Turicibactersanguinis菌株的应用

本发明涉及微生态制剂，具体涉及一种turicibacter sanguinis菌株的应用。

背景技术：

1、初级胆汁酸是胆固醇在肝脏中合成的可溶性代谢产物，在人体内主要由胆酸和鹅去氧胆酸组成，在啮齿动物体内主要由胆酸、鹅去氧胆酸、α-鼠胆酸、β-鼠胆酸和熊去氧胆酸组成。次级胆汁酸是初级胆汁酸排入肠道后微生物去结合、脱氢、脱羟基、异构化的代谢产物，主要由去氧胆酸、石胆酸、3-脱氢胆酸和7-脱氢胆酸等组成。进食后，储存在胆囊中的胆汁酸被释放到十二指肠以促进营养物质的消化吸收，约95％的胆汁酸在远端回肠被重吸收，并通过门静脉循环返回肝脏，完成胆汁酸的肠肝循环。未被吸收的初级胆汁酸在肠道微生物的作用下去结合并转化为次级胆汁酸。

2、胆汁酸在宿主代谢中发挥着重要的作用，主要包括以下几个方面：

3、(1)胆汁酸的两亲性结构使其具有去污特性，促进食物中脂质和脂溶性维生素a、d、e、k的吸收；

4、(2)肝脏中胆汁酸的形成是胆固醇排泄的主要途径，在维持全身固醇平衡中发挥着重要的作用；

5、(3)胆汁酸的抑菌作用可以维持胆道的无菌状态和肠道微生物区系的平衡；

6、(4)胆汁酸通过调控fxr、lxr、pxr、vdr等核受体和g蛋白偶联受体调控宿主体内多种代谢通路。

7、初级胆汁酸在肠道微生物的作用下会代谢为50多种化学性质不同的次级胆汁酸，导致其多样性增加。研究表明，不同的次级胆汁酸在调控宿主代谢的过程中发挥着不同的作用。去氧胆酸和石胆酸能导致dna损伤、氧化应激、膜受损和结肠癌的发生，是大肠癌中最普遍的胆汁酸。熊去氧胆酸能抑制tnfα、il-1β和il-6等促炎因子的释放，溶解胆结石，抵抗去氧胆酸引发的细胞凋亡。熊去氧胆酸制剂ursodiol被用于治疗胆囊结石、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎和妊娠期胆汁淤积症。

8、因此，需要探究特定菌株是否能定植到肠道中，去结合初级胆汁酸并将其代谢为不同的次级胆汁酸。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种turicibacter sanguinis菌株的应用，本发明的turicibacter sanguinis菌株在调控小鼠肠肝循环中的胆汁酸代谢的应用。次级胆汁酸是肠道微生物的重要代谢产物，本发明通过添加微生态制剂来调控小鼠肠肝循环中的胆汁酸代谢，效果显著。

2、为实现上述目的，本发明所设计的技术方案如下：

3、本发明提供了一种turicibacter sanguinis菌株在调控小鼠肠肝循环中的胆汁酸代谢的应用。

4、本发明提供了一种将初级胆汁酸去结合并代谢为次级胆汁酸的微生态制剂，所述微生态制剂中含有turicibacter sanguinis菌株，菌株购于德国微生物菌种保藏中心(dsmz)；所述微生态制剂中，turicibacter sanguinis菌株的活菌数量为106～1010个/毫升。

5、其购买的德国微生物菌种保藏中心(dsmz)网站：https://www.dsmz.de/collection/catalogue/details/culture/dsm-14220。

6、进一步地，所述微生态制剂中，turicibacter sanguinis菌株的活菌数量为108～109个/毫升。

7、本发明还提供了一种上述的微生态制剂的制备方法，该方法是将turicibactersanguinis菌株接种到dsmz110碎肉碳水化合物培养基中，置于厌氧培养箱中培养新鲜菌液，即为微生态制剂，turicibacter sanguinis菌株的活菌数量为106～1010个/毫升。

8、进一步地，所述turicibacter sanguinis菌株的接种量为1％。

9、再进一步地，所述厌氧培养的气体环境为：90％ n2，5％ co2，5％h2；培养温度为37℃。

10、再进一步地，所述微生态制剂中，turicibacter sanguinis菌株的活菌数量为108～109个/毫升。

11、本发明还提供了一种上述的微生态制剂在调控小鼠肠肝循环中胆汁酸代谢、将初级胆汁酸去结合并代谢为次级胆汁酸的应用。

12、进一步地，所述应用的方法为：

13、将微生态制剂灌胃c57bl/6j无菌小鼠，在小鼠第八周龄的第1、2、3、5、7天共灌胃5次，每次200μl，灌胃结束后小鼠继续在无菌环境中居住两周以促进微生态制剂的定植。

14、作为优选方案，所述应用的方法为：

15、将微生态制剂灌胃c57bl/6j无菌小鼠，在小鼠第八周龄灌胃5次；

16、在无菌小鼠第八周龄的1、2、3、5、7天，将200μl的微生态制剂灌胃无菌小鼠，灌胃5次之后，无菌小鼠继续在无菌环境中居住2周以促进微生态制剂的定植，期间自由采食和饮水。

17、如需长途运输或者长期存放，为了保持微生态制剂中菌的活性，可以使用以下方法：

18、向制得的菌液中加入甘油得到细菌冻存液(甘油的体积分数为15％)，置于液氮中低温保存。使用前通过37℃水浴快速解冻菌液，每毫升微生态制剂中活菌数量为106～1010个，优选为108～109个。

19、本发明的有益效果：

20、1.能成功定植到肠道中：本发明提供的turicibacter sanguinis菌株能够成功定植到无菌小鼠肠道中。

21、2.将初级胆汁酸去结合：本发明提供的turicibacter sanguinis菌株在肠道中能将来源于肝脏的结合型初级胆汁酸去结合。

22、3.将去结合初级胆汁酸代谢为次级胆汁酸：本发明提供的turicibactersanguinis菌株在肠道中能够将去结合的初级胆汁酸代谢为不同的次级胆汁酸。

23、附属图表说明

24、图1为实施例1调控小鼠肠肝循环中胆汁酸代谢菌种的筛选来源；

25、图2为实施例2制备的微生态制剂对无菌小鼠肠道微生物区系的影响图；

26、图3为实施例2制备的微生态制剂对无菌小鼠生长发育的影响图；

技术特征：

1.一种turicibacter sanguinis菌株在调控小鼠肠肝循环中胆汁酸代谢的应用。

2.一种将初级胆汁酸去结合并代谢为次级胆汁酸的微生态制剂，其特征在于：所述微生态制剂中含有turicibacter sanguinis菌株；所述微生态制剂中，turicibactersanguinis菌株的活菌数量为106～1010个/毫升。

3.根据权利要求1所述的微生态制剂，其特征在于：所述微生态制剂中，turicibactersanguinis菌株的活菌数量为108～109个/毫升。

4.一种权利要求2所述的微生态制剂的制备方法，其特征在于：该方法是将turicibacter sanguinis菌株接种到dsmz110碎肉碳水化合物培养基中，置于厌氧培养箱中培养新鲜菌液，即为微生态制剂，turicibacter sanguinis菌株的活菌数量为106～1010个/毫升。

5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：所述turicibacter sanguinis菌株的接种量为1～2％。

6.根据权利要求5所述制备方法，其特征在于：所述turicibacter sanguinis菌株的接种量为1％。

7.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于：所述厌氧培养的气体环境为：90％n2，5％co2，5％h2；培养温度为37℃。

8.根据权利要求4所述的微生态制剂，其特征在于：所述微生态制剂中，turicibactersanguinis菌株的活菌数量为108～109个/毫升。

9.一种权利要求1所述的微生态制剂在调控小鼠肠肝循环中胆汁酸代谢、将初级胆汁酸去结合并代谢为次级胆汁酸的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述应用的方法为：

技术总结本发明公开了一种Turicibacter sanguinis菌株的应用，所述微生态制剂中含有Turicibacter sanguinis菌株；所述微生态制剂中，Turicibacter sanguinis菌株的活菌数量为10<supgt;6</supgt;～10<supgt;10</supgt;个/毫升。本发明提供的Turicibacter sanguinis菌株在无菌小鼠肠道中成功定植后，能将来源于肝脏的初级胆汁酸去结合并代谢为次级胆汁酸，调控小鼠肠肝循环中的胆汁酸代谢。技术研发人员：晏向华,牛耀嵘,晏振鸿,余灏南受保护的技术使用者：华中农业大学技术研发日：技术公布日：2024/6/13