且ph为6至8。
[0279]
[121]包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，其是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0280]-6至100mg/ml il-31拮抗剂；
[0281]-6至20mmol/l tris缓冲液；
[0282]-45至150mmol/l精氨酸或其盐；
[0283]-75至250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0284]-0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0285]
其中，当所述制剂在水中重构时，包含：
[0286]-20至100mg/ml il-31拮抗剂；
[0287]-10至20mmol/l tris缓冲液；
[0288]-75至150mmol/l精氨酸或其盐；
[0289]-125至250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0290]-0.25至0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，并且ph为6至8。
[0291]
[122][120]或[121]所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐与所述il-31拮抗剂的摩尔比为220∶1至1100∶1。
[0292]
[123][120]至[122]中任一项所述的冻干制剂，其中所述蔗糖或海藻糖与所述il-31拮抗剂的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0293]
[124][120]至[123]中任一项所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)、精氨酸-天冬氨酸盐或精氨酸-谷氨酸盐。
[0294]
[125][120]至[124]中任一项所述的冻干制剂，其中所述精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐(arg-hcl)。
[0295]
[126][120]至[125]中任一项所述的冻干制剂，其中所述tris缓冲液是三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐。
[0296]
[127][120]至[126]中任一项所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐为三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。
[0297]
[128][120]或[127]中任一项所述的冻干制剂，其中所述三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐是三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)。
[0298]
[129][120]至[128]中任一项所述的冻干制剂，其中所述il-31拮抗剂是抑制il-31信号传导的抗体。
[0299]
[130][129]所述的冻干制剂，其中所述抑制il-31信号传导的抗体是抗il-31中和抗体或抗il-31ra中和抗体。
[0300]
[131][130]所述的冻干制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是：
[0301]
(1)抗il-31ra抗体，其包含h链可变区和l链可变区，所述h链可变区包含seq id no：1的cdr1、seq 1d no：2的cdr2和seq id no：3的cdr3，所述l链可变区包含seq id no：4
的cdr1、seq id no：5的cdr2和seq id no：6的cdr3；
[0302]
(2)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：7的h链可变区和seq id no：8的l链可变区；或者
[0303]
(3)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链。
[0304]
[132][130]或[131]所述的冻干制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是igg抗体，优选地igg2抗体。
[0305]
[133][130]至[132]中任一项所述的冻干制剂，其中所述抗il-31ra中和抗体是nemolizumab。
[0306]
[134][1]至[133]中任一项所述的制剂，其用于预防和/或治疗il-31相关病症或伴随所述病症的症状。
[0307]
[135][134]所述的制剂，其中所述il-31相关病症是与il-31信号传导相关的炎性疾病。
[0308]
[136][135]所述的制剂，其中所述炎性疾病选自由特应性皮炎、透析诱导的瘙痒和结节性痒疹组成的组。
[0309]
[137][1]至[136]中任一项所述的制剂，其中所述il-31拮抗剂是皮下施用的。
[0310]
[138]用于稳定含抗体制剂中的抗体的方法，包括制备包含精氨酸和/或其盐，和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中在所述溶液中，所述精氨酸和/或其盐与所述抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，并且所述蔗糖或海藻糖与所述抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0311]
[139][138]所述的方法，其中所述含抗体溶液进一步包含6至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0312]
[140][138]或[139]所述的方法，进一步包括通过冷冻干燥所述含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0313]
[141]精氨酸和/或其盐、和/或蔗糖和/或海藻糖用于稳定含抗体制剂中的抗体的用途，包括制备包含精氨酸和/或其盐、和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中在所述溶液中，所述精氨酸和/或其盐与所述抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，并且所述蔗糖或海藻糖与所述抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0314]
[142][141]所述的用途，其中所述含抗体溶液进一步包含6至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0315]
[143][141]或[142]所述的用途，还包括通过冷冻干燥所述含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0316]
[144]用于抑制含抗体制剂中的抗体聚集(聚集体形成)的方法，包括制备含有精氨酸和/或其盐、和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中在所述溶液中，所述精氨酸和/或其盐与所述抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，并且所述蔗糖或海藻糖与所述抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0317]
[145][144]所述的方法，其中所述含抗体溶液进一步包含6至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0318]
[146][144]或[145]所述的方法，进一步包括通过冷冻干燥所述含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0319]
[147]精氨酸和/或其盐，和/或蔗糖和/或海藻糖用于抑制含抗体制剂中抗体聚集(聚集体形成)的用途，包括制备包含精氨酸和/或其盐和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中在所述溶液中，所述精氨酸和/或其盐与所述抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，并且所述蔗糖或海藻糖与所述抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0320]
[148][147]所述的用途，其中所述含抗体溶液进一步包含6至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0321]
[149][147]或[148]所述的用途，还包括通过冷冻干燥所述含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0322]
[150]减少含抗体制剂中具有电荷异质性的成分的方法，包括制备含有精氨酸和/或其盐、和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中在所述溶液中，所述精氨酸和/或其盐与所述抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，并且所述蔗糖或海藻糖与所述抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0323]
[151][150]所述的方法，其中所述含抗体溶液进一步包含6至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0324]
[152][150]或[151]所述的方法，进一步包括通过冷冻干燥所述含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0325]
[153]精氨酸和/或其盐，和/或蔗糖和/或海藻糖在减少含抗体制剂中具有电荷异质性的成分中的用途，包括制备包含精氨酸和/或其盐和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中在所述溶液中，所述精氨酸和/或其盐与所述抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，并且所述蔗糖或海藻糖与所述抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。
[0326]
[154][153]所述的用途，其中所述含抗体溶液进一步包含6至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0327]
[155][153]或[154]所述的用途，还包括通过冷冻干燥所述含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0328]
[156]用于预防和/或治疗il-31相关病症的方法，包括将il-31拮抗剂施用于患有il-31相关病症或处于患il-31相关病症风险的受试者，所述方法包括：
[0329]
通过冷冻干燥包含6至100mg/ml il-31拮抗剂、45至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液来制备冻干制剂；通过在水中重构所述冻干制剂来制备重构溶液；和将所述重构溶液施用于受试者。
[0330]
[157]il-31拮抗剂在制备用于预防和/或治疗il-31相关病症的药物中的用途，其特征在于通过冷冻干燥包含6至100mg/ml il-31拮抗剂、45至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液制备冻干制剂。
[0331]
[158]il-31拮抗剂，其用于预防和/或治疗il-31相关病症，其特征在于将由冻干包含6至100mg/ml il-31拮抗剂、45至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液产生的冻干制剂在使用前在水中重构。
[0332]
[159][156]所述的方法、[157]所述的用途或[158]所述的il-31拮抗剂，其中冻干前的溶液还包含6至20mmol/l的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0333]
[160]注射用制剂或试剂盒，其包含(i)容器，(ii)[1]至[12]和[25]至[137]中任
一项所述的冻干制剂，和(iii)用于重构所述冻干制剂的注射用水。
[0334]
[161]注射用制剂，其包含(i)容器，(ii)所述容器中的冻干制剂，所述冻干制剂由将包含6至100mg/ml抗il-31ra中和抗体、45至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)，和75至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液冻干产生，和(iii)任选地，用于重构所述冻干制剂的注射用水。
[0335]
[162][161]所述的注射用制剂，其中，冻干前的溶液还包含6至20mmol/l的三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)缓冲液和0.15至0.50mg/ml的泊洛沙姆188。
[0336]
[163]注射用制剂，其包含(i)容器，(ii)所述容器中的冻干制剂，所述冻干制剂由将包含有效量的抗il-31ra中和抗体和每1摩尔抗体220至1100摩尔精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和370至1840摩尔蔗糖或海藻糖的溶液冻干产生，和(iii)任选地，用于重构所述冻干制剂的注射用水。
[0337]
[164][160]至[163]中任一项所述的注射用制剂或试剂盒，其中所述冻干制剂和所述注射用水被封装在所述容器中的单独隔室中。
[0338]
[165][160]至[164]中任一项所述的注射用制剂或试剂盒，其中在使用时使用所述容器内的注射用水重构所述冻干制剂。
具体实施方式
[0339]
下文将描述本公开的优选非限制性实施方案。
[0340]
以下实施例中阐述的所有实施方案的描述意图是，在意欲寻求本专利申请保护的国家，它们自然地被解释为在本说明书的“实施方案描述”中等效地描述，而不以限制方式受可以解释实施例内容的任何专利实践、惯例或法律的限制。
[0341]
对于本公开中对数值的描述，最小位(例如，个位)的数值可以包括比最小位小一位(例如，当最小位是个位时，小数点后一位)的四舍五入的值。例如，数值“5”旨在包括在4.5至5.4的范围内的数值。
[0342]
在非限制性实施方案中，本公开涉及包含il-31拮抗剂作为活性成分的冻干制剂，该冻干制剂包含精氨酸和/或其盐，以及蔗糖和/或海藻糖。在另一个非限制性实施方案中，本公开涉及包含il-31拮抗剂作为活性成分的溶液制剂，该溶液制剂包含精氨酸和/或其盐。精氨酸优选地是l-精氨酸。在一个实施方案中，精氨酸和/或其盐是精氨酸盐酸盐、l-精氨酸盐酸盐、精氨酸-天冬氨酸盐、l-精氨酸-天冬氨酸盐、精氨酸-谷氨酸盐或l-精氨酸-谷氨酸盐。本领域技术人员将理解，当提及精氨酸的重量(例如mg)时，该重量可以是游离精氨酸的重量，也可以是包含精氨酸的盐中所含精氨酸的重量。此外，在本公开中，精氨酸的重量或浓度可以是游离精氨酸的重量或浓度与包含精氨酸的盐中所含的精氨酸的重量或浓度之和。在一个实施方案中，本公开的制剂进一步包含tris缓冲液作为缓冲剂。在一个实施方案中，tris缓冲液是三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐，例如三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐(tris-hcl)、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐，或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。在一个实施方案中，本公开的制剂还包含泊洛沙姆188或聚山梨醇酯作为非离子表面活性剂。泊洛沙姆188在日本药典标准中可称为“聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)二醇”。在一个实施方案中，聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在一个实施方案中，在水中重构本公开的冻干制剂后重构溶液的ph为6至8，例如6.5至7.5，例如6.7
至7.3，和例如7。在一个实施方案中，本公开的溶液制剂的ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。同时，三(羟甲基)氨基甲烷在日本药典标准中被称为“氨基丁三醇”。本领域技术人员将理解，当提及三(羟甲基)氨基甲烷的重量(例如mg)时，该重量可以是游离的三(羟甲基)氨基甲烷的重量，也可以是包含三(羟甲基)氨基甲烷的盐中所含的三(羟甲基)氨基甲烷的重量。此外，在本公开中，三(羟甲基)氨基甲烷的重量或浓度可以是游离三(羟甲基)氨基甲烷的重量或浓度与在包含三(羟甲基)氨基甲烷的盐中所含的三(羟甲基)氨基甲烷的重量或浓度之和。
[0343]
本公开制剂中所含的il-31拮抗剂的量和浓度没有特别限制，可以根据待施用受试者进行适当调整，例如制剂是成人用还是儿童用，或者是制剂用于预防还是治疗，或取决于待预防或治疗的病症或症状的类型、严重程度等。因此，il-31拮抗剂与包含在本公开的制剂中的另一成分的摩尔比和重量比可以是不同的值。在非限制性实施方案中，精氨酸和/或其盐与il-31拮抗剂的摩尔比为3∶1至220500∶1，例如22∶1至6600∶1、33∶1至5500∶1，44∶1至4400∶1、55∶1至3300∶1、110∶1至2200∶1、220∶1至1100∶1、220∶1至880∶1、220∶1至440∶1或440∶1至880∶1。在非限制性实施方案中，精氨酸与il-31拮抗剂的重量比为0.004∶1至261∶1，例如0.03∶1至9.6∶1、0.1∶1至4.8∶1、0.2∶1至3.2∶1、0.3∶1至1.6∶1、0.3∶1至1.3∶1、0.3∶1至1.1∶1、0.5∶1至1.1∶1或0.3∶1至0.5∶1。在非限制性实施方案中，蔗糖或海藻糖与il-31拮抗剂的摩尔比为6∶1至367500∶1，例如75∶1至7360∶1、100∶1至5520∶1、150∶1至3680∶1、300∶1至1840∶1、370∶1到1840∶1、370∶1至1470∶1、740∶1至1470∶1或370∶1至740∶1。在非限制性实施方案中，蔗糖或海藻糖与il-31拮抗剂的重量比为0.013∶1至856∶1，例如0.18∶1至16.8∶1、0.23∶1至12.6∶1、0.35∶1至8.4∶1、0.7∶1至4.2∶1、0.8∶1至4.3∶1、0.8∶1至3.5∶1、1.7∶1至3.5∶1或0.8∶1至1.7∶1。同时，在日本药典标准中，蔗糖被称为“seisei hakutou(纯化的蔗糖)”。
[0344]
在非限制性实施方案中，包含在溶液状态的本公开的制剂中的il-31拮抗剂的浓度(即，在溶液制剂中的浓度、在冻干溶液的冻干之前的溶液中的浓度，或冻干制剂重新溶解后在溶液中的浓度)为1mg/ml至200mg/ml，例如2mg/ml至200mg/ml，3mg/ml至200mg/ml，3mg/ml至150mg/ml，6mg/ml至100mg/ml，10mg/ml至100mg/ml，15mg/ml至100mg/ml，30mg/ml至100mg/ml，50mg/ml至100mg/ml，6mg/ml至70mg/ml，10mg/ml至70mg/ml，15mg/ml至70mg/ml，30mg/ml至70mg/ml，50mg/ml至70mg/ml，6mg/ml至50mg/ml，10mg/ml至50mg/ml，30mg/ml至50mg/ml或6mg/ml至30mg/ml。
[0345]
在一个实施方案中，包含在溶液状态的本公开的制剂中的精氨酸和/或其盐的浓度为4.5mmol/l至1500mmol/l，例如9mmol/l至750mmol/l，15mmol/l至450mmol/l、22.5mmol/l至300mmol/l，45mmol/l至150mmol/l、75mmol/l至150mmol/l或45mmol/l至75mmol/l。
[0346]
在一个实施方案中，包含在溶液状态的本公开的制剂中的蔗糖和/或海藻糖的浓度为7.5mmol/l至2500mmol/l，例如15mmol/l至1250mmol/l、25mmol/l l至750mmol/l，37.5mmol/l至500mmol/l，75mmol/l至250mmol/l，125mmol/l至250mmol/l，75mmol/l至170mmol/l，125mmol/l至170mmol/l，或75mmol/l至125mmol/l。
[0347]
在一个实施方案中，包含在溶液状态的本公开的制剂中的tris缓冲液的浓度为1mmol/l至200mmol/l，例如1mmol/l至100mmol/l，2mmol/l至60mmol/l，3mmol/l至40mmol/
l，6mmol/l至20mmol/l，3mmol/l至15mmol/l，10mmol/l至20mmol/l，10mmol/l至15mmol/l，6mmol/l至15mmol/l，或6mmol/l至10mmol/l。
[0348]
在一个实施方案中，在溶液状态的本公开的制剂中包含的泊洛沙姆188或聚山梨醇酯的浓度为0.015mg/ml至5mg/ml，例如0.03mg/ml至2.5mg/ml、0.05mg/ml至1.5mg/ml、0.075mg/ml至1mg/ml、0.15mg/ml至0.5mg/ml、0.15mg/ml至0.4mg/ml、0.25mg/ml至0.5mg/ml或0.15mg/ml至0.25mg/ml。
[0349]
在一个实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0350]
1mg/ml至200mg/ml il-31拮抗剂；
[0351]
1mmol/l至200mmol/l tris缓冲液；
[0352]
4.5mmol/l至1500mmol/l精氨酸或其盐；
[0353]
7.5mmol/l至2500mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0354]
0.01mg/ml至5mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0355]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0356]
在特定实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0357]
6mg/ml至100mg/ml il-31拮抗剂；
[0358]
6mmol/l至20mmol/l tris缓冲液；
[0359]
45mmol/l至150mmol/l精氨酸或其盐；
[0360]
75mmol/l至250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0361]
0.15mg/ml至0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0362]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0363]
在特定实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含，每小瓶、药筒或注射器：
[0364]
1mg至800mg il-31拮抗剂；
[0365]
0.1mg至40mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0366]
0.8mg至400mg精氨酸；
[0367]
3mg至1100mg蔗糖或海藻糖；和
[0368]
0.01mg至7mg泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0369]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0370]
在特定实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含，每小瓶、药筒或注射器：
[0371]
10mg至80mg il-31拮抗剂；
[0372]
0.8mg至4mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0373]
8mg至40mg精氨酸；
[0374]
30mg至110mg蔗糖或海藻糖；和
[0375]
0.1mg至0.7mg泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0376]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0377]
在一个实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包
含：
[0378]
61mg/ml至75mg/ml，例如68mg/ml抗il-31ra中和抗体；
[0379]
11mmol/l至16mmol/l，例如13.6mmol/l tris-hcl；
[0380]
82mmol/l至122mmol/l，例如102mmol/l arg-hcl；
[0381]
153mmol/l至187mmol/l，例如170mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0382]
0.17mg/ml至0.51mg/ml，例如0.34mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0383]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0384]
在另一个实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0385]
45mg/ml至55mg/ml，例如50mg/ml抗il-31ra中和抗体：
[0386]
8mmol/l至12mmol/l，例如10mmol/l tris-hcl；
[0387]
60mmol/l至90mmol/l，例如75mmol/l arg-hcl；
[0388]
113mmol/l至138mmol/l，例如125mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0389]
0.13mg/ml至0.38mg/ml，例如0.25mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0390]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0391]
在还另一个实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0392]
14mg/ml至17mg/ml，例如15mg/ml抗il-31ra中和抗体；
[0393]
5mmol/l至7mmol/l，例如6mmol/l tris-hcl；
[0394]
36mmol/l至54mmol/l，例如45mmol/l arg-hcl；
[0395]
68mmol/l至83mmol/l，例如75mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0396]
0.08mg/ml至0.23mg/ml，例如0.15mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0397]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0398]
在进一步的实施方案中，本公开的冻干制剂是由冻干溶液产生的组合物，所述溶液包含：
[0399]
7mg/ml至8mg/ml，例如7.5mg/ml抗il-31ra中和抗体；
[0400]
5mmol/l至7mmol/l，例如6mmol/l tris-hcl；
[0401]
36mmol/l至54mmol/l，例如45mmol/l arg-hcl；
[0402]
68mmol/l至83mmol/l，例如75mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0403]
0.08mg/ml至0.23mg/ml，例如0.15mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0404]
其中，当制剂在水中重构时，ph为6至8，例如6.5至7.5，例如7。
[0405]
本公开的冻干制剂中所含的每种成分的量也可以表示为每容器例如小瓶、药筒和注射器的重量(质量)。容器可以包含单剂量或多剂量(例如，两剂、三剂、四剂等)的制剂。例如，容器包含单剂量的制剂。多个容器也可用于单剂量。每次施用的剂量可以根据施用方法(例如皮下施用)、目标疾病(例如特应性皮炎)、使用目的(例如用于预防或治疗)、患者类型(例如成人或儿童)、患者的情况(例如瘙痒的严重程度)等适当确定。据此，可以适当地确定待添加到容器中用于重构冻干制剂的溶剂例如水的量。当制剂被皮下施用时，单剂量的液体体积(在冻干制剂的情况下，用水重构后待施用的液体体积)可以是例如0.1ml至10ml、0.2ml至5ml、0.2ml至1.6ml、0.5ml至2ml、0.8ml至1.2ml或0.9ml至1.1ml，例如1.0ml，但不
限于此。应该注意的是，本领域技术人员将会理解，容器可能会装满制剂，以确保考虑到施用时药液的损失，可以从一个容器(例如小瓶、药筒或注射器)获得足以用于施用单剂量或多剂量的il-31拮抗剂的量。
[0406]
在一个实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如注射器：
[0407]
68mg至83mg，例如75mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0408]
1.4mg至2.2mg，例如1.8mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0409]
15mg至23mg，例如19mg精氨酸；
[0410]
58mg至70mg，例如64mg蔗糖；和
[0411]
0.2mg至0.6mg，例如0.4mg泊洛沙姆188。
[0412]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以称为每容器例如注射器包含：
[0413]
75mg(74.5mg至75.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0414]
1.8mg(1.75mg至1.84mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0415]
19mg(18.5mg至19.4mg)精氨酸；
[0416]
64mg(63.5mg至64.4mg)蔗糖；和
[0417]
0.4mg(0.35mg至0.44mg)泊洛沙姆188。
[0418]
此外，在上述实施方案中，上述三(羟甲基)氨基甲烷的重量可以是游离的三(羟甲基)氨基甲烷的重量与三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐(可作为ph调节剂添加)中所含的三(羟甲基)氨基甲烷的重量之和。此外，上述精氨酸可以作为含有精氨酸的盐(例如，精氨酸盐酸盐)添加。本领域技术人员将理解，在添加含精氨酸的盐时，上述精氨酸的重量为盐中所含精氨酸的重量。
[0419]
因此，本公开的冻干制剂也可以称为每容器例如注射器包含：
[0420]
75mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链、)；
[0421]
0.24mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0422]
23.6mg l-精氨酸盐酸盐；
[0423]
63.9mg蔗糖；
[0424]
0.37mg泊洛沙姆188；和
[0425]
三(羟甲基)氨基甲烷盐酸盐作为ph调节剂。
[0426]
在另一个实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如注射器：
[0427]
35mg至43mg，例如39mg抗il-31ra 中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0428]
0.7mg至1.1mg，例如0.9mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0429]
8mg至12mg，例如10mg精氨酸；
[0430]
30mg至36mg，例如33mg蔗糖；和
[0431]
0.1mg至0.3mg，例如0.2mg泊洛沙姆188。
[0432]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以称为每容器例如注射器包含：
[0433]
39mg(38.5mg至39.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0434]
0.9mg(0.85mg至0.94mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0435]
10mg(9.5mg至10.4mg)精氨酸；
[0436]
33mg(32.5mg至33.4mg)蔗糖；和
[0437]
0.2mg(0.15mg至0.24mg)泊洛沙姆188。
[0438]
在进一步的实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如药筒：
[0439]
32mg至40mg，例如36mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0440]
0.7mg至1.1mg，例如0.9mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0441]
7mg至11mg，例如9mg精氨酸；
[0442]
28mg至34mg，例如31mg蔗糖；和
[0443]
0.1mg至0.3mg，例如0.2mg泊洛沙姆188。
[0444]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以被称为每容器例如药筒包含：
[0445]
36mg(35.5mg至36.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0446]
0.9mg(0.85mg至0.94mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0447]
9mg(8.5mg至9.4mg)精氨酸；
[0448]
31mg(30.5mg至31.4mg)蔗糖；和
[0449]
0.2mg(0.15mg至0.24mg)泊洛沙姆188。
[0450]
在还另一个实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如小瓶：
[0451]
46mg至56mg，例如51mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0452]
2.0mg至3.0mg，例如2.5mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0453]
22mg至32mg，例如27mg精氨酸；
[0454]
79mg至97mg，例如88mg蔗糖；和
[0455]
0.3mg至0.8mg，例如0.5mg泊洛沙姆188。
[0456]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以被称为每容器例如小瓶包含：
[0457]
51mg(50.5mg至51.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0458]
2.5mg(2.45mg至2.54mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0459]
27mg(26.5mg至27.4mg)精氨酸；
[0460]
88mg(87.5mg至88.4mg)蔗糖；和
[0461]
0.5mg(0.45mg至0.54mg)泊洛沙姆188。
[0462]
此外，在另一个实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如小瓶：
[0463]
27mg至33mg，例如30mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0464]
2.4mg至3.6mg，例如3.0mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0465]
26mg至38mg，例如32mg精氨酸；
[0466]
94mg至114mg，例如104mg蔗糖；和
[0467]
0.3mg至0.9mg，例如0.6mg泊洛沙姆188。
[0468]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以被称为每容器例如小瓶包含：
[0469]
30mg(29.5mg至30.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0470]
3.0mg(2.95mg至3.04mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0471]
32mg(31.5mg至32.4mg)精氨酸；
[0472]
104mg(103.5mg至104.4mg)蔗糖；和
[0473]
0.6mg(0.55mg至0.64mg)泊洛沙姆188。
[0474]
在还另一个实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如小瓶：
[0475]
17mg至21mg，例如19mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0476]
1.5mg至2.3mg，例如1.9mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0477]
16mg至24mg，例如20mg精氨酸；
[0478]
59mg至73mg，例如66mg蔗糖；和
[0479]
0.2mg至0.6mg，例如0.4mg泊洛沙姆188。
[0480]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以被称为每容器例如小瓶包含：
[0481]
19mg(18.5mg至19.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0482]
1.9mg(1.85mg至1.94mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0483]
20mg(19.5mg至20.4mg)精氨酸；
[0484]
66mg(65.5mg至66.4mg)蔗糖；和
[0485]
0.4mg(0.35mg至0.44mg)泊洛沙姆188。
[0486]
在进一步的实施方案中，本公开的冻干制剂包含，每容器例如小瓶：
[0487]
13mg至15mg，例如14mg抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0488]
1.0mg至1.6mg，例如1.3mg三(羟甲基)氨基甲烷；
[0489]
12mg至18mg，例如15mg精氨酸；
[0490]
42mg至52mg，例如47mg蔗糖；和
[0491]
0.2mg至0.5mg，例如0.3mg泊洛沙姆188。
[0492]
在上述实施方案中，关于数值的描述，旨在最小位(例如，个位)的数值包括其中比最小位(例如，当最小位是个位时，第一个小数位)小一位的四舍五入的值。更具体地，本公开的冻干制剂还可以被称为每容器例如小瓶包含：
[0493]
14mg(13.5mg至14.4mg)抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0494]
1.3mg(1.25mg至1.34mg)三(羟甲基)氨基甲烷；
[0495]
15mg(14.5mg至15.4mg)精氨酸；
[0496]
47mg(46.5mg至47.4mg)蔗糖；和
[0497]
0.3mg(0.25mg至0.34mg)泊洛沙姆188。
[0498]
在一个实施方案中，关于本公开的冻干制剂，当制剂在水中重构时，重构溶液包含：
[0499]
90mg/ml至110mg/ml，例如100mg/ml抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0500]
16mmol/l至24mmol/l，例如20mmol/l tris-hcl；
[0501]
120mmol/l至180mmol/l，例如150mmol/l arg-hcl；
[0502]
225mmol/l至275mmol/l，例如250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0503]
0.25mg/ml至0.75mg/ml，例如0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0504]
其中，ph为6至8，例如6.7至7.3，例如7。
[0505]
在另一个实施方案中，关于本公开的冻干制剂，当制剂在水中重构时，重构溶液包含：
[0506]
55mg/ml至68mg/ml，例如61.5mg/ml抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0507]
10mmol/l至15mmol/l，例如12.3mmol/l tris-hcl；
[0508]
74mmol/l至110mmol/l，例如92mmol/l arg-hcl；
[0509]
139mmol/l至169mmol/l，例如154mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0510]
0.16mg/ml至0.47mg/ml，例如0.31mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0511]
其中，ph为6至8，例如6.7至7.3，例如7。
[0512]
此外，在另一个实施方案中，关于本公开的冻干制剂，当制剂在水中重构时，重构溶液包含：
[0513]
45mg/ml至55mg/ml，例如50mg/ml抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0514]
16mmol/l至24mmol/l，例如20mmol/l tris-hcl；
[0515]
120mmol/l至180mmol/l，例如150mmol/l arg-hcl；
[0516]
225mmol/l至275mmol/l，例如250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0517]
0.25mg/ml至0.75mg/ml，例如0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0518]
其中，ph为6至8，例如6.7至7.3，例如7。
[0519]
在还另一个实施方案中，关于本公开的冻干制剂，当制剂在水中重构时，重构溶液
包含：
[0520]
23mg/ml至28mg/ml，例如25mg/ml抗il-31ra中和抗体(抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)；
[0521]
16mmol/l至24mmol/l，例如20mmol/l tris-hcl；
[0522]
120mmol/l至180mmol/l，例如150mmol/l arg-hcl；
[0523]
225mmol/l至275mmol/l，例如250mmol/l蔗糖或海藻糖；和
[0524]
0.25mg/ml至0.75mg/ml，例如0.50mg/ml泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20，
[0525]
其中，ph为6至8，例如6.7至7.3，例如7。
[0526]
本公开的制剂的示例性实施方案包括但不限于以下制剂：
[0527]
[0528]
[0529][0530]
在非限制性实施方案中，本公开的制剂可用于预防和/或治疗il-31相关病症或其伴随的症状。在一个实施方案中，il-31相关病症是与il-31信号传导相关的炎性病症。在特定实施方案中，il-31相关病症是特应性皮炎、瘙痒(例如，透析性瘙痒或由特应性皮炎引起的瘙痒)或结节性痒疹。在另一个特定实施方案中，il-31相关病症或其伴随症状的治疗是改善由瘙痒引起的睡眠障碍(例如，增加从入睡到醒来的时间和/或减少入睡潜伏期(从上床睡觉到入睡的时间))。在另一个实施方案中，il-31相关病症或其伴随症状的治疗是抑制
选自由发红、硬结、丘疹、水肿、表皮剥落和苔藓样变组成的组的由特应性皮炎引起的至少一种症状。在特定实施方案中，特应性皮炎是局部治疗(例如，通过局部类固醇或局部钙调神经磷酸酶抑制剂治疗)不够有效或不能耐受的中度或重度特应性皮炎。在一个实施方案中，本公开的制剂是用于肠胃外施用的制剂，例如，用于静脉内施用或用于皮下施用。
[0531]
在非限制性实施方案中，本公开涉及用于稳定含抗体制剂中的抗体的方法，该方法包括制备包含精氨酸和/或其盐、和/或蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液，其中溶液中精氨酸和/或其盐与抗体的摩尔比为220∶1至1100∶1，蔗糖或海藻糖与抗体的摩尔比为370∶1至1840∶1。在另一个非限制性实施方案中，本公开涉及用于抑制含抗体制剂中的抗体聚集(聚集体形成)的方法，该方法包括通过冷冻干燥含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂，所述含抗体溶液包含45mmol/l至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75mmol/l至250mmol/l蔗糖或海藻糖。在进一步的非限制性实施方案中，本公开涉及用于减少含抗体冻干制剂中具有电荷异质性的成分的方法，该方法包括通过冷冻干燥含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂，所述含抗体溶液包含45mmol/l至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hci)和75mmol/l至250mmol/l蔗糖或海藻糖。在一个实施方案中，冻干前的含抗体溶液进一步包含6mmol/l至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐和0.15mg/ml至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0532]
在非限制性实施方案中，本公开涉及用于预防和/或治疗il-31相关病症的方法，包括向患有il-31相关病症或处于患il-31相关病症风险的受试者施用il-31拮抗剂，该方法包括通过冷冻干燥包含6mg/ml至100mg/ml il-31拮抗剂、45mmol/l至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75mmol/l至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液来制备冻干制剂；通过重构冻干制剂制备重构溶液；并对受试者施用重构溶液。
[0533]
在非限制性实施方案中，本公开涉及il-31拮抗剂在制备用于预防和/或治疗il-31相关病症的药物中的用途，其特征在于通过冷冻干燥包含6mg/ml至100mg/ml il-31拮抗剂、45mmol/l至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75mmol/l至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液制备冻干制剂。
[0534]
在非限制性实施方案中，本公开涉及用于预防和/或治疗il-31相关病症的il-31拮抗剂，其特征在于由冻干包含6mg/ml至100mg/ml il-31拮抗剂、45mmol/l至150mmol/l精氨酸盐酸盐(arg-hcl)和75mmol/l至250mmol/l蔗糖或海藻糖的溶液产生的冻干制剂被重构并使用。
[0535]
在一个实施方案中，上述冻干前的溶液还可包含6mmol/l至20mmol/l三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐和0.15mg/ml至0.50mg/ml泊洛沙姆188。
[0536]
在非限制性实施方案中，本公开涉及注射用制剂或试剂盒，其包含(i)容器；(ii)本公开的冻干制剂；和(iii)任选地注射用水，用于重构冻干制剂。在一个实施方案中，本公开的注射用制剂或试剂盒的容器是玻璃注射器、玻璃药筒或玻璃小瓶。在特定实施方案中，本公开的注射用制剂或试剂盒的容器是双腔注射器(dcs)或双腔药筒(dcc)，并且冻干制剂和注射用水被封装在容器中的单独隔室中，即，将本公开的冻干制剂被填充到两个腔室中的任一个腔室中，并且将注射用水填充到另一个腔室中。优选地，注射用水为水，并且可选地满足日本药典中规定的“注射用水”的标准。
[0537]
il-31(白介素-31)是一种t细胞细胞因子。已知il-31与瘙痒有关，在过表达il-31的转基因小鼠中，会出现类似于特应性皮炎的皮炎样症状，并观察到持续的搔抓行为。
[0538]
人il-31的核酸序列和氨基酸序列也分别称为refseq登录号nm_001014336和refseq登录号np_001014358。
[0539]
il-31受体由il-31受体a(il-31ra)和制瘤素m受体(osmr)的异二聚体形成(nat immunol(2004)5，752-60)。il-31ra，也称为nr10，已知具有多个剪接变体(wo 00/075314)。已知的剪接变体为nr10.1(652个氨基酸)、nr10.2(252个氨基酸)、nr10.3(662个氨基酸，也称为il-31rav4)、il31rav3(764个氨基酸)等，优选的il-31ra的实例包括nr10.3(il-31rav4)和il-31rav3。人il-31ra(il-31rav4)的核酸序列和氨基酸序列也分别已知为refseq登录号nm_001242638和refseq登录号np_001229567。人il-31ra(il-31rav3)的核酸序列和氨基酸序列也分别已知为refseq登录号nm_139017和refseq登录号np_620586。人osmr的核酸序列和氨基酸序列也分别已知为refseq登录号nm_003999和refseq登录号np_003990。
[0540]
本公开的il-31拮抗剂，在一个实施方案中，是指抑制或阻断il-31诱导的细胞内信号传导的化合物。该化合物也可以表达为抑制il-31信号传导的化合物。这种化合物可以是天然存在的化合物或人工合成的化合物。此外，这样的化合物可以是低分子量化合物，也可以是高分子量化合物例如蛋白质。
[0541]
已知存在于细胞外的il-31通过存在于细胞表面的il-31受体(il-31ra和osmr的异二聚体)触发细胞内信号传导(nat immunol(2004)5，752-760)。il-31受体的胞外结构域包括il-31结合结构域，并且il-31与其结合引起il-31受体的构象变化。因此，细胞内信号传导从il-31受体的细胞内结构域开始。
[0542]
在一种方法中，可以通过检查某种化合物是否抑制il-31与il-31受体的结合来验证该化合物是否抑制il-31信号传导。进行这种确定的方法的实例包括使用elisa或流式细胞术的测定和使用表面等离子共振的测定。以elisa为例，可以通过将il-31受体(或il-31ra)蛋白固定在板上，制备用于通过使用二抗例如酶标记的抗-il-31抗体来检测与其结合的il-31蛋白量的系统，并确定添加该化合物是否会降低检测到的il-31蛋白的量来评估化合物是否抑制il-31与il-31受体的结合。
[0543]
在备选方法中，可以通过检查由il-31对细胞的作用诱导的生物活性是否被某种化合物抑制来验证该化合物是否抑制il-31信号传导。生物活性没有特别限制，只要可以使用任何方法定量或定性确定即可，并且这种生物活性的实例包括细胞增殖活性、蛋白质磷酸化活性和基因/蛋白质表达诱导活性。例如，该化合物是否抑制il-31信号传导可以通过以下评估：制备在表面表达il-31受体并且其增殖活性响应于外部il-31刺激而被诱导的细胞，并确定是否该化合物的添加降低了il-31诱导的细胞增殖活性。作为这样的细胞，可以使用固有地表达il-31受体的天然存在的细胞，或者可以使用人工合成以表达il-31受体的重组细胞。重组细胞的合适例子包括表达il-31受体的ba/f3细胞。作为进一步的替代方案，可以使用dillon等人的文件中描述的方法(nat immunol(2004)5，752-760)。
[0544]
在本发明中，il-31拮抗剂对il-31信号传导的抑制程度可以为但不限于至少10％或更多，优选地20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多，特别优选地90％或更多、95％或更多、和98％或更多。
[0545]
在本公开中，抑制il-31信号传导的化合物的优选实施方案包括抑制il-31信号传导的蛋白质。此处使用的蛋白质没有特别限制，只要它具有与il-31或il-31受体特异性结
合的性质即可。优选的蛋白质的实例包括抗体和抗体样分子(curr opin biotechnol(2006)17，653-658；curt opin struct biol(1997)7，463-469；和protein sci(2006)15，14-27)。抗体包括任何抗体，例如单克隆抗体(例如，igg、igm、ige、iga和igd)、多克隆抗体、工程化抗体(例如，嵌合抗体、人源化抗体和糖工程化抗体(wo 99/54342和wo 00/61739))、抗体片段(例如fab、f(ab
′
)2、fv和cdr)、多特异性抗体(例如双特异性抗体)和缀合的抗体(例如与聚乙二醇(peg)、放射性同位素或药物缀合的抗体)。另一方面，抗体样分子的实例包括darpin(wo 2002/020565)、亲和体(affibody)(wo 1995/001937)、avimer(wo2004/044011)和adnectin(wo2002/032925)。更优选的是抑制il-31信号传导的抗体。抑制il-31信号传导的其他优选蛋白质的实例包括含有il-31ra胞外结构域的蛋白质和含有il-31受体的每个胞外结构域的蛋白质(il-31ra和osmr的异二聚体)。
[0546]
在本公开中，抑制il-31信号传导的抗体的优选实施方案包括通过与il-31结合来抑制il-31信号传导的抗体(抗il-31中和抗体)和通过与il-31受体结合来抑制il-31信号传导的抗体(抗il-31受体中和抗体)。抗il-31受体中和抗体包括通过与il-31ra结合来抑制il-31信号传导的抗体(抗il-31ra中和抗体)，通过与osmr结合来抑制il-31信号传导的抗体(抗osmr中和抗体)，以及通过与il-31ra和osmr的异二聚体结合来抑制il-31信号传导的抗体(抗il-31ra/osmr异二聚体中和抗体)。在这些抗il-31受体中和抗体中，优选抗il-31ra中和抗体或抗il-31ra/osmr异二聚体中和抗体，更优选抗il-31ra中和抗体。
[0547]
本发明中使用的抗体就没有特别限定，只要是与所希望的抗原结合以抑制il-31信号传导即可，它们可以是多克隆抗体或单克隆抗体。优选单克隆抗体，因为可以稳定地生产均质抗体。
[0548]
本发明的氨基酸序列中所含的氨基酸可以被翻译后修饰(例如，通过焦谷氨酰化将n末端谷氨酰胺修饰为焦谷氨酸是本领域技术人员公知的)。自然地，这种翻译后修饰的氨基酸包括在本发明中使用的抗体中。
[0549]
在进一步的实施方案或另一个实施方案中，本公开的抑制il-31信号传导的抗体优选地包含igg2的h链恒定区序列的氨基酸变体，其中该氨基酸变体在野生型igg2的h链恒定区序列(seq id no：12)中包含位置419(eu编号)的谷氨酸。与包含除了位置419处氨基酸变化之外具有相同氨基酸序列的野生型igg2的h链恒定区序列的参考抗体相比，工程化抗体的优势在于其表现出增加的血浆半衰期。据认为，这种增加的血浆半衰期是由在位置419处用谷氨酸取代氨基酸诱导的等电点(pi)降低引起的(wo 2016/167263的实施例2)。
[0550]
因此，在一个实施方案中，本公开的冻干制剂和溶液制剂是有利的，因为它涉及用于提供相对于包含参考抗体的(参考)冻干制剂和溶液制剂的增加的血浆半衰期的冻干制剂和溶液制剂，其中所述参考抗体包含除了位置419处的氨基酸变化之外具有相同氨基酸序列的野生型igg2的h链恒定区序列。
[0551]
在这种情况下，在优选实施方案中，本公开的抑制il-31信号传导的抗体为任意一种以下抗il-31ra中和抗体：
[0552]
(1)抗il-31ra抗体，其包含h链可变区和l链可变区，所述h链可变区包含seq id no：1所示的cdr1、seq id no：2所示的cdr2和seq id no：3所示的cdr3，所述l链可变区包含seq id no：4所示的cdr1、seq id no：5所示的cdr2和seq id no：6所示的cdr3；
[0553]
(2)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：7所示的h链可变区和seq id no：8所示的l
链可变区；和
[0554]
(3)抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9所示的h链和seq id no：10所示的l链。
[0555]
应当理解，等电点(pi)，也简称为“pi”，可以是理论等电点，也可以是实验测得的等电点，在本说明书中没有明确描述，除非在上下文相矛盾。
[0556]
例如，等电点的值可以通过本领域技术人员已知的等电聚焦来测量。理论等电点的值可以使用基因和氨基酸序列分析软件(例如，genetyx)来计算。或者，理论等电点的值可以通过使用例如小鼠、大鼠、兔、狗、猴、人等的血浆并结合本领域技术人员已知的方法例如biacore、细胞增殖测定、elisa、eia(酶免疫测定)、ria(放射免疫测定)或免疫荧光进行抗体的药代动力学研究来测量。
[0557]
抗体的血浆半衰期在氨基酸变异(修饰)前后是否发生变化，可以通过使用本领域技术人员已知的方法例如，使用小鼠、大鼠、兔、狗、猴、人等的血浆进行抗体的药代动力学研究来验证。
[0558]
本公开的抑制il-31信号传导的抗体，在又一个实施方案或另一个实施方案中，优选地不(实质性)表现出与来自小鼠、大鼠和兔中的任何一种的il-31ra的交叉反应性，尽管它与来自人和食蟹猴的il-31ra具有交叉反应性。
[0559]
制备抗体的方法为本领域技术人员所熟知，例如可以使用杂交瘤法(nature(1975)256，495)或噬菌体抗体文库法(nature(1991)352，624-628；j mol biol(1991)222，581-597)制备抗体。使用il-31蛋白或il-31受体蛋白作为免疫原，通过这些方法可以获得大量的抗il-31抗体或抗il-31受体抗体。此外，使用上述用于检测抑制il-31信号传导的化合物的任何方法筛选这些抗体允许获得抗il-31中和抗体或抗il-31受体中和抗体。还可以使用本领域技术人员已知的基因工程技术来制备诸如il-31或il-31受体的蛋白质。具体而言，这样的蛋白质可以通过将编码目标蛋白质的基因插入表达载体，将该载体导入适当的宿主细胞，然后纯化在宿主细胞或宿主细胞的培养物上清中表达的目标蛋白质来制备。
[0560]
优选的抗il-31中和抗体的实例包括在wo 2006/122079、wo 2008/028192和wo 2009/071696中描述的抗il-31抗体。
[0561]
优选的抗il-31ra中和抗体的实例包括但不限于wo 2007/142325中描述的抗il-31ra(nr10)抗体、wo 2009/072604中描述的抗il-31ra(nr10)抗体，以及在wo2010/064697中描述的抗il-31ra(nr10)抗体。
[0562]
此外，其他优选的抗il-31ra中和抗体的实例包括抗人il-31ra(中和)抗体，具体地包括识别人il-31ra结构域1和/或结构域2的抗il-31ra(中和)抗体。如本文所用，人il-31ra的结构域1指seq id no：11所示的氨基酸序列中从第53位氨基酸到第152位氨基酸(lpakp到lenia)的区域。结构域2指seq id no：11所示氨基酸序列中从153位氨基酸到259位氨基酸(ktepp到eeeap)的区域。
[0563]
在没有任何限制的情况下，在抗il-31ra中和抗体中，更优选的是在wo 2010/064697中描述的抗il-31ra抗体，其包含h链(重链)可变区和l链可变区，所述h链(重链)可变区包含如seq id no：1所示的cdr1、seq id no：2所示的cdr2和seq id no：3所示的cdr3，所述l链可变区包含seq id no：4所示的cdr1、seq id no：5所示的cdr2，和seq id no：6所示的cdr3。还更优选的是抗il-31ra抗体，其包含seq id no：7所示的h链可变区和seq id no：8所示的l链(轻链)可变区。特别优选的是nemolizumab(cim331)，其是包含seq id no：9
所示的h链和seq id no：10所示的l链的抗il-31ra抗体。
[0564]
用于定义cdr的已知方法包括根据kabat等人的方法(sequences of proteins of immunological interest，第5版(1991)，bethesda，md)，根据chothia等人的方法(science(1986)233，755-758)，以及基于抗原-抗体接触区域的方法(j mol biol(1996)262，732-745)。具体来说，每种方法将cdr定义如下：
[0565][0566][0567]
本公开的优选的抗il-31ra中和抗体的实例包括抗il-31ra抗体，其包含包含在seq id no：7所示的h链可变区中的cdr1、cdr2和cdr3，以及包含在seq id no：8所示的l链可变区中的cdr1、cdr2和cdr3，分别作为h链cdr1、cdr2和cdr3和l链cdr1、cdr2和cdr3。这种抗体中的cdr可以根据kabat等人的方法、chothia等人的方法和基于抗原-抗体接触区的方法中的任何一种，或根据这些方法的组合来定义。
[0568]
类似地，作为抗il-31ra中和抗体，优选与由上述h链和l链的cdr序列，h链和l链可变区序列，以及全长h链和l链序列定义的抗il-31ra抗体所结合的相同表位结合的抗il-31ra抗体。表位是指抗体识别和结合的抗原的特定结构单元。当抗原是多肽时，表位通常由约6至10个氨基酸组成。可以使用本领域技术人员已知的方法进行表位鉴定，例如通过抗原片段化合成肽的方法，将定点诱变引入抗原的方法(例如精氨酸/谷氨酸扫描，j biol chem(1995)270，21619-21625；j biol chem(2006)281，20464-20473)，以及使抗原-抗体复合物结晶的方法(使用抗体：实验室手册(1999)，冷泉港实验室出版社，纽约)。在本公开中，叙述“结合相同的表位”是指两个抗体结合的表位至少部分地彼此重叠。重叠程度为但不限于至少10％或更多，优选地20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多，特别优选地90％或更多，最优选100％。
[0569]
类似地，作为抗il-31ra中和抗体优选的是抗il-31ra抗体，其与由上述h链和l链的cdr序列，h链和l链可变区序列，以及全长h链和l链序列定义的抗il-31ra抗体竞争结合il-31ra。例如，两种抗体是否相互竞争可以通过使用利用elisa的竞争结合测定来评估。具体方法如下：两种抗体之一预先用例如荧光标记。制备用于检测抗体(标记抗体)与抗原结合的系统。将其他未标记抗体(测试抗体)共存的情况与测试抗体不共存于系统中的情况进行比较。如果在测试抗体的存在下标记抗体与抗原的结合水平降低，则可以判断测试抗体和标记抗体相互竞争。在本公开中，竞争程度是但不特别限于至少10％或更多，优选地20％或更多、30％或更多、40％或更多、50％或更多、60％或更多、70％或更多、80％或更多，特别优选地90％或更多、95％或更多、98％或更多(即，其他抗体的结合水平降低)。
[0570]
本公开中的特应性皮炎可以优选地是由il-31信号传导引起的或由il-31诱导的特应性皮炎，或对il-31拮抗剂的预防和/或治疗表现出响应性的特应性皮炎，但不限于此。
[0571]
本公开中的瘙痒可以是特应性皮炎引起的瘙痒，优选地为由于由il-31信号传导引起的或由il-31诱导的特应性皮炎而引起的瘙痒，但不限于此。此外，瘙痒可以是由于对il-31拮抗剂的预防和/或治疗表现出响应性的特应性皮炎而引起的瘙痒。
[0572]
例如，特应性皮炎可以是中度至重度特应性皮炎，并且可以优选地是局部治疗不够有效或不能耐受，或标准局部治疗不够有效或不能耐受，或标准局部治疗被禁止(出于禁忌症等原因)的中度或重度特应性皮炎。更优选地，特应性皮炎可以是局部治疗不够有效或不能耐受的中度或重度特应性皮炎。
[0573]
对于局部治疗，例如局部类固醇(例如，糖皮质激素或其衍生物，例如泼尼松龙和氢化可的松)和称为免疫抑制剂的局部钙调神经磷酸酶抑制剂(例如，他克莫司和吡美莫司)是已知的。
[0574]
除了局部类固醇和局部钙调神经磷酸酶抑制剂外，例如已知环孢菌素、甲氨蝶呤(mtx)或硫唑嘌呤(aza)或抗组胺药(各种药物称为抗组胺药，大致分为第一代抗组胺药和第二代抗组胺药)作为特应性皮炎的治疗剂。
[0575]
更具体地，没有任何限制，以下治疗方法已知用于治疗特应性皮炎(
″
therapeutic guidelines for atopic dermatitis
″
，furue et al.，the japanese journal of dermatology：119(8)，pp.1515-1534，2009；
″
guidelines of care for the management of atopic dermatitis：section 3.management and treatment with phototherapy and systemic agents.
″
，sidbury r等人，j am acad dermatol.(2014)，pp.327-337)；和saeki h等人，j dermatol2009，36，pp.563-77)。
[0576]
(1)环孢菌素制剂(商品名：neoral)
[0577]
通常，环孢菌素制剂以每天3mg/kg的剂量口服施用至成人，以环孢菌素计算，每天分两次服用。剂量不应超过每天5mg/kg，但会根据症状酌情变化。
[0578]
(2)口服施用类固醇制剂(商品名：泼尼松龙片)
[0579]
通常，类固醇制剂以每天5至60mg的剂量口服施用至成人，以泼尼松龙计算(在片剂的情况下，1至12片；在粉末的情况下，0.5克至6克)，分一次至四次服用。剂量将根据年龄或症状酌情变化。
[0580]
(3)紫外线治疗
[0581]
虽然没有既定的手册或指南，但通常说患者需要每周去医院一次或两次。
[0582]
(4)抗组胺制剂(商品名：allegra)
[0583]
通常，抗组胺剂制剂以单剂量60mg(按盐酸非索非那定计算)口服施用至成人，每天两次。通常，该抗组胺剂制剂以单剂量30mg(按盐酸非索非那定计算)口服施用至7岁或以上且小于12岁的儿童，每天两次，并且以单剂量60mg口服施用至12岁或以上的儿童，以盐酸非索非那定计算，每天两次。剂量将根据症状酌情变化。
[0584]
(5)局部类固醇制剂(商品名：fulmeta)
[0585]
通常，每天一次至数次将适量的局部类固醇制剂应用于患处。用量将根据症状酌情变化。
[0586]
(6)局部类固醇制剂(商品名：locoid)
[0587]
通常，每天一次至数次应用适量的局部类固醇制剂。用量将根据症状酌情变化。
[0588]
(7)他克莫司制剂(商品名：protopic)
[0589]
通常，对成人，每天一次或两次将适量的他克莫司制剂应用于患处。每次应用的用量应直至5克。
[0590]
(8)吡美莫司制剂(商品名：elidel)
[0591]
通常，每天两次应用适量的吡美莫司制剂。用量将根据症状酌情变化。
[0592]
特应性皮炎的严重性(例如，轻度、中度或重度)可以基于本领域技术人员已知的用于对受试者感觉到的皮疹或瘙痒程度进行评分的分类方法进行分类，例如shiratori的严重性标准、下文描述的视觉模拟量表(vas)、瘙痒口头评定量表(vrs)、由欧洲特应性皮炎工作组建立的特应性皮炎评分(scorad)、在美国建立的湿疹面积和严重程度指数(easi)，或例如，静态调查员的全球评估(siga)。
[0593]
例如，vas由100mm的直线组成，受试者(患者)在该直线上通过绘制0到100mm之间的线来指示测量时的瘙痒强度，其中0mm表示没有瘙痒，100mm代表可以想象的最严重的瘙痒。例如，被确定为具有40mm或更高的vas评分的受试者可被识别为患有中度至重度特应性皮炎，并且在一个实施方案中，vas评分可以为45mm或更高，或50mm或更高。同样，在vrs的情况下，例如，分类为“中度瘙痒”水平或更高级别的受试者可能被认为患有中度至重度特应性皮炎(reich等人，2012)。或者，例如，在基于shirator的严重程度标准的白天或夜间的瘙痒程度的评价中，被判定为easi得分为10或更多、siga得分为3或更多、或总得分为4或更多的受试者可被认为患有中度至重度特应性皮炎。或者，其中具有严重炎症的皮疹影响例如5％或更多的体表面积的受试者可被识别为患有中度至重度特应性皮炎。或者，如果合适，其中满足本文提及的那些指标的一个或多个指标的组合的受试者可被认为患有中度至重度特应性皮炎。
[0594]
如本文所用，“受试者”可优选地为动物，更优选地为哺乳动物(小鼠、大鼠、兔、狗、猴(例如食蟹猴)等)，特别优选地为人，但不限于此。人可以是成人(18岁或以上)或儿童(0至小于18岁，例如，6个月至小于18岁)。
[0595]
在一个实施方案中，本公开涉及用于预防和/或治疗特应性皮炎的冻干制剂和溶液制剂，其包含il-31拮抗剂作为活性成分。
[0596]
在这种情况下，使用将在下文详细描述的预定给药间隔和预定剂量(剂量)，il-31拮抗剂可以旨在以相同的给药间隔等量重复施用。
[0597]
在一个实施方案中，本公开的冻干制剂和溶液制剂可用于预防和/或治疗由特应性皮炎引起的瘙痒。
[0598]
在又一个实施方案或另一个实施方案中，本公开的冻干制剂和溶液制剂可用于改善由特应性皮炎引起的睡眠障碍，其中睡眠障碍可能由特应性皮炎引起的瘙痒引起。睡眠障碍的改善可以以例如从入睡到醒来的时间增加和/或入睡潜伏期(从上床睡觉到入睡的时间)减少为特征。
[0599]
在又一个实施方案或另一个实施方案中，本公开的冻干制剂和溶液制剂可用于抑制选自由发红、硬结、丘疹、水肿、表皮剥落和苔藓样变组成的组的由特应性皮炎引起的至少一种症状。
[0600]
在本公开的一个实施方案中，特应性皮炎的预防和/或治疗可以是指但不限于，例如，向目前表现出特应性皮炎或由特应性皮炎引起的各种症状(例如，瘙痒、发红、硬结、丘疹、水肿、表皮剥落、苔藓样变、生活质量下降和睡眠不足)的受试者施用药物等，以抑制这
些症状中的一种或多种，和/或例如向先前已患特应性皮炎或由特应性皮炎引起的各种症状的受试者施用药物等，以消除这些症状中的一种或多种的发展或降低其发生率。只要它改善由特应性皮炎引起的各种症状中的任何一种，即使它不能预防和/或治疗特应性皮炎本身，特应性皮炎的预防和/或治疗就可以被判断或确定对预防和/或治疗有用。
[0601]
可能患有特应性皮炎的受试者可以是过去患有特应性皮炎的受试者，并且可能具有症状复发的风险，或者可以是在医生等做出诊断或确定受试者患有特应性皮炎之前疑似患有特应性皮炎的受试者，但不限于此。
[0602]
在一个实施方案中，在一些情况下，特应性皮炎的预防和治疗可以同义解释。
[0603]
已知本实施例中使用的il-31拮抗剂(cim331)在针对特应性皮炎患者的il-31拮抗剂的单次皮下剂量研究中显示了il-31拮抗剂施用药组睡眠效率的改善(wo 2016/167263)。
[0604]
尽管特应性皮炎不一定是危及生命的严重疾病，但与该疾病相关的症状会显著影响日常生活。特别地，瘙痒(其是最典型的症状)是一种不愉快的感觉，会显著降低患者的生活质量(qol)，并且据报道会阻碍患者的睡眠(zuberbier t，orlow sj，paller as，taieb a，allen r，hernanz-hermosa jm，ocampo-candiani j，cox m，langeraar j，simon jc.patient perspective on the management ofatopic dermatitis.j allergy clin immunol 2006；118：226-32)。此外，当患者是儿童时，不仅对患病儿童而且对父母都有很大的负担，据报道，患有中度或重度特应性皮炎的儿童的父母每天要花费3小时进行治疗，并且每天失去1到2小时的睡眠(su jc，kemp as，varigos ga，nolan tm.atopic eczema：its impact on the family and financial cost.arch dis chil1997；76：159-62)。
[0605]
因此，在另一个实施方案中，本公开涉及用于预防和/或治疗特应性皮炎的冻干制剂和溶液制剂，其包含作为活性成分的il-31拮抗剂，其进一步用于改善由特应性皮炎引起的睡眠障碍。或者，在进一步的实施方案或另一个实施方案中，本公开涉及冻干制剂和溶液制剂，用于改善由特应性皮炎引起的qol降低。睡眠障碍的改善可以以例如从入睡到醒来的时间增加和/或入睡潜伏期(从上床睡觉到入睡的时间)减少为特征。
[0606]
如本文所用，叙述“以相同的给药间隔以等量重复施用”意指本公开的il-31拮抗剂最初施用于受试者的剂量(初始剂量)等于随后施用il-31拮抗剂的连续剂量(即，在施用初始剂量之后连续施用的剂量)，并且以相等的给药间隔(剂量之间的间隔)施用il-31拮抗剂。具体而言，例如，上述说明是指施用初始剂量与施用第一次连续剂量之间的间隔，或施用第n次(n为1以上的整数)连续剂量和施用第(n 1)次连续剂量之间的每次间隔是相等的，并且剂量是相等的。本领域技术人员将理解，对于确定的给药间隔(例如，在给药间隔被确定为每4周的情况下，每4周)，每次给药间隔具有“可耐受范围”，并且本领域技术人员可以酌情决定可耐受的范围。
[0607]
在本发明中，术语“稳定的含抗体制剂”是指其中难以产生来自蛋白质例如抗体的聚集体和/或具有电荷异质性的成分的制剂，即其中劣化反应(deterioration reaction)难以在制剂中出现的制剂，其中劣化反应包括不溶性聚集体、可溶性聚集体、具有电荷异质性的成分的产生。
[0608]“具有电荷异质性的成分”是指由于脱酰胺、氧化、水解等而具有与主要成分不同的蛋白质表面电荷的成分。
[0609]
聚集体的量可以通过尺寸排阻色谱(sec)、sds聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)、毛细管sds凝胶电泳(ce-sds)、动态光散射(dls)、遮光自动微粒计数器(hiac)、流动成像、分析超速离心机(auc)等测量，并且在本发明中优选通过尺寸排阻色谱法(sec)测量。认为作为测量条件，使用色谱柱(tosoh，tskgel g3000swxl)，使用50mmol/l磷酸盐缓冲液(ph 7.0)、300mmol/l氯化钠、0.05％叠氮化钠作为流动相，流速为0.5ml/min测量样品，但条件不限于此。在一个实施方案中，通过本文实施例中描述的方法测量聚集体的量。
[0610]
具有电荷异质性的成分可以通过离子交换色谱法(iec)，具体而言阳离子交换色谱法或阴离子交换色谱、等电聚焦等进行测量，在本发明中，优选地通过阴离子交换色谱法进行测量。样品中具有电荷异质性的成分的量可以通过离子交换色谱(iec)使用色谱柱(tosoh，tskgel deae-npr)，使用25mmol/l tris-hcl缓冲液(ph 7.5)作为流动相a和25mmol/l tris-hcl缓冲液(ph 7.5)，250mmol/l氯化钠作为流动相b，流速为1.0ml/min进行测量，但方法不限于此。在一个实施方案中，具有电荷异质性的成分通过本文实施例中描述的方法测量。
[0611]
在本发明中，“多肽”一般是指长度约为10个氨基酸或更长的肽和蛋白质。通常，它们是生物来源的多肽，但不特别限于此，例如可以是包含人工设计的序列的多肽。此外，它们可以是任何天然存在的多肽、合成多肽、重组多肽等。此外，上述多肽的片段也包括在本发明的多肽中。
[0612]
术语“抗体”以最广义使用，包括单克隆抗体、多克隆抗体、二聚体、多聚体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)、抗体衍生物和修饰抗体(miller k等人j immunol.2003，170(9)，4854-61)，只要它们显示出所需的生物活性即可。抗体可以是小鼠抗体、人抗体、人源化抗体、嵌合抗体或来自另一种物种的抗体，或人工合成的抗体。本文公开的抗体可以是免疫球蛋白分子的任何类型(例如，igg、ige、igm、igd和iga)、类别(例如，igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2)或业类。免疫球蛋白可以来源于任何物种(例如，人、小鼠或兔)。术语“抗体”、“免疫的球蛋白”和“免疫球蛋白”在广义上可互换使用。
[0613]
通过使用基因工程技术产生的重组抗体可以用作抗体。重组抗体可以通过以下获得：从杂交瘤或产生抗体的细胞如产生抗体的致敏淋巴细胞中克隆编码抗体的dna；将其插入载体中；然后将其引入宿主(宿主细胞)以产生抗体。
[0614]
本发明的抗体可以通过本领域技术人员已知的方法产生。具体而言，将编码目标抗体的dna插入表达载体中。进行插入到表达载体中使得表达将在表达调节区如增强子和启动子的控制下进行。接下来，使用该表达载体转化宿主细胞以表达抗体。在这种情况下，可以使用宿主和表达载体的适当组合。
[0615]
如此获得的本发明的抗体可以从宿主细胞内部或细胞外部(培养基等)中分离，并纯化为基本上纯的、均质的抗体。可以通过通常用于分离和纯化抗体的方法来分离和纯化抗体，并且这些方法不受任何限制。例如，通过适当地选择和组合柱层析、过滤、超滤、盐析、溶剂沉淀、溶剂萃取、蒸馏、免疫沉淀、sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳、等电聚焦、透析、重结晶等分离和纯化抗体。
[0616]
本发明人通过热加速试验研究了各种添加剂的效果，以评估含有上述抗il-31ra抗体(cim331)的样品在储存期间的稳定性。结果，本发明人发现，通过从添加了精氨酸盐酸盐和蔗糖或海藻糖的溶液制备冻干制剂，与当它们不包含稳定剂或填充剂(填料)时，当添
加氯化钠作为稳定剂，或当添加其他糖作为填充剂时相比，聚集体形成被抑制。本发明人还发现，在显微镜下才能看到的(subvisible)颗粒形成和聚集体形成通过将作为非离子表面活性剂的泊洛沙姆188和/或聚山梨醇酯20添加到含抗体溶液中而被抑制。此外，本发明人发现在包含精氨酸盐酸盐、蔗糖或海藻糖和非离子表面活性剂的含抗体溶液中，聚集体形成和具有电荷异质性的成分在ph 6至ph 8时受到抑制。
[0617]
本发明制剂中精氨酸的浓度(量)优选地为45mm至150mm。精氨酸浓度(量)的实例包括45mm、75mm、92mm、102mm和150mm。
[0618]
本发明的制剂的溶液ph优选地为6至8，更优选地为6.5至7.5，甚至更优选地为7。
[0619]
本发明的制剂可以包含作为缓冲剂的，例如tris缓冲液。tris缓冲液包括例如三(羟甲基)氨基甲烷和/或其盐，例如三(羟甲基)氨基甲烷-盐酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-天冬氨酸盐、三(羟甲基)氨基甲烷-谷氨酸盐或三(羟甲基)氨基甲烷-乙酸盐。添加到本发明的制剂中的tris缓冲液的量优选地为6mm至20mm，例如，6mm、10mm、12.3mm、13.6mm或20mm。
[0620]
本发明的制剂中包含的表面活性剂例如是聚山梨醇酯20(ps20)和pluronic f-68(泊洛沙姆188：聚氧乙烯(160)聚氧丙烯(30)二醇)，特别优选地泊洛沙姆188。添加到本发明的制剂中的泊洛沙姆188(或px188)的量优选地为0.15mg/ml至0.5mg/ml。添加到制剂中的泊洛沙姆188的量的实例包括0.15mg/ml、0.25mg/ml、0.31mg/ml、0.34mg/ml和0.50mg/ml。
[0621]
本发明的制剂还可以含有糖。本发明中使用的优选糖是蔗糖、海藻糖、甘露醇和乳糖，特别优选蔗糖和海藻糖。
[0622]
添加到本发明的制剂中的糖的量通常为1mm至1000mm，优选地5mm至500mm，更优选地10mm至300mm，例如75mm至250mm，和例如75mm、125mm、154mm、170mm或250mm。
[0623]
如果需要，本发明的制剂可以另外含有合适的冷冻保护剂、悬浮剂、增溶剂、张力剂、防腐剂、吸附抑制剂、稀释剂、赋形剂、ph调节剂、镇痛剂、含硫还原剂、抗氧化剂等。
[0624]
冷冻保护剂包括例如糖，例如海藻糖、蔗糖和山梨糖醇。
[0625]
增溶剂包括例如聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚山梨醇酯80、烟酰胺、聚氧乙烯脱水山梨糖醇单月桂酸酯、聚乙二醇和蓖麻油脂肪酸乙酯。
[0626]
张力剂包括例如氯化钠、氯化钾和氯化钙。
[0627]
防腐剂包括例如羟基对苯甲酸甲酯、羟基对苯甲酸乙酯、山梨酸、苯酚、甲酚和氯甲酚。
[0628]
吸附抑制剂包括例如人血清白蛋白、卵磷脂、葡聚糖、环氧乙烷/环氧丙烷共聚物、羟丙基纤维素、甲基纤维索、聚氧乙烯硬化蓖麻油和聚乙二醇。
[0629]
含硫还原剂包括，例如，含有巯基的那些，例如n-乙酰半胱氨酸、n-乙酰高半胱氨酸、硫辛酸、硫二甘醇、硫代乙醇胺、硫代甘油、硫代山梨醇、硫代乙醇酸及其盐、硫代硫酸钠、谷胱甘肽和具有一至七个碳原子的硫代链烷酸。
[0630]
抗氧化剂包括例如异抗坏血酸、二丁基羟基甲苯、丁基羟基茴香醚、a-生育酚、乙酸生育酚、l-抗坏血酸及其盐、l-抗坏血酸棕榈酸酯、l-抗坏血酸硬脂酸酯、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、没食子酸三戊酯、没食子酸丙酯和螯合剂，例如乙二胺四乙酸二钠(edta)、焦磷酸钠和偏磷酸钠。
[0631]
本发明的含抗体制剂可以通过任何合适的途径施用于患者，例如通过快速推注或
连续输注一段时间、静脉内、肌内或皮下。优选静脉内施用或皮下施用。
[0632]
nemolizumab(cim331)的剂量为例如0.001mg/kg至1000mg/kg，给药间隔为至少一天或更长。
[0633]
更具体地，例如，nemolizumab(cim331)以0.1mg至1000mg/主体/2周、0.1mg至1000mg/主体/4周，或0.1mg至1000mg/主体/8周，或0.01mg至10mg/kg/2周，0.01mg至10mg/kg/4周，或0.01mg至10mg/kg/8周，优选地0.5mg/kg/4周，或50mg至75mg/主体/4周等量地和以相同给药间隔重复施用于患有特应性皮炎或处于患特应性皮炎风险的受试者。或者，nemolizumab(cim331)以60mg/主体/4周以相同剂量和相同给药间隔重复施用。或者，nemolizumab(cim331)以4周的给药间隔施用，并以60mg/主体作为初始剂量和30mg/主体作为连续剂量重复施用。本领域技术人员将将理解，当包含一剂量nemolizumab(cim331)的冻干制剂被封装在容器(小瓶、药筒或注射器)中时，考虑到施用时重构的药物溶液的损失，过量的冻干制剂会填充以确保从一个容器(小瓶、药筒或注射器)中足以施用一剂nemolizumab(cim331)的量。
[0634]
本发明的另一个实施方案是稳定含抗体制剂中的抗体的方法。例如，该实施方案是用于稳定含抗体溶液制剂中的抗体的方法，该方法包括向溶液中加入精氨酸和/或其盐，以及蔗糖和/或海藻糖。此外，例如，该实施方案是用于稳定含抗体冻干制剂中的抗体的方法，该方法包括通过冷冻干燥包含精氨酸和/或其盐、和蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0635]
此外，本发明的另一个实施方案是用于抑制含抗体制剂中抗体聚集(聚集体形成)的方法。例如，该实施方案是用于抑制含抗体溶液制剂中抗体聚集(聚集体形成)的方法，该方法包括将精氨酸和/或其盐、以及蔗糖和/或海藻糖添加到溶液中。此外，例如，该实施方案是用于抑制含抗体冻干制剂中的抗体聚集(聚集体形成)的方法，该方法包括通过冷冻干燥包含精氨酸和/或其盐，以及蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0636]
本发明的另一个实施方案是用于减少含抗体制剂中具有电荷异质性的成分的方法。例如，该实施方案是用于减少含抗体溶液制剂中具有电荷异质性的成分的方法，该方法包括向溶液中添加精氨酸和/或其盐，以及蔗糖和/或海藻糖。此外，例如，该实施方案是用于减少含抗体冻干制剂中具有电荷异质性的成分的方法，该方法包括通过冷冻干燥包含精氨酸和/或其盐、和蔗糖和/或海藻糖的含抗体溶液来制备含抗体冻干制剂。
[0637]
此外，在上述的用于稳定抗体的方法、用于抑制抗体聚集(聚集体形成)的方法、用于减少具有电荷异质性的成分的方法中，溶液中的精氨酸盐酸盐(arg-hcl)的浓度优选地为45mmol/l至150mmol/l，溶液中蔗糖或海藻糖的浓度优选地为75mmol/l至250mmol/l。
[0638]
在上述的用于稳定抗体的方法、用于抑制抗体聚集(聚集体形成)的方法、用于减少具有电荷异质性的成分的方法中，优选地抗体为nemolizumab(cim331)。
[0639]
如本文所用，表述“包括”所指的方面包括表述“基本上由
……
组成”所指的那些方面，以及“由
……
组成”所指的那些方面。
[0640]
这里列举的数值可以在一定范围内变化，例如，取决于本领域技术人员使用的仪器或设备、测量条件和程序，只要它们在允许实现本发明目的的范围内即可，例如，它们可能包含大约10％的偏差。
[0641]
本文明确引用的所有专利和参考文献通过引用整体纳入本说明书中。
[0642]
本发明将通过以下实施例进一步说明，但不应解释为限于此。
[0643]
实施例
[0644]
定义
[0645]
[实验方法]
[0646]
为了调节ph值，每个实施例中制备的制剂包含6mmol/l至20mmol/l tris-hcl，这对cim331(一种抗il-31ra抗体，其包含seq id no：9的h链和seq id no：10的l链)的稳定性没有贡献。
[0647]
溶液制剂的热加速研究在40℃/75％rh下进行。同时，由于冻干制剂通常更稳定，冻干制剂的热加速研究在更高的温度下进行，50℃75％rh。
[0648]
在实施例3中，为了验证非离子表面活性剂的效果，进行了振动研究。
[0649]
[分析方法]
[0650]
关于cim331聚集体的量的测量，考虑到分析方法的准确性，当聚集体的百分比有0.07％或更高的差异时，可以判断存在显著差异。
[0651]
关于cim331的具有电荷异质性的成分的测量，考虑到分析方法的准确度，当碱性区域的差异为1.3％或更高、主区域的差异为1.4％或更高、酸性区域为0.6％或更高时，可以判断为存在显著差异。
[0652]
由于溶液制剂和冻干制剂之间的稳定性不同，因此分析方法的结果不能在溶液制剂和冻干制剂之间进行类似的解释。
[0653]
[实施例1]在热加速储存过程中，精氨酸对人源化igg2抗体cim331的聚集体抑制作用
[0654]
[1-1]冻干制剂的稳定性评估
[0655]
(1)材料
[0656]
cim331是一种与il-31ra结合的单克隆抗体，是一种人源化igg2抗体，通过抑制被鉴定为瘙痒诱导细胞因子的il-31的功能，有望治疗特应性皮炎等。
[0657]
(2)测试样品
[0658]
制备包括30mg/ml cim331、6mmol/l tris-hcl、75mmol/l蔗糖、0.15mg/ml泊洛沙姆188，以及45mmol/larg-hcl或45mmol/lnacl 中的一种作为稳定剂的各种制备的溶液和不含稳定剂的制备的溶液并填充到玻璃小瓶中(2ml/小瓶)。填充的药物溶液在如下所示的条件下被冻干。
[0659][0660]
如此制备的含有人源化抗体的冻干制剂在50℃/75％rh培养箱中静置8周后，使用通过添加超纯水使得cim331浓度变为100mg/ml的制备的重构溶液作为测试样品。
[0661]
(3)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法
[0662]
使用色谱柱(tosoh、tskgei g3000swxl)和50mmol/l磷酸盐缓冲液(ph 7.0)、300mmol/l氯化钠，0.05％叠氮化钠作为流动相，通过尺寸排阻色谱(sec)以0.5ml/min的流速测量样品的聚集体的量。
[0663]
在检测到的峰中，将显示最大面积和高度的峰定义为单体主体，将在单体主体之前检测到的峰统称为聚集体(hmws)。
[0664]
对于所有峰，计算面积并根据以下等式确定目标峰的峰面积比。
[0665][0666]
(4)结果
[0667]
所得结果在表1示出。
[0668]
[表1]
[0669][0670]
*：根据未添加稳定剂时的hmws增加量和添加各稳定剂时的hmws增加量，计算与未添加稳定剂时相比的相对增加率。
[0671]
如表1所示，在50℃/75％rh热加速8周后，与未添加稳定剂的样品和添加氯化钠的样品相比，添加了精氨酸盐酸盐的样品显示出高聚集体抑制效果。
[0672]
[1-2]溶液制剂的稳定性评估
[0673]
(1)材料
[0674]
使用[1-1]中描述的抗体。
[0675]
(2)测试样品
[0676]
制备包括100mg/ml cim331、20mmol/l tris-hcl、250mmol/l蔗糖、0.5mg/ml泊洛沙姆188，ph 7，以及150mmol/l arg-hcl或150mmol/l nacl中的一种作为稳定剂的各种制备的溶液和不含稳定剂的制备的溶液并填充到玻璃小瓶中(1ml/小瓶)。如此制备的含有人源化抗体的溶液制剂在40℃/75％rh的培养箱中放置4周后，将它们用作测试样品。
[0677]
(3)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法这些方法根据[1-1]中描述的方法进行。
[0678]
(4)结果
[0679]
所得结果在表2示出。
[0680]
[表2]
[0681][0682]
*：根据未添加稳定剂时的hmws增加量和添加各稳定剂时的hmws增加量，计算与未添加稳定剂时相比的相对增加率。
[0683]
如表2所示，在40℃/75％rh热加速4周后，与未添加稳定剂的样品和添加氯化钠的样品相比，添加了精氨酸盐酸盐的样品显示出高聚集体抑制效果。
[0684]
[实施例2]在热加速储存过程中，蔗糖和海藻糖对人源化igg2抗体cim331的聚集体抑制作用
[0685]
(1)材料
[0686]
使用实施例1中描述的抗体。
[0687]
(2)测试样品
[0688]
制备包括30mg/ml cim331、6mmol/l tris-hcl、45mmol/l arg-hcl、0.15mg/ml泊洛沙姆188，以及75mmol/l蔗糖、75mmol/l甘露醇、75mmol/l葡萄糖、75mmol/l乳糖或75mmol/l海藻糖中的任一种作为填充剂的各种制备的溶液和不含填充剂的制备的溶液，并填充到玻璃小瓶中(2ml/小瓶)。填充的药物溶液在如下所示的条件下被冻干。
[0689][0690]
如此制备的含有人源化抗体的冻干制剂在50℃/75％rh培养箱中静置8周后，使用通过添加超纯水使得cim331浓度变为100mg/ml的制备的重构溶液作为测试样品。
[0691]
(3)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法这些方法根据实施例1中描述的方法进行。
[0692]
(4)结果
[0693]
所得结果在表3示出。
[0694]
[表3]
[0695][0696]
*：根据未添加填充剂时的hmws增加量和添加各填充剂时的hmws增加量，计算与未添加填充剂时相比的相对增加率。
[0697]
从表3可以看出，在50℃/75％rh热加速8周后，与未添加填充剂的样品和添加其他填充剂的样品相比，添加蔗糖或海藻糖的样品均显示出10％范围的相对增加率，并且显示出高的聚集体抑制效果。
[0698]
[实施例3]在振动应激测试过程中，非离子表面活性剂对人源化igg2抗体cim331的显微镜下才能看到的颗粒形成抑制效果和溶液状态稳定效果
[0699]
(1)材料
[0700]
使用实施例1中描述的抗体。
[0701]
(2)测试样品
[0702]
制备包括100mg/ml cim331，20mmol/l tris-hcl，ph 7，150mmol/l arg-hcl，250mmol/l蔗糖，以及0.5mg/ml泊洛沙姆188或0.5mg/ml聚山梨醇酯20中的任一种作为非离子表面活性剂的各种制备的溶液和不含非离子表面活性剂的制备的溶液，并填充到玻璃小瓶中(1ml/小瓶)。如此制备的含有人源化抗体的溶液制剂在室温下以约200rpm的速度振动三天后，将它们用作测试样品。
[0703]
(3)在显微镜下才能看到的颗粒的测量方法
[0704]
使用液体颗粒计数器(hach ultraanalytics，9703型)对在显微镜下才能看到的颗粒数进行计数。
[0705]
(4)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法这些方法根据实施例1中描述的方法进行。
[0706]
(5)结果
[0707]
所得结果在表4和表5示出。
[0708]
[表4]
[0709][0710]
[表5]
[0711][0712]
*：根据未添加非离子表面活性剂时的hmws增加量和添加各非离子表面活性剂时的hmws增加量，计算与未添加非离子表面活性剂时相比的相对增加率。
[0713]
从表4和表5可以明显看出，含有泊洛沙姆188或聚山梨醇酯20(其是非离子表面活性剂)的样品在室温下以大约200rpm的速度振动3天后，在样品中显示出高的显微镜下才能看到的颗粒形成抑制效果和高聚集体抑制效果。
[0714]
[实施例4]在热加速储存过程中，ph对人源化igg2抗体cim331稳定性的影响
[0715]
(1)材料
[0716]
使用实施例1中描述的抗体。
[0717]
(2)测试样品
[0718]
制备包括100mg/ml cim331、20mmol/l tris-hcl、150mmol/l arg-hcl、250mmol/l蔗糖和0.5mg/ml泊洛沙姆188，其中ph为ph 6、ph 7或ph 8中的任一种的各种制备的溶液，并装入玻璃小瓶(1ml/小瓶)中。如此制备的含有人源化抗体的溶液制剂在40℃/75％rh的
培养箱中静置4周后，将它们用作测试样品。
[0719]
(3)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法这些方法根据实施例1中描述的方法进行。
[0720]
(4)cim331的具有电荷异质性的成分的测量和计算方法
[0721]
使用色谱柱(tosoh，tskgel deae-npr)和25mmol/l tris-hcl缓冲液(ph 7.5)作为流动相a和25mmol/l tris-hcl缓冲液(ph 7.5)，250mmol/l氯化钠作为流动相b，通过离子交换色谱法(iec)以1.0ml/min的流速测量样品中具有电荷异质性的成分的量。
[0722]
在检测到的峰中，显示最大面积和高度的峰定义为主要区域，在主要区域之前检测到的峰统称为碱性区域，在主要区域之后检测到的峰统称为酸性区域。
[0723]
对于所有峰，计算面积，并根据以下等式确定目标峰的峰面积比。
[0724][0725]
(5)结果
[0726]
所得结果在表6示出。
[0727]
[表6]
[0728][0729]
由表6可知，ph 6至ph 8的样品在40℃/75％rh热加速4周后表现出足够的稳定性，特别是在ph 7的样品中，实现了高聚集体抑制效果和抑制具有电荷异质性的成分的效果。
[0730]
[实施例5]在热加速储存过程中，人源化igg2抗体cim331浓度及其他制剂成分浓度对稳定性的影响
[0731]
(1)材料
[0732]
使用实施例1中描述的抗体。
[0733]
(2)测试样品
[0734]
制备包括100mg/ml或50mg/ml cim331，20mmol/l或10mmol/l tris-hcl，150mmol/l或75mmol/l arg-hcl作为稳定剂，250mmol/l或125mmol/l蔗糖作为填充剂，和0.5mg/ml或0.25mg/ml泊洛沙姆188作为非离子表面活性剂的各种制备的溶液，和包括6mmol/l tris-hcl，45mmol/l arg-hcl，75mmol/l蔗糖，0.15mg/ml泊洛沙姆188和30mg/ml、15mg/ml或6mg/ml cim331的制备的溶液，并装入玻璃小瓶(2ml/小瓶)中。填充的药物溶液在如下所示的条件下被冻干。
[0735][0736]
如此制备的含有人源化抗体的冻干制剂在50℃/75％rh培养箱中静置8周后，使用通过添加超纯水使得cim331浓度如下所示的制备的重构溶液作为测试样品。
[0737][0738]
(3)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法这些方法根据实施例1中描述的方法进行。
[0739]
(4)cim331的具有电荷异质性的成分的测量和计算方法
[0740]
这些方法根据实施例4中描述的方法进行。
[0741]
(5)结果
[0742]
所得结果在表7示出。
[0743]
[表7]
[0744][0745]
从表7中可以明显看出，在50℃/75％rh热加速8周后，包含每种成分的测试浓度的样品(即包含6mg/ml至100mg/ml cim331、6mmol/l至20mmol/l tris-hcl、45mmol/l至150mmol/l arg-hcl、75mmol/l至250mmol/l蔗糖和0.15mg/ml至0.5mg/ml泊洛沙姆188的样品)具有足够的稳定性。关于hmws，当抗体以外的制剂成分浓度相同时，含有较低浓度抗体的样品表现出更优异的稳定性。
[0746]
[实施例6]在热加速储存过程中，精氨酸在抑制人源化igg2抗体cim331的聚集体和具有电荷异质性的成分中的效果
[0747]
[6-1]冻干制剂的稳定性评估
[0748]
(1)材料
[0749]
使用实施例1中描述的抗体。
[0750]
(2)测试样品
[0751]
制备包含30mg/ml cim331，6mmol/l tris-hcl，ph7，75mmol/l蔗糖，0.15mg/ml泊洛沙姆188，以及45mmol/l arg-hcl，45mmol/l组氨酸，45mmol/l赖氨酸-hcl和45mmol/l甘氨酸中的任何一种作为稳定剂的各种制备的溶液，并装入玻璃小瓶(2ml/小瓶)中。在以下所示的条件下将填充的药物溶液冻干。
[0752][0753]
如此制备的含有人源化抗体的冻干制剂在50℃/75％rh培养箱中静置8周后，使用通过添加超纯水使得cim331浓度变为100mg/ml的制备的重构溶液作为测试样品。
[0754]
(3)cim331聚集体的量的测量方法及cim331聚集体的量的计算方法这些方法根据实施例1中描述的方法进行。
[0755]
(4)cim331的具有电荷异质性的成分的测量和计算方法这些方法根据实施例4中描述的方法进行。
[0756]
(5)结果
[0757]
所得结果在表8示出。
[0758]
[表8]
[0759][0760]
由表8可知，在50℃/75％rh热加速8周后，与添加了组氨酸、赖氨酸盐酸盐、或甘氨酸的样品相比，添加了精氨酸盐酸盐的样品显示了最高的聚集体抑制效果和抑制具有电荷异质性的成分的效果。
[0761]
[6-2]溶液制剂的稳定性评估
[0762]
(1)材料
[0763]
使用实施例1中描述的抗体。
[0764]
(2)测试样品
[0765]
制备包含100mg/ml cim331，20mmol/l tris-hcl，ph7，250mmol/l蔗糖，0.50mg/ml泊洛沙姆188，和150mmol/l arg-hcl，150mmol/l组氨酸，150mmol/l赖氨酸-hcl和150mmol/l甘氨酸中的任何一种作为稳定剂的各种制备的溶液，并装入玻璃小瓶(1ml/小瓶)中。如此制备的含有人源化抗体的溶液制剂在40℃/75％rh的培养箱中放置4周后，将它们用作测试
样品。
[0766]
(3)cim331的具有电荷异质性的成分的测量和计算方法这些方法根据实施例4中描述的方法进行。
[0767]
(4)结果
[0768]
所得结果在表9示出。
[0769]
[表9]
[0770][0771]
由表9可知，在40℃/75％rh热加速4周后，与添加了组氨酸、赖氨酸盐酸盐、或甘氨酸的样品相比，添加了精氨酸盐酸盐的样品显示了最高的抑制具有电荷异质性的成分的效果。
[0772]
工业实用性
[0773]
本发明的制剂是在冻干状态和溶液状态下均具有优异稳定性的制剂，其特征在于，在溶液状态下保存后以及在冻干状态下保存并用水重构后，蛋白质如抗体分子的聚集体形成受到抑制。本发明的制剂本身难以发生劣化反应，可用于例如通过皮下施用治疗特应性皮炎等。