一种糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型的构建方法

本发明属于医疗评价、检测，具体涉及一种糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型的构建方法。

背景技术：

1、糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease，dkd)是一种由糖尿病(dm)引起的慢性肾脏病(chronic kidney disease，ckd)，发病机制复杂，临床特征为持续性白蛋白尿排泄增加，和(或)肾小球滤过率(glomerular filtration rate，gfr)进行性下降，最终发展为终末期肾脏疾病(end-stage renal disease，esrd)。

2、高血糖被认为是dkd进展的主要潜在致病因素。然而，多项大规模研究表明：强化血糖控制对dkd肾脏终点的影响不大，且增加降血糖药物的使用和更好的血糖控制并没有降低dkd的患病率，相反能够导致dkd疾病进展的恶化。因此，研究除高血糖外的发病机制和治疗药物，对于dkd防治既具有重要的现实意义，又是临床的迫切需求。

3、中国发明专利申请cn114766426a公开了一种糖尿病动物模型制备方法及应用，所述糖尿病动物模型制备方法包括s1.对选取对象称重、测量并记录选取对象的空腹血糖以及空腹胰岛素值；s2.根据动物的空腹血糖及体重计算所需补充的链脲佐菌素计量；s3.在内镜超声引导下向动物的胰腺注射步骤s2得到的链脲佐菌素计量；s4.复测选取对象的空腹血糖以及空腹胰岛素值至符合糖尿病指标得到糖尿病动物模型。该发明提供的糖尿病动物模型制备方法操作步骤简单、易于操作、制备成本低且重复性强，可以快速成模，极大的缩短了糖尿病动物模型制备时间。

4、脂质代谢紊乱是糖尿病的一个主要病理特征，而过度的脂质代谢失调也能够导致特定靶器官功能障碍，如肾脏。新近研究发现，肾脏脂质积累是dkd发病的一个关键触发因素。肾脏过度的脂质沉积，能够损伤肾小球、肾小管细胞和足细胞，导致肾小球硬化、肾小球滤过率降低、肾小球基底膜增厚和足细胞丢失，最终导致肾脏功能障碍，诱导尿蛋白的增加。因此，破译导致肾脏脂质过度储存的分子机制及减少肾脏脂毒性的机制是防治dkd新策略。但目前缺乏统一且特异的糖尿病肾脏脂质损伤疾病动物模型。

技术实现思路

1、针对现有技术存在缺乏统一且特异的糖尿病肾脏脂质损伤疾病动物模型的不足，本发明提供一种糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型的构建方法。本发明的糖尿病肾脏脂质损伤动物模型制备方法操作步骤简单、易于操作、制备成本低且重复性强，提高了糖尿病肾脏脂质损伤动物模型制备的均一性。

2、为达到上述目的，本发明采用了以下技术方案：

3、一种糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型的构建方法，包括以下步骤：取实验动物，高脂饲料喂养4周后，连续4-6天喂食普通饲料，且腹腔注射链脲佐菌素，每只动物每天注射链脲佐菌素的计量为35-45mg/kg，然后以高脂饲料喂养11-13周，即得到糖尿病肾脏脂质损伤的疾病动物。

4、优选地，所述实验动物为tff3-/-动物，动物包括小鼠、大鼠、比格犬、恒河猴、猪、牛。

5、优选地，所述tff3-/-动物为自发性肠道损伤合并脂代谢紊乱的动物。

6、进一步优选地，所述tff3-/-动物为tff3-/-小鼠。

7、再一步优选地，所述构建方法包括以下步骤：取tff3-/-小鼠，高脂饲料喂养4周后，连续5天喂食普通饲料，且腹腔注射链脲佐菌素，每只小鼠每天注射链脲佐菌素的计量为40mg/kg，然后以高脂饲料继续喂养12周，即得到糖尿病肾脏脂质损伤的疾病小鼠。

8、优选地，所述高脂饲料喂养采用自由取食方式。

9、优选地，所述高脂饲料喂养期间，tff3-/-小鼠按需自由饮水。

10、优选地，高脂饲料为脂肪供能比≥60％的高脂饲料。

11、进一步优选地，所述高脂饲料的品牌为dyets，货号为hf60。

12、本发明还涉及上述构建方法构建得到的糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型在筛选治疗糖尿病肾脏疾病药物中的应用。

13、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

14、(1)本发明中的疾病动物模型为链脲佐菌素联合高脂饮食联合诱导的tff3-/-小鼠，该tff3-/-小鼠具有特征性的肾脏脂质沉积，并在药物和饮食诱导下具有更显著的肾脏脂质损伤，可为研究肾脏脂毒性的研究者提供一种较为快速成膜的疾病动物模型。

15、(2)本发明构建的模型快速成模，肾脏脂质损伤突出，重复性好，操作简单易行。

技术特征：

1.一种糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：取实验动物，高脂饲料喂养3-5周后，连续4-6天喂食普通饲料，且腹腔注射链脲佐菌素，每只动物每天注射链脲佐菌素的计量为35-45mg/kg，然后以高脂饲料喂养11-13周，即得到糖尿病肾脏脂质损伤的疾病动物。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述实验动物为tff3-/-动物。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述tff3-/-动物为自发性肠道损伤合并脂代谢紊乱的动物。

4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述tff3-/-动物为tff3-/-小鼠。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：取tff3-/-小鼠，高脂饲料喂养4周后，连续5天喂食普通饲料，且腹腔注射链脲佐菌素，每只小鼠每天注射链脲佐菌素的计量为40mg/kg，然后以高脂饲料喂养12周，即得到糖尿病肾脏脂质损伤的疾病小鼠。

6.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高脂饲料喂养采用自由取食方式。

7.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高脂饲料喂养期间，tff3-/-小鼠按需自由饮水。

8.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述高脂饲料为脂肪供能比≥60％的高脂饲料。

9.一种权利要求1-8任一项所述的构建方法构建得到的糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型在筛选治疗糖尿病肾脏疾病药物中的应用。

技术总结本发明属于医疗评价、检测技术领域，具体涉及一种糖尿病合并肾脏脂质损伤动物模型的构建方法。所述构建方法包括以下步骤：取实验动物，高脂饲料喂养3‑5周后，连续4‑6天喂食普通饲料，且腹腔注射链脲佐菌素，每只动物每天注射链脲佐菌素的计量为35‑45mg/Kg，然后以高脂饲料喂养11‑13周，即得到糖尿病肾脏脂质损伤的疾病动物。该糖尿病肾脏脂质损伤疾病动物模型的重复性高、肾脏脂质损伤突出、操作简单易行，在基础研究方面有重要的价值与意义。技术研发人员：杨祎琦受保护的技术使用者：广东药科大学技术研发日：技术公布日：2024/6/13