LNnT与益生菌的组合及其在制备用于减少肠道中硫化氢的组合物中的应用的制作方法

本发明涉及益生元与益生菌，具体是关于lnnt与益生菌的组合及其在制备用于减少肠道中硫化氢的组合物中的应用。

背景技术：

1、母乳低聚糖(human milk oligosaccharides，简称hmos)属于母乳中除乳糖和脂肪外，含量第三丰富的物质。其总含量在泌乳期的各个阶段有变化，在成熟乳中大约是12-14g/l，而初乳中大约是20-24g/l。每一种母乳低聚糖的结构在还原端都有一个乳糖，大部分以聚乳糖胺作为结构主链，并在链端含有岩藻糖、唾液酸或二者均有。母乳低聚糖主要由三大类组成：(1)岩藻糖基类低聚糖，以2’-岩藻糖基低聚糖(2’-fucosyllactose,2’-fl)和3-岩藻糖基低聚糖(3-fucosyllactose,3-fl)为代表性物质；(2)唾液酸基类低聚糖，以3’-唾液酸基乳糖(3’-sialyllactose,3’-sl)和6’-唾液酸基乳糖(6’-sialyllactose,6’-sl)为代表性物质；(3)不含岩藻糖基或唾液酸基的核心糖链结构形成的低聚糖，以乳糖-n-四糖(lnt)和乳糖-n-新四糖(lnnt)为代表性物质。随着母乳低聚糖的三大主要功能被逐步报道和发现：(1)抑制特定病菌的附着和感染；(2)作为益生元，促进肠道共生系统里面细菌的生长；(3)直接减缓粘膜在有毒刺激下的炎症反应hmos的存在与含量存在个体差异，并与哺乳母亲的路易斯分泌型组成有关。目前，hmos已成为了衡量婴幼儿配方粉是否更加接近母乳成分的一个重要指标。

2、在母乳中，中性糖链核心的hmo占比超过了70％，其中，乳糖-n-新四糖(lnnt,lacto-n-neotetraose)是母乳中含量最高的中性糖链核心hmo之一，是由两个d-半乳糖、一个n-乙酰-d葡萄糖胺和一个d-葡萄糖构成的四糖。目前，市售的lnnt经由微生物发酵法制备而成，经质谱和核磁共振确定结构和人乳中发现的寡糖具有相同结构。

3、hmos可被视为改善机体健康的微生态管理工具，可改变、调节和重组已经存在的肠道菌群。肠道菌群是人体肠道微生态系统的重要组成物质，对人类健康有重要作用。肠道菌群中的厌氧类杆菌、双歧杆菌、真细菌、链球菌和乳酸杆菌等通过发酵碳水化合物、蛋白质和脂质等能释放代谢产物短链脂肪酸(short chain fatty acids,scfa)，主要包括乙酸、丙酸、丁酸和戊酸等。

4、婴儿肠道中的微生物菌群除了可代谢产生短链脂肪酸以外，还会发酵产生气体，如二氧化碳，甲烷等，导致婴儿出现腹胀和肠胀气等症状。此外，在肠粘膜的降解过程中，有害菌群可侵入肠粘膜内部，粘多糖可经过中间反应快速地降解为硫代硫酸盐和游离的硫酸根，并最终产生有毒气体硫化氢。在炎症反应中，肠道稳态被破坏，硫代硫酸盐可被氧化成连四硫酸盐，并促进有害菌如沙门氏菌的进一步侵袭。在此条件下，肠壁完整性被破坏和肠漏症状可导致短链脂肪酸的生成减少。

5、目前在婴幼儿配方粉、辅食及营养补充剂等领域，本发明提供的母乳寡糖及其与益生菌形成的组合物，提供了可改善肠道微环境健康如减少有毒气体硫化氢的方案。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明提供母乳低聚糖lnnt与益生菌的组合及其在制备组合物中的应用。

2、一方面，本发明提供lnnt与益生菌的组合在制备用于减少肠道中硫化氢的组合物中的应用。

3、根据本发明的具体实施方案，其中，所述益生菌选自：动物双歧杆菌乳亚种bb-12、婴儿双歧杆菌ylgb-1496、动物双歧杆菌乳亚种hn019和乳双岐杆菌bl-99中的一种或两种以上的组合；优选地，所述益生菌为乳双岐杆菌bl-99。所述婴儿双歧杆菌ylgb-1496是保藏编号为cgmcc no.21109的婴儿双歧杆菌；所述乳双岐杆菌bl-99是保藏编号为cgmccno.15650的乳双歧杆菌。

4、根据本发明的具体实施方案，其中，所述lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：106-2×1012cfu；

5、优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为21.4-428.6mg：108-2×1010cfu；

6、优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为42.8-428.6mg：108-2×1010cfu。

7、根据本发明的具体实施方案，其中，所述组合物包括食品。

8、根据本发明的具体实施方案，其中，所述食品包括营养补充剂、配方食品、辅食中的一种或多种；

9、本发明中所称的“儿童”为：已满36个月但不满15岁的个体(依据中华人民共和国卫生部发布的《食品营养强化剂使用标准》(gb14880-2012)问答)。

10、其中，所述lnnt的含量为：

11、粉状食品中21.4-857.2mg/100g粉；优选为42.8-428.6mg/100g粉；

12、液态状食品中0.03-1.2g/l；优选为0.06-0.6g/l。

13、根据本发明的具体实施方案，其中，所述食品包括特殊食品、儿童奶粉或成人奶粉，所述特殊食品可以选自婴幼儿配方食品、特殊医学用途婴儿配方食品、特殊医学用途配方食品或保健食品；

14、优选地，所述特殊食品是婴儿配方奶粉，在所述婴儿配方奶粉中，lnnt的含量为21.4-857.2mg/100g粉；进一步优选地，在所述婴儿配方奶粉中，lnnt的含量为42.8-428.6mg/100g粉；优选地，所述益生菌在婴儿配方奶粉中的含量为106-2×108cfu/g粉。

15、优选地，所述食品是婴儿配方奶液；优选地，在所述婴儿配方奶液中，lnnt的含量为0.03-1.2g/l；优选地，在所述婴儿配方奶液中，lnnt的含量为0.06-0.6g/l。

16、另一方面，本发明提供lnnt与益生菌的组合在制备用于改善肠道微环境健康的组合物中的应用；

17、所述改善肠道微环境健康包括：调控肠道系统中有害气体的产生；

18、优选地，所述有害气体包括硫化氢。

19、根据本发明的具体实施方案，其中，所述组合物包括食品。

20、根据本发明的具体实施方案，其中，所述食品包括营养补充剂、配方食品、辅食中的一种或多种；

21、其中，所述lnnt的含量为：

22、粉状食品中21.4-857.2mg/100g粉；优选为42.8-428.6mg/100g粉；

23、液态状食品中0.03-1.2g/l；优选为0.06-0.6g/l。

24、优选地，所述食品中lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：106-2×1012cfu；

25、进一步优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：108-2×1010cfu。

26、另一方面，本发明提供lnnt与益生菌组成的组合物，其中，所述组合物用于减少肠道中硫化氢的含量。

27、根据本发明的具体实施方案，其中，所述益生菌选自：动物双歧杆菌乳亚种bb-12、婴儿双歧杆菌ylgb-1496、动物双歧杆菌乳亚种hn019和乳双岐杆菌bl-99中的一种或两种以上的组合；

28、优选地，所述益生菌为乳双岐杆菌bl-99。

29、根据本发明的具体实施方案，其中，lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：106-2×1012cfu；

30、优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：108-2×1010cfu；

31、优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为42.8-428.6mg：108-2×1010cfu。

32、另一方面，本发明提供一种食品，其包括lnnt和益生菌，所述食品用于减少肠道中硫化氢。

33、根据本发明的具体实施方案，其中，所述益生菌选自：动物双歧杆菌乳亚种bb-12、婴儿双歧杆菌ylgb-1496、动物双歧杆菌乳亚种hn019和乳双岐杆菌bl-99中的一种或两种以上的组合；优选地，所述益生菌为乳双岐杆菌bl-99；

34、优选地，所述食品中lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：106-2×1012cfu；

35、优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为21.4-857.2mg：108-2×1010cfu；

36、优选地，所述lnnt与益生菌的含量之比为42.8-428.6mg：108-2×1010cfu。

37、本发明的有益效果：

38、本发明提供的lnnt与益生菌的组合及其在制备用于减少肠道中硫化氢的组合物中的应用，提供了改善肠道微环境健康如减少有害气体的解决方案。进一步地，本发明提供的lnnt与益生菌的组合在制备用于减少肠道中硫化氢的食品中的应用，在3岁以上儿童、青少年及成人领域，也提供了缓解肠道不适的解决方案。