具有抗肿瘤活性的3,7,8-多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物及制备的制作方法

专利名称：：具有抗肿瘤活性的3,7,8-多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物及制备的制作方法技术领域：：本发明涉及具有抗肿瘤活性的3，7，8—多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物及其中间体的制备，以及它作为抗肿瘤药的生物活性。背景技术：：吡啶并[4,3-d]嘧啶类化合物是一类广泛生物活性功能的稠杂环类化合物，尤其是在医药研究方面显示了广泛的生理和药理活性，可用于治疗各种类型的肿瘤，癌症，白血病，艾滋病及许多神经性疾病，以及用于止痛、消炎、抗过敏等。本申请人在前期工作中研究发明了一种未见文献报道的新颖的合成吡啶并[4,3-d]嘧啶类化合物的方法，可经由醚脒合成得到具有通式A结构的多功能吡啶并[4，3-d]嘧啶类化合物。研究发现该类化合物不但具有优良的杀菌和除草活性(中国发明专利一类具有杀菌除草活性的多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶及制备，ZL200510019576.3;以及中国发明专利具有杀菌活性的2，3，4，7—多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物及制备，申请号200810047941.5)，同时还显示了显著的抗肿瘤活性(中国发明专利具有抗肿瘤活性的2，3，4，7，8—多取代吡啶并[4，3-d]嘧啶衍生物，申请号200910060650.4)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>为了更系统地研究该类化合物的抗肿瘤活性，本申请人对此合成方法进行了更为深入的研究，拓展了底物范围，并对目标化合物的结构进行了修饰和优化，得到了结构多样而新颖的3，7，8—多取代吡啶并[4，3-d]嘧啶衍生物，并测试其抗肿瘤活性，以期找到具有更高生物活性的化合物。发明内容本发明的目的在于探索具有新结构并具有抗肿瘤活性的多取代吡啶并[4，3-d]嘧啶衍生物，提供一类具有抗肿瘤活性的新型多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶类化合物及其合成方法。本发明的一类多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物的结构通式如I:Y表示甲硫基，甲砜基，d-C3的烷氨基；R表示d-Q的烷基，杂环基为吡啶、噻吩或呔喃的杂环取代d-C2烷基，苯基d-C3烷基或取代苯基Q-C3烷基，苯基或取代苯基；所涉及的苯环上的取代基主要为卤素、d-Cs的烷基或烷氧基，取代基在苯环任一位置上的单取代或多取代，在苯环上的取代基相同或不相同；其中，通式I涵盖了如下通式1-1、通式1-2和通式1-3所示三类化合物1-11-2O1隱3通式I-1、1-2、I-3中的R和通式I中的含义相同，通式I-1中的Y表示d-C3的烷氨基。本发明人试验表明具有结构通式I的化合物对人口腔底癌细胞KB、对长春新碱耐药的人口腔底癌细胞KBv200、人乳腺癌细胞株MCF-7、对阿霉素耐药的人乳腺癌细胞株MCF-7/Adr、人鼻咽癌细胞株6-10B、CNE1、CNE2、H0NE1、SUNE1;人肺癌细胞株H460、Calu-3;白血病细胞株HL-60等多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用，可用作抗肿瘤药剂的有效成分。以通式1-1表示的多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物的制备方法(A法)，是使通式B所表示的化合物与原甲酸三乙酯反应生成吡啶醚脒中间体C，C再与C广C6的脂肪伯胺、苯基Q-C4烷基伯胺或取代苯基Q-C4垸基伯胺或杂环取代d-C2烷基胺反应，在室温或加热条件关环，得到化合物I-1，通式1-1的化合物的合成路线如下BCI-1通式B、C及I-1中的Y表示CrC3的烷氨基；RNH2表示d-C6的垸基，杂环基为吡啶、噻吩或呋喃的杂环取代CrC2烷基，苯基d-C3垸基或取代苯基d-C3烷基。上述反应式中的B化合物与原甲酸三乙酯摩尔比为1:1-6，直接采用原甲酸三乙酯为溶剂，不用催化剂，或者使用催化剂，选用的催化剂有对甲苯磺酸或醋酸酐，在80°C-140°C之间反应10-25小时，得到中间体C，中间体C再与伯胺以摩尔比为1:1-3，有机溶剂为乙腈、二氧六环或二氯甲烷，在2(TC-10(TC反应2-12小时，即可以较好的收率合成得到通式I-1的产物。以通式1-2表示的多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物的制备方法(B法)，是使通式D所表示的化合物经水解反应得到化合物1-2:通式D和1-2中的R与和通式I中的含义相同。以通式1-3表示的多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物的制备方法(C法)，是使通式D所表示的化合物经氧化反应得到化合物1-3，通式D、I-3中的R和通式I中的含义相同。上述D化合物(具体合成见中国发明专利一类具有杀菌除草活性的多取代吡啶并[4,3-d]嘧淀及制备，ZL200510019576.3:以及中国发明专利具有杀菌活性的2，3，4，7—多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物及制备，申请号200810047941.5)在有机溶剂与水的混溶体系，有机溶剂为乙醇或丙酮等，在10°C-8(TC下经碱性或酸性水解反应0.5-6小时，即可以较好的收率合成得到通式I-2的产物；或者在有机溶剂醋酸或乙腈中，在50'C-IO(TC下经氧化得到I-3的产物，所用的氧化剂有双氧水，间氯过氧苯甲酸等。具体实施例方式下面通过实例来具体地说明本发明的式I化合物的制备方法，这些实施例仅对本发明进行说明，而不是对本发明进行限制。实施例1化合物113-(4-甲基苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3，4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈将15毫摩尔2-甲基-3-乙酰基-5-氰基-6-甲氨基-4-吡啶胺加入到50毫升的反应瓶中，加MeHNT、NT、CH'入45毫摩尔原甲酸三乙酯，加入催化量对甲苯磺酸，在130。C反应12小时，反应完全后减压蒸出没有反应的原甲酸三乙酯，残余物减压柱层析得黄色晶体吡啶醚脒，熔点118.2~120.7°C，产率62.0%。'HNMR(CDC13,TMS,600MHz)3(ppm):1.39(t,3H,J=7.2Hz,-OCH2CH3),2.38(s，3H，-CH3),2.41(s,3H，-COCH3),3.08(m,3H，-NHCH3),4.34(q,2H,J=7.2Hz，-OCH2CH3)，5.26(s，1H，NH),7.61(s,1H，N=CH)。再将2毫摩尔2-甲基-3-乙酰基-5-氰基-6-甲氨基吡啶-4-亚胺甲叉基乙基醚、15毫升乙腈加入到50毫升的反应瓶中，加入3毫摩尔对甲苄胺，加热到4050'C反应2小时，析出固体，抽滤，丙酮与石油醚混合溶剂重结晶，所得纯品为白色固体，收率为86.6%，熔点186.9~187.2°C。分子式C19H21N502:元素分析(％),计算值C64.94，H6.02，N19.93;实测值C64.74,H6.08，N19.87;IR(KBr,Wcm.1):3361(N-H);3091，762(=C-H);1637，1592，1517,1455(C=N,C=C);1352(C-H);1266(C陽N);!HNMR(S,CDC13，TMS,400MHz):2.35(s，3H,Ph-CH3),2.42(s,3H，嘧啶-CH3),2.59(s，3H吡啶-CH3),3.04(d,3H,-NHCH3,J=6.6Hz),4.86(s,2H,-CH2-)，6.69(s,1H,-NH),7.12(d,2H,ArH,J=7.8Hz),7.20(d，2H,ArH,J=7.8Hz),7.79(s,1H,嘧啶-H),10.16(s,1H,-OH)。以下化合物按照化合物11的方法制备，其结构鉴定数据如下化合物l3-乙基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为黄色固体，收率50.2%，熔点146.0~147.4°C。分子式C13H17N50元素分析(％)，计算值C60.21，H6.61，N27.01;实测值C60.63,H6.89，N27.17;NMR(CDC13,TMS,600MHz)<5(pptn):1.39(t,3H,-CH7CH2,J=7.2Hz),2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶-CH3),3.09(q,3H,-NHCH3,J==4.2Hz)，3.78(q,3H,-CH7CH2,J-7.2Hz)，6.72(s，1H，-NH),7.68(s,1H,嘧啶-H),10.30(s,1H,-OH;IR(KBr)"(cm-1):3355(N-H);3050,755(=C-H);2992,1348(C-H);2200(C三N);1638,1587,1517，1434(C=N，C=C);1259(C-N)。化合物23-丙基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈MeHNT、NT、CH3所得纯品为褐色固体，收率59.2%，熔点89.8~91.8°C。分子式C14H19N50元素分析(％)，计算值C61.52,H7.01，N25.62;实测值C61.88,H7.45,N25.92;NMR(CDC13，TMS,600MHz)d、(ppm):1.02(t，3H,-CH2CH2￡K2,J=7.5Hz)，1.78(q,2H,-CH2進CH3，J=7.4Hz),2.41(s，3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H，吡啶-CH3),3.10(d，3H,-NHCH3，J=4.8Hz),3.68(t,2H,-CH，CHCH3,J=7.2Hz)，6.70(s,IH,-NH)，7.65(s，IH,嘧啶-H),10.36(s,IH,-OH);IR(KBr)o(cm1):3332(N陽H);3209,758(=C-H);2967,1353(C-H);1638,1587,1530,1436(C=N,OC);1260(C陽N)。化合物33-丁基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为黄色固体，收率52.6%，熔点86.8~88.5°C。分子式C15H21N5。元素分析(％)，计算值C62.70，H7.37,N24.37;实测值C63.06，H7.66，N23.96;NMR(CDC13,TMS,600MHz)(5(ppm):0.94(t,3H,-CHCH7CH，CH^J=7.5Hz)，1.39~1.46(m,2H,-CHCH，CH2CHV),1.67~1.73(m,2H，-CH，CH2CH，CHA2.41(s，3H,嘧啶陽CH3)，2.56(s,3H,吡啶-CH3),3.12(d,3H,-NHCH3，J=4.8Hz)，3.70(t，2H，-CH2CH，CH7CH3,J=7.5Hz)，6.70(s,1H，-NH),7.65(s,IH,嘧啶-H),10.30(s，IH,-OH)。化合物43-己基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3，4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率63.3%，熔点125.8~126.rC。分子式C17H25N509<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>元素分析O)，计算值C64.73,H7.99,N22.20;实测值C65.11，H8.04,N22.44;&NMR(CDC13,TMS，600MHz)<5(ppm):0.90(t，3H，-CH2CH2CH2CH2CH2￡H2,J=6.9Hz),1.32~1.39(m,6H，-CH，CH，CH，CH2CHCHA1.70-1.75(m,2H,-CHCH2CH，CH，CH，CFh),2.41(s，3H，嘧啶-CH3),2.56(s，3H,吡啶-CH3),3.10(d,3H,-NHCH3,J=5.4Hz)，3.69(q,2H,-CH2CH7CH7CH7CH7CH3,J=7.2Hz),6.69(s,1H,-NH),7.65(s,1H,嘧啶-H),10.30(s,1H，-OH);IR(KBr)(cm.1):3329(N-H);2932,2860,1391(C陽H);1634，1596,1520,1468(C=N,OC);1280(C-N);609(=C-H)。化合物53-糠基-4，5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3，4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为黄色固体，收率61.7%，熔点155.6~156.9°C。分子式C16H17N502元素分析(％),计算值C61.72,H5.50,N22.49;实测值C61.84,H5.88,N22.81;&NMR(CDC13,TMS,600MHz)5(ppm):2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.57(s，3H,吡啶隱CH3),3.07(d,3H,-NHCH3，J=5.4Hz),4.83(s,2H，-CH2),6.386.42(m,2H,呋喃-H),6.98(s,1H，-NH),7.42(t，1H,呋喃-H,J=0.9Hz),7.76(s,1H，嘧啶-H)，10.19(s,1H,OH);IR(KBr)o(cm"):3363(N-H);3119,749(=C-H);2934，1344(C-H);1641，1586，1517,1433(C=N,C=C);1258(C-N)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>化合物63-节基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3，4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率43.8%，熔点181.9183.1'C。分子式C18H19N50元素分析(％)，计算值C67.27,H5.96,N21.79;实测值C67.66,H6.30，N21.85;4NMR(CDC13，TMS，600MHz)<5(ppm):2.42(s,3H,嘧啶-CH;j),2.60(s，3H,吡啶-CH3),3.05(d，3H,-NHCH3,J=7.2Hz),4.91(s,2H,-CH2-)，6.69(s，1H，-丽)，7.247.42(m,5H,ArH)，7.80(s，1H，瞎啶-H),10.19(s,1H,-OH);IR(KBr)"(cm"):3332(N-H);3196,731(=C-H);2942,1352(C-H);1637,1591,517,1452(C=N,C=C);1262(C-N)。化合物73-苯丙基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率51，4%，熔点150.2151.0°C。分子式C2GH23N50元素分析(％)，计算值C68.74,H6.63,N20.04;实测值C68.55,H6.56,N20.25;力NMR(CDC13,TMS,600MHz)<5(ppm):2.08(m，2H，PhCH7CHCH"),2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶國CH3)，2.73(t，2H,PhCH2CH，CH，-,J=6.9Hz),3.09(q,3H，-NHCH3,J=2.2Hz),3.66(t,2H,PhCH，CH7CH2-,J=6.9Hz),6.56(s,IH,-NH),7.19~7.58(m,5H,ArH)，7.58(s,IH,嘧啶-H)，10.26(s,IH,-OH);IR(KBr)t;(cm"):3353(N-H);3085,759(=C-H);2944,1348(C陽H);1639,1592,1518,1455(C=N，C=C);1265(C-N)。化合物83-(2-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为淡黄色固体，收率67.6%,熔点138.0~140.0°C。分子式C18H18FN50元素分析(％)，计算值C63.70，H5.35,N20.64;实测值C63.83,H5.47,N20.52;力NMR(CDC13,TMS,400MHz)(5(ppm):2.42(s,3H，-CH3)，2.59(s,3H,吡啶-CH3),3.06(d,3H,-NHCH3，J=4.2Hz),4.93(s，2H,-CH2-)，6.79(s,IH,-NH),7.15~7.26(m,4H,ArH)，7,83(s,IH,嘧啶-H),10.18(s,IH,-OH);IR(KBr)(cm-1):3431(N-H);2926，1348(C-H);1639,1593,1519,1457(C=N,C=C);1264(C-N);759(=C-H)。化合物93-(4-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>所得纯品为白色固体，收率69.P/。，熔点163.3~163.6°C。分子式C18H1SFN50元素分析(％)，计算值C63.70，H5.35，N20.64;实测值C63.64,H5.35，N20.66;NMR(CDC13,TMS,600MHz)3(ppm):2,42(s,3H,嘧啶-CH3)，2.59(s,3H，吡啶-CH3),3.05(d，H，-NHCH3,J=7.2Hz)，4.88(s，2H,-CH2-)，6.64(s,1H,-NH),7.08~7.23(m,4H，ArH),7.78(s，1H,喷啶-H)，10.12(s,1H，隱OH);IR(KBr)(cm-1):3353(N-H);3208,747(=C-H);2941,1352(C-H);1641,1590,1512,1457(C=N,C=C);1267(C國N)。化合物103-(2-氯苄基)-4，5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage12</formula>所得纯品为白色固体，收率50.0%，熔点240.5241.0。C。分子式C18H18C1N50元素分析(％)，计算值C60.76,H5.10，N19.68;实测值C60.89，H5.33，N20.09;JHNMR(CDC13,TMS,400MHz)3(ppm):2.43(s,3H，嘧啶-CH3)，2.60(s,3H，P比啶-CHb)，3.07(d,3H,-NHCH3，J=4.8Hz)，4.98(s,2H,-CH2-)，6.66(s,1H,隱NH),7.07~7.48(m，4H，ArH),7.77(s,1H，喷啶-H),10.20(s，1H,-OH);IR(KBr)o(cm1):3350(N-H);3136，760(=C-H);2954,1345(C-H);1641,1591，1522，1450(C=N，C=C);1250(C-N)。化合物123-(4-甲氧基苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈OH^~~7CH3所得纯品为白色固体，收率70.0%，熔点203.5204.rC。分子式C19H21N50元素分析(％)，计算值C68.04，H6.31，N20.88;实测值C67.98，H6.51,N20.91;tHNMR(CDCl3，TMS,600MHz)<5(ppm):2.39(s,3H,嘧啶-CH3)，2.59(s,3H,吡啶-CH3),3.05(d,3H，-NHCH3，J=4.8Hz)，3.80(s，3H，Ph-OCH3),4.84(s,2H,-CH2-)，6.71(s，1H,-NH)，6.92(d，2H,ArH,J=8.4Hz),7.17(d,2H,ArH,J=8.4Hz),7.79(s,1H,嘧啶-H)，10.19(s,1H,-OH);IR(KBr)u(cm"):3360(N-H);3122,746(=C-H);2935,1349(C國H);1638，1591，1514，1456(C=N,C=C);1251(C-N)。化合物133-(4-氟苯乙基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为淡黄色固体，收率74.3%，熔点162.0~163.0°C。分子式C19H2()FN50元素分析(％)，计算值C64.57，H5.70,N19.82;实测值C64.56，H5.83，N20.10;&NMR(S，CDC13，TMS,600MHz):2.43(s，3H，,-CH3),2.52(s,3H，吡啶-CH3),3.01(t,2H,-CH2CH2-，J=6.9Hz)，3.12(q,3H,-NHCH3,J=4.8Hz),3.93(t，2H，-CH2CH2-，J=6.9Hz)，6.79(s,1H,-NH),7.03(d,2H,ArH,J=8.7Hz),7.10(d,2H,ArH,J=8.7Hz),7.26(s,1H，嘧啶-H)，10.38(s,1H,-OH);IR(KBr)o(cm-1):3331(N-H);3087,797(=C-H);2928,1349(C-H);1636,1590,1510,1471(C=N,C=C);1223(C-N)。化合物143-(4-氯苯乙基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲氨基-3，4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈MeHNT、NT、CH:所得纯品为淡黄色固体，收率47.3%，熔点153.8~154.3°C。分子式C19H2qC1N50元素分析(％)，计算值C61.70,H5.45,N18.94;实测值C61.74,H5.58,N19.07;工HNMR(CDC13,TMS，600MHz)<5(ppm):2.41(s,3H,嘧淀-CH3)，2.51(s，3H,批啶-CH3),2.98(t，2H，-CH2CH2-，J=6.9Hz)，3.12(d,3H，-NHCH3,风8Hz)，3.91(t,2H，-CH2CH2-，J=6.9Hz)，6.77(s，1H,-NH),7.06(d,2H,ArH,J=8.4Hz),7.24(s,1H,嘧啶-H),7.29(d,2H,ArH，J=8.4Hz)，10.36(s,1H，-OH);IR(KBr)u(cm"):3358(N-H);3133，752(=C-H);2935,1393(C-H);1640,1591,1517,1454(C=N，C=C);1265(C-N)。实施例2化合物253-(4-甲基苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8國腈将15毫摩尔2-甲基-3-乙酰基-5-氰基-6-乙氨基-4-吡啶胺加入到50毫升的反应瓶中，加入90毫摩尔原甲酸三乙酯，在140。C反应10小时，反应完全后减压蒸出没有反应的原甲酸三乙酯和溶剂，残余物经硅胶柱层析得白色晶体吡啶醚脒，89.390.0°C，收率74%。'HNMR(CDC13,TMS，400MHz)(5(ppm):1.25(t，3H,J=8.0Hz，-NHCH2CH3)，1.39(t,3H:J=8.0Hz,-OCH2CH3),2.36(s,3H,-CH3),2.37(s,3H,-COCH3),3.56(q,2H，J=8.0Hz，-NHCH2CH3)，4.34(q，2H,J=8.0Hz,-OCH2CH3),5.20(s,1H,NH),7.60(s,1H,N=CH)。将2毫摩尔2-甲基-3-乙酰基-5-氰基-6-乙氨基吡啶-4-亚胺甲叉基乙基醚、15毫升二氯甲垸加入到50毫升的反应瓶中，加入4毫摩尔对甲基苄胺，在2(TC搅拌反应12小时，析出白色固体，过滤，乙醇重结晶，所得纯品为白色固体，收率为91.4%，熔点182.7~183.0°C。分子式C2QH23N50:元素分析(％)，计算值C68.74，H6.63,N20.04;实测值C68.50,H6.40,N19.81;IR(KBr,WcnT1):3363(N-H);3056,763(=C-H);2966,2869,1382(C-H);1639,1594，1514,1457(C=N，C=C);1258(C-N);&丽R(S,CDC13,TMS,400MHz):1.23(t,3H,-NHCH，C仏,J=7.2Hz),2.35(s,3H,Ph-CH3)2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.59(s,3H，吡啶-CH3),3.54(m,2H，-NHCH2CHO,4.85(s,2H,-CH2-)，6.70(s,1H,-NH),7.12~7.22(m,4H,ArH),7.79(s,1H,嘧啶-H),10.23(s，1H,-OH);13CNMR(<5，DMSO,TMS,150MHz)14.60,20.65,23.15,33.13,35.07,49.31,97.50,119.45，127.03,129.35，132.10，137.16,150.85,151.07，151.23,156.65,156.67，203.83;MS(EI,m/z，％):351(M++24),350(M++122)，349(M+47),245(41)，244(100)，106(18),105(69),77(17)。以下化合物按化合物25类似的方法制备，其结构鉴定数据如下化合物153-乙基-4，5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率81.5%，熔点149.4149.8°C。分子式C14H19N50元素分析(％)，计算值C61.52,H7.01,N25.62;实测值C61.61,H7.19,N25.46;'HNMR(CDC13，TMS,400MHz)<5(ppm):1.28(t,3H,-NHCH^CHj'J=7.2Hz),1.39(t,3H,-CH7CH2,J=7.2Hz),2.39(s，3H,嘧淀-CH3),2.56(s，3H,批啶-CH3),3.56~3.63(m,2H,-NHCH7」CHQ，3.78(q，3H，-CH7CH,J=7.3Hz),6.72(s，1H，-丽),7.68(s,1H,喷啶-H),10.36(s，1H,-OH);IR(KBr)t;(cm.1):3344(N隱H);3198,755(=C-H);2969,2933，1386(C-H);1641，1590，1509，1441(C=N,C=C);1259(C-N);EI國MS(m/z,%):275(M十+29),273(M+88),258(88),243(100),228(31),227(13),202(17),201(27),185(19),171(16),157(24),105(12)，43(20)。化合物163-丙基-4，5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率62.7%，熔点87.0~88.5'C。分子式C15H21N50元素分析(°/。)，计算值C62.70,H7.37,N24.37;实测值C62.73,H7.22,N24.11;&NMR(CDC13,TMS,400MHz)3(ppm):1.02(t,3H,-CH,CH，C仏,J=7.6Hz),1.29(t,3H,-NHCH7CHi,J=6.8Hz),1.79(q,2H，-CHCH—CH、J=7.3Hz),2.39(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s，E謂，Y、CH.EtHNT、NT、CH3153H,吡啶-CFb)，3.56~3.62(m,2H,-NHCHCH3).3.67(q,2H，-CH2CH7CH3,J=7.2Hz),6.71(s,1H,-NH),7.65(s,1H,嘧咬隱H),10.36(s,1H,-OH);IR(KBr)"(cm"):3433(N國H);3188，753(=C-H);2967,2878,1389(C-H);1641,1591,1512,1441(C=N,C=C);1253(C-N);EI隱MS(m/z,%):287(M+100),271(85),228(21),226(18),212(15),201(32)，184(21),159(17)，43(45)。化合物173-丁基-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>所得纯品为白色固体，收率43.3%，熔点80.0~81.5°C。分子式C16H23N50元素分析(％)，计算值C63.76,H7.69,N23.24;实测值C63.71,H7.43，N22.98;NMR(CDC13,TMS,400MHz)<5(ppm):0.99(t,3H,-CH，CH7CH，CH2,J=8.0Hz),1.29(t，3H,-NHCH，CHQ,1.37~1.45(m,2H,-CH7CHCH2CHQ,1.681.75(m,2H,-CH，CH2CH7CH3),2.39(s,3H,嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶-013),3.56~3.62(m,2H，-NHCH2CHQ,3.70(t,2H,-CH2CH7CH7CH3,J=7.4Hz)，6.70(s,1H,-NH),7.64(s,1H,嘧啶-H),10.36(s,1H,-OH);IR(KBr)u(cm.1):3385(N-H);3282,965(=C-H);2973,2868,13卯(C-H);2197(C三N);1624,1581,1505,1445(ON,C=C);1266(C-N);EI-MS(m/z,%):301(M+100),286(91),243(99),230(47),228(17)，226(22),218(13),217(10),216(17),212(28),203(16),202(14),201(22),184(18),175(13),159(15)，157(16)，132(10),43(26)。化合物183-己基-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>所得纯品为白色固体，收率63.8%，熔点126.0~126.5°C。分子式C18H27N50元素分析(％)，计算值C65.62,H8.26N21.26;实测值C65.65，H8.20，N21.47;if!NMR(CDC13,TMS，400MHz)(5(ppm):0.90(t,3H,-CEbCHsCHzCHsCFbCHa,J=7.0Hz)，1.27~1.34(m,9H，-NHCH，CH;and-CH，CH，CH7CH，CH7CH3),1.72(q,2H,-CH，CH2CH7CH7CH7CH;,J=7.4Hz)，2.39(s,3H,嘧啶隱CH3),2.56(s,3H,吡啶-13),3.56~3.62(m,2H,-NHCH2CHQ,3.69(q,2H,-CH2CH7CH7CH7CH7CH3,J=7.4Hz),6.70(s,1H，-NH),7.65(s,1H,嘧啶-H),10.36(s,lH,-OH);IR(KBr)o(cm"):3315(N-H);2961，2863,1387(C-H);1628,1587,1558,1468(C=N,C=C);1273(C-N);EI-MS(m/z,%):329(M+100),314(75),243(97),230(35),229(18)，227(53)，216(16)，213(10),212(15),211(20),203(25),201(20),199(41),184(34),157(27),130(16),105(14),43(62)。化合物193-糠基-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率89.0%，熔点142.5143.0°C。分子式C17H19N502元素分析(°/。)，计算值C62.75,H5.89,N21.52;实测值C62.92,H5.57,N21,18;&NMR(CDC13，TMS,400MHz)3(ppm):1.26(t,3H,-NHCH，C仏,J=7.4Hz),2.39(s,3H，嘧啶-CH3),2.56(s，3H,吡啶-CH3),3.57(m,2H，-NHCMHA4.83(s,2H,-CH2),6.38~6.42(m,2H,呋喃-H),6.99(s，1H,-NH),7.42(d,1H，呋喃-H),7.76(s，1H,嘧啶-H),10.24(s，1H,OH);IR(KBr)u(cm"):3371(N-H);3119,764(=C-H);2965,2931,1351(C國H);1641,1591,1516，1455(C=N,OC);1259(C-N);EI-MS(m/z,%):325(M+84),296(29),81(100),53(56),43(29)。实施例3化合物263-(4-甲氧基苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈<formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula>乙氨基-4-吡啶胺加入到50毫升的反应瓶中，加入15毫摩尔原甲酸三乙酯，加入催化量醋酸酐，在8(TC反应25小时，反应完全后减压蒸出没有反应的原甲酸三乙酯，残余物减压柱层析得白色晶体吡啶醚脒。将1亳摩尔2-甲基-3-乙酰基-5-氰基-6-乙氨基吡啶-4-亚胺甲叉基乙基醚、15毫升无水二氧六环加入到50毫升的反应瓶中，加入1毫摩尔对甲氧基苄胺，加热到100'C反应6小时，析出固体，过滤，丙酮与石油醚混合溶剂重结晶，所得纯品为白色固体，收率为86.5%，熔点194.0-194.6。C。分子式C2。H23N502:元素分析(％)，计算值C65.73，H6.34，N19.16;实测值C65.56,H6.12，N19.00;IR(KBr,Wcm"):3367(N-H);2964，2927，1381(C-H);1640,1592，1514,1458(C=N，C=C);1255(C-N);744(=C-H);工HNMR(S,CDC13,TMS，400MHz):1.23(t，3H,-NHCH7CH;,J=7.2Hz)，2.40(s，3H,喷啶-CH3),2.59(s，3H，吡啶-CH3),3.533.56(m,2H，-NHCH2CH".3.80(s,3H,Ph-OCH3)，4.83(s,2H,-CH2-)，6.72(s,1H,-NH),6.91~7.18(m,4H，ArH)，7.78(s,1H，嘧啶-H),10.23(s，1H,-OH);MS(EI,m/z,%):366(M++14),365(M+14),244(66),122(12)，121(100)。以下化合物按照化合物26的方法制备，其结构鉴定数据如下化合物203-苄基-4，5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率89.6%，熔点140.0~140.8°C。分子式C19H21N50元素分析(％)，计算值C68.04，H6.31,N20.88;实测值C67.78,H6.13，N20.63;1HNMR(CDC13,TMS,400MHz)(5(ppm):1.23(t，3H，-NHCH2￡Ha，J=7.0Hz)，2.40(s，3H，喷啶-CH3)，2.60(s,3H,吡啶-CH3),3.53~3.56(m，2H,-NHCH2CHQ.4.90(s,2H,-CH2-)，6.70(s,1H，-NH),7.24~7.43(m,5H,ArH),7.80(s，1H,嘧咬國H),10.20(s,1H,-OH);IR(KBr)u(cm-1):3351(N-H);3087,736(=C-H);2977,2937,1378(C-H);1641,1592,1521,1460(C=N,OC);1249(C-N);EI-MS(m/z，％):337(M++213),336(M++111),335(M+17)，317(24),246(22)，244(77)，243(57),227(21)，214(23),202(29)，91(100),卯(26)。化合物213-苯乙基-4:5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率91.7%，熔点124.3-125.(TC。分子式C21H25N50元素分析(％)，计算值C69.40,H6.93，N19.27;实测值C69.22，H6.71，N18.94;&NMR(CDC13,TMS,400MHz)3(ppm):1.27(t,3H,-NHCH，CH;,J=7.0Hz),2.08(m，2H,-CH,CH，CH"),2.39(s,3H，嘧啶-CH3),2.56(s,3H,吡啶誦CH3)，2.73(t,2H,-CH，CH，CH，-,J=7.4Hz),3.58(m,2H,-NHCH2CH3),3.66(t，2H,-CHCH7CH7-'J=7.6Hz),6.59(s,1H,-NH),7.19~7.33(m,5H，ArH),7.57(s,1H，嘧啶-H),10.35(s,1H，國OH);IR(KBr)w(cm-1):3323(N-H);3053，760(=C-H);2971，2927,1383(C-H);1629,1591,1509,1451(C=N,C=C);1264(C國N);EI-MS(m/z,%):363(M十100),348(58),245(38),243(32),91(52),43(11)。化合物223-(3-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈、N"、CH3所得纯品为白色固体，收率91.4%，熔点125.4128.4°C。分子式C19H2QFN50元素分析(％)，计算值C64.57,H5.70,N19.82;实测值C64.59,H5.76，N19.60;力NMR(CDC13,TMS,400MHz)5(ppm):1.23(t,3H，-NHCH7CH、J=7.2Hz),2.41(s，3H,嘧啶-CH3),2.60(s，3H,吡啶-CH3),3.54~3.57(m,2H,-NHCH2CHO,4.89(s,2H,-CH2-)，6.65(s,1H,-NH)，6.93~7.39(m，4H,ArH),7.79(s，1H,嘧啶-H),10.18(s,1H，-OH);IR(KBr)t>(cm-1):3359(N-H);3053，760(=C-H);2963，1382(C-H);1639,1591,1511,1454(C=N，C=C);1257(C-N);EI-MS(m/z,%):355(M++25),354M++116),353(M+15),246(11)，245(100),244(73),243(67)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage20</formula>3-(4-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率45.7%，熔点139.5~140.5°C。分子式C19H2QFN50元素分析(％)，计算值C64.57,H5.70,N19.82;实测值C64.71，H5.67,N19.85;NMR(CDC13，TMS,400MHz)5(ppm):1.23(t,3H，-NHCH,C仏,J=7.2Hz),2.40(s,3H,嘧啶-CH3)，2.59(s,3H,吡啶-013),3.533.56(m,2H,-NHCH^CHA4.87(s,2H,-CHr),6.65(s,1H，-NH),7.08~7.24(m,4H,ArH),7.78(s,1H,嘧啶-H)，10.18(s，1H,-OH);IR(KBr)o(cm-1):3363(N-H);3127,748(=C-H);2967,1383(C-H);1642,1591，1513，1459(C=N，C=C);1264(C-N);EI-MS(m/z,%):353(M+24),351(13)，336(22),245(73),244(44)，243(16)，203(18)，150(17),110(81),109(100),107(27)。化合物243-(2-氯苄基)-4，5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率89.2%，熔点190.5191.0'C。分子式C19H2qC1N50元素分析(％)，计算值C61.70,H5.45,N18.94;实测值C61.51,H5.68，N18.73，HNMR(CDC13,TMS,400MHz)d(ppm):1.24(t,3H,-NHCH，CH、J=7.2Hz),2.41(s,3H,嘧啶-CH3),2.60(s，3H,吡啶-CH3),3.55(m,2H,-NHCH7CKh),4.98(s,2H，-CH2-)，6.67(s,1H，-NH)，7.07-7.40(m,4H,ArH)，7.76(s，1H,嘧啶-H),10.21(s,1H，-OH);IR(KBr)t)(cm"):3356(N-H);3063，760(=C-H);2975,2940，1375(C-H);1641,1591,1517,1448(C=N，C=C);1250(C隱N);EI-MS(m/z,%):369(M+7)，329(19),312(17),245(31)，244(100),243(75)，209(28),208(22)。EtHN"NT、CH.20化合物273-(4-氟苯乙基)-4，5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈EtHN"、N'、CH'所得纯品为白色固体，收率89.2%，熔点162.8~163.2°C。分子式C20H22FN5O元素分析(°/。)，计算值C65.38,H6.04,N19.06;实测值C65.47,H6.16,N18.95;&NMR(CDC13,TMS,400MHz)S(ppm):1.30(t，3H,-NHCH7CH;J=7.2Hz),2.39(s，3H,嘧啶-CH;O，2.50(s，3H,吡啶-CH3),2.99(t,2H，-CH2CH2-，J=6.6Hz),3.573.62(m，2H,-NHCH2CHA3.90(t,2H，-CH2CH2-，J=6.8Hz)，6.79(s，1H,-NH),6.99~7.U(m，4H,ArH),7.22(s，1H,嘧啶-H),10.38(s,1H,-OH);IR(KBr)o(cm-1):3362(N-H);3128,749(=C-H);2968,1382(C-H);1641,1592,1511,1454(C=N,C=C);1222(C-N);EI-MS(m/z,%):368(M++19),367(M+43)，352(21),245(23)，244(100),123(23),103(20)。化合物283-(4-氯苯乙基)-4，5-二甲基-4-羟基-7-乙氨基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈所得纯品为白色固体，收率71.1%，熔点164.0164.6°C。分子式C2GH22C1N50元素分析O)，计算值C62.58，H5.78，N18.24;实测值C62.68,H5.52,N18.14;NMR(CDCI3，TMS，400MHz)5(ppm):1.30(t，3H，-NHCH7CHi,J=7.2Hz)，2.39(s,3H,嘧啶-CH3),2.51(s,3H，吡啶-CH3),2.99(t，2H,-CH2CH2-，J:7.2Hz),3.59~3.64(m,2H，-NH￡|^CH3),3.91(t，2H，-CH2CH2-，J=7.0Hz)，6.78(s,1H,-NH),7.05~7.30(m,4H,ArH),7.24(s,1H,嘧啶-H),10.38(s，IH,-OH);IR(KBr)i;(cm"):3362(N-H);3116，749(=C-H);2961，1383(C-H);2219(C三N);1641,1592,1512，1453(C=N，C=C);1263(C-N);EI-MS(m/z，％):386(M++33)，385(M++211)，384(M++18),383(M+34),368(21),245(30):EtHN"、N、CH.21244(100),230(16)，227(16),216(12),212(17.84),139(22)，103(26)。采用上述类似的方法，可以制备通式I-1其他的化合物。表l中所列的为本发明合成的通式I-1部分化合物。表中省略的符号的含义Me-甲基Et-乙基Ph-苯基furfuryl—糠基Y,、(VT\CH:I隱l表1已合成的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>实施例4化合物293-正己基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-甲酰胺将lmmol的3-正己基-5-甲基-4-亚甲基-7-甲硫基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶溶于ImL乙醇中，加入0.5mmol的氢氧化钠的2mL水溶液，80。C下回流搅拌反应6小时。反应毕，抽滤，水洗(2mLO得粗品，再用丙酮-水重结晶得产品白色固体，收率69.7%，熔点7L473.0。C。分子式C17H26N402S元素分析(％)，计算值C58.26,H7.48,N15.99;实测值C58.08，H7.70,N15.54;'HNMR(CDC13,TMS,600MHz)5(ppm):0.89(t,3H,-CH，CH7CH7CH，CH,CH2.J=6.9Hz),1.311.37(tn,6H，-CH7CH7CH7CH7CH7CHQ,1.78(m,2H,-CH2￡J^CH2CH2CH2CH3),2.46(s,3H，嘧啶-CH3),2.58(s，3H,-SCH3),2.67(s,3H,卩比啶-CH3),3.卯(m,2H，-￡ii2CH2CH2CH2CH2CH3)，7.76(s,1H，嘧啶隱H),8.60(s，1H,-OH);IR(KBr)(cm-1):3338(N-H);2927,2856,1390(C-H);1689(C=0)，1621,1548，1527,1412(C=N,C=C);1218(C-N),1107(C-O);809(=C-H)。以下化合物参照化合物29的方法制备，结构鉴定数据如下化合物303-(2-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-甲酰胺所得纯品为白色固体，收率92.9%，熔点168.7~169.4°C。分子式C18H19FN402S元素分析(％)，计算值C57.74,H5.11,N14.96;实测值C57.81,H4.97,N15.32;力NMR(CDC13，TMS,600MHz)3(ppm):2.45(s，3H,啼啶墨CH3),2.57(s,3H,-SCH3),2.68(s，3H,吡啶-CH3),5.19(s，2H，-CHr),7.07-7.51(m,4H,ArH)，7.94(s,1H,嘧啶-H),8.71(s，1H，-OH);IR(KBr)D(cm"):3343(N-H);3071,809(=C-H);3005,2926,1386(C誦H);1696(C=0)，1623，1554,1492，1443(C=N,OC);1219(C-N);1108(C-O)。化合物313-(4-甲氧基节基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-甲酰胺所得纯品为白色固体，收率70.7%，熔点139.4~140.1°C。分子式C19H22N403S元素分析(％)，计算值C59.05,H5.74,N14.50;实测值C59.25,H5.69,N14.37;hKCSZ、N"、CH:H3CS<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>1HNMR(CDC13,TMS，600MHz)3(ppm):2.45(s,3H，嘧啶-CH3),2.56(s,3H,-SCH3),2.69(s，3H,吡啶-CH3),3.79(s，3H,Ph-OCH3)，5.09(s,2H,6.88(d,2H,ArH，J=7.2Hz)，7.29(d,2H，ArH,J=7.2Hz),7.82(s,1H，嘧啶-H),8.70(s,1H,-OH);IR(KBr)(cm.1):3347(N-H);3003,776(=C-H);2930，2835,1389(C-H);16%(C=0),1641,1596,1515,1455(C=N，C=C);1253(C-N);1113(C-O)。实施例5化合物323-(4-氟苄基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-甲酰胺将lmmol的3-对氟苄基-5-甲基-4-亚甲基-7-甲硫基-8-氰基-3，4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶溶于lmL丙酮中，加入lmmol的氢氧化钠的2mL水溶液，室温搅拌反应0.5小时。反应毕，抽滤，水洗(2mLx2)得粗品，再用丙酮-水重结晶得产品白色固体，收率77.5%，熔点147.6~148.9°C。分子式C18H19FN402S元素分析(％)，计算值.-C57.74,H5.11，N14.96;实测值C57.92，H5.56，N14.89;NMR(CDC13,TMS,600MHz)3(ppm):2.47(s,3H,嘧啶-CH3),2.58(s,3H,-SCH3),2.68(s,3H，吡啶-CH3),5.13(s,2H,-CH-),7.05(t，2H，ArH,J=12.9Hz),7.33(s,2H,ArH),7.85(s,1H，嘧啶-H)，8.70(s,1H，-OH);IR(KBr)D(cm"):3332(N-H);3076,808(=C-H);1386(C-H);1694(C=0),1624，1600,1549，1510(C=N,C=C);1215(C-N);1124(C-O);EI-MS(m/z，％)356(M-H20100),341(54)，323(31)，299(29),247(88),109(43)。以下化合物参照化合物32的方法制备，结构鉴定数据如下化合物333-(4-氟苯乙基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4，3-￡1]嘧啶-8-甲酰胺H3CSZ、NT、CH:H3CS"、N"、CH:所得纯品为白色固体，收率63.3%，熔点96.598.(TC。分子式C19H21FN402S元素分析(％)，计算值C58.75,H5.45,N14.42;实测值C58.44，H5.77，N14.72;&醒R(CDC13，TMS,600MHz)J(ppm):2.50(s，3H，嘧啶-CH3),2.65(s，3H，-SCH3)，2.71(s，3H，吡啶-CH3),3.02(t，2H，-CHCH"),3.93(t，2H,-CH，CH，-),7.007.27(m，4H,ArH),7.37(s，1H，喷啶-H),8.58(s，1H,-OH);IR(KBr)u(cm—1):3399(N-H);2933,2863，1409(C-H);1700(C-O),1567，1536,1510(C=N,C=C);12%(C-N);1216(C-0);824(=C-H);EI-MS(m/z,%)370(M-H2O68),355(26),261(100)，248(60)，233(26),215(51)。化合物343-(3-甲氧基苯乙基)-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-甲酰胺所得纯品为白色固体，收率73.7%,熔点131.4~131.8°C。分子式C2QH24N403S元素分析(％)，计算值C59.98，H6.04,N13.99;实测值C60.09,H5.68，N14.26;&NMR(CDC13，TMS,600MHz)<5(ppm):2.46(s，3H，嘧喷-CH3),2.52(s,3H，-SCH3),2.72(s,3H,吡啶國CH3),3.08(t,2H，-CH2CH,-.J=6.6Hz),3.75(s，3H，Ph-OCH3),6.707.22(m,4H,ArH)，7.37(s，1H,嘧咬-H),8.69(s,1H，-OH);IR(KBr)w(citf1):3332(N-H);2942,2837,1350(C-H);1705(OO)，1621,1554,1443(C=N,C=C);1155(C-N);1049(C-O);881,781(=C-H)。采用上述类似的方法，可以制备通式I-2其他的化合物。表2中所列的为本发明合成的通式I-2部分化合物。表中省略的符号的含义Ph-苯基H3CSZ、N"、CH:H3CS'、hT、CH3I-225表2已合成的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>3-正己基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲砜基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>将lmmol的3-正己基-5-甲基-4-亚甲基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶-8-腈，10mL乙腈和催化量的钨酸钠加入50mL的三颈烧瓶中，升温到5(TC开始滴加0.68g(6mmmo1)30%双氧水。滴加完毕，回流反应至原料点消失。加水令固体完全析出，抽滤得到粗品再用丙酮-石油醚重结晶得纯品黄色固体，收率57.8%，熔点198.0~199.0°C。分子式C17H24N403S元素分析(％)，计算值C56.02，H6.64,N15.37;实测值C55.62,H6.24,N15.83;力NMR(DMSO,TMS,600MHz)5(ppm):0.86(t，3H，-CHCH，CH7CH，CH7CH2,J=6.6Hz)，1.28(s,6H,-CH，CH7CH2CH2CH7CH3),1.69(t，2H,-CH7CH2CH7CHCH7CH3,J=6.6Hz),3.03(s,3H,吡啶-CH3),3.51(s,3H，-S02CH3)，3.98(t,2H,-CH2CHCH7CH7CH7CH3,J=7.5Hz),8.87(s,1H,嘧啶國H);IR(KBr)u(cm-1):3426(O-H);3008,761(=C-H);2923，2856,1377(C-H);2242(C三N);1597,1548，1450(C=N,C=C);1332(0=S=0)，1149(C-O);EI-MS(m/z，％):203(3),355(26),88(20),43(100)。以下化合物参照化合物35的方法制备，结构鉴定数据如下化合物363-邻氟苄基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲砜基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶26H3C—S-N、CH3所得纯品为黄色固体，收率21.6%，熔点263.0264.5'C。分子式C18H17FN403S元素分析(％)，计算值C55.66，H4.41,N14.42;实测值C55.97,H4.19，N14.58;4NMR(DMSO，TMS,600MHz)<5(ppm):2.98(s，3H,吡啶-CH3)，3.49(s,3H,-S02CH3)，5.27(s，2H,7.16~7.39(m,4H,ArH)，9.03(s,1H,嘧啶-H);IR(KBr)u(cm-1):3424(O-H);3010,756(=C-H);2927,1387(C-H);2232(ON);1601,1578,1453(C=N,C=C);1313(0=S=0)，1144(C-O);EI-MS(m/z,%):109(17),58(100),42(78)。化合物373-对甲氧基苄基-4，5-二甲基斗羟基-7-甲砜基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶所得纯品为白色固体，收率48.9%，熔点178.5~180.(TC。分子式C19H2QN404S元素分析(％)，计算值C56.99,H5.03,N13.99;实测值C6.68,H5.21,N13.64;，HNMR(DMSO,TMS,600MHz)5(ppm):2.71(s,3H,吡啶陽CH3),3.40(s,3H，-S02CH3),3.70(t，2H,-CHr).3.75(s，3H,Ph-OCH3)，6.94(d，2H，ArH，J=7.8Hz)，7.38(d，2H,ArH，J=7.8Hz),7.68(s,1H，峰咬-H),7.75(s,1H,-OH);IR(KBr)o(cm4):3396(O-H);2930,2838,1398(C-H);2229(C三N);1610,1543,1518，1443(C=N,C=C);1312(0=S=0),1256(C-N);1138(C-O);758(=C-H);EI-MS(m/z，％):279(10),136(63),121(100)，106(28),77(32),62(48)。实施例7化合物383-对氟苄基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲砜基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶H3C—S''N、CH3将lmmol的3-对氟节基-5-甲基-4-亚甲基-7-甲硫基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶-8-腈，10mL醋酸和催化量的钨酸钠加入50mL的三颈烧瓶中，再加入0.68g(6mmmo1)30%双氧水。滴加完毕，IO(TC反应至原料点消失。加水令固体完全析出，抽滤得到粗品再用丙酮-石油醚重结晶得纯品黄色固体，收率43.2%，熔点150.3~151.8'C。分子式C18H17FN403S元素分析(％)，计算值C55.66,H4.41,N14.42;实测值C55.74,H4.70,N14.10;&NMR(DMSO，TMS,600MHz)5(ppm):2.71(s，3H,吡腔-CH3),3.42(s,3H，-S02CH3),3.69(t,2H,-CHr),7.207.50(m,4H,ArH),7.67(s,1H，嘧啶-H),7.82(s，1H，-OH);IR(KBr)w(cm.1):3426(O墨H);3004，757(=C-H);2922，1399(C-H);2226(C三N);1609,1578,1517,1442(C=N,C=C);1314(0=S=0),1233(C-N);1138(C-O);EI-MS(m/z,%):218(14)，178(63)，176(100),160(57),121(43)，109(57)，75(21),43(60)。以下化合物参照化合物38的方法制备，结构鉴定数据如下化合物393-对氟苯乙基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲砜基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4，3-d]嘧啶所得纯品为黄色固体，收率60.5%，熔点150.3~151.8°C。分子式C19H19FN403S元素分析(％)，计算值C56.70,H4.76,N13.92;实测值C56.46,H4.41,N14.35;，HNMR(DMSO,TMS,600MHz)<5(ppm):3.02(t,2H,-CH，CH2-.J=7.5Hz)，3.06(s，3H，P比啶-CH3)，3.51(s,3H,-S02CH3),4.23(t，2H,-CH，CH2-,J=7.2Hz)，7.127.30(m，4H,ArH)，8.65(s，1H,嘧P定-H);IR(KBr)(cm-1):3425(O-H);3042,756(=C-H);2934，1379(C-H);2239(C三N);1601,1550,1510，1451(C=N,C=C);1308(0=S=0),1220(C-N);1148(C-O);EI-MS(m/z,%):122(26),109(41),96(48),77(13),46(100),44(86)。H3C—N、CH3化合物403-间甲氧基苯乙基-4,5-二甲基-4-羟基-7-甲砜基-8-氰基-3,4-二氢吡啶并[4,3-d]嘧啶所得纯品为黄色固体，收率23.2%，熔点226.0227.0°C。分子式C2QH22N404S元素分析(％)，计算值C57.96,H5.35,N13.52;实测值C57.55,H5.16,N13.73;&NMR(DMSO,TMS,600MHz)3(ppm):2.98(t，2H,-CH,CHr.J=7.5Hz),3.05(s,3H,吡啶-CH3),3.50(s,3H，-S02CH3),3.72(s,3H,Ph-OCH3),4.23(t,2H,-CH2CH-,JK7.5Hz),6.78~7.22(m,4H,ArH),8.63(s,1H，嘧啶隱H);IR(KBr)"(cm4):3424(O-H);3035,753(=C-H);2928,1385(C-H);2229(C=N);1596,1550，1456(C=N,C=C);1307(0=S=0),1274(C-N);1153(C-O)。采用上述类似的方法，可以制备通式I-3其他的化合物。表3中所列的为本发明合成的通式I-3部分化合物。表中省略的符号的含义Ph-苯基—II01-3表3已合成的部分化合物<table>tableseeoriginaldocumentpage29</column></row><table>实施例8抗肿瘤活性试验供试靶标口腔底癌细胞KB;抗癌药物常春新碱诱导下产生耐药性的口腔底癌细胞KBv200;人乳腺癌细胞MCF-7;在抗肿瘤药物阿霉素诱导下产生耐药性的人乳腺癌细胞株MCF-7/Adr;人鼻咽癌细胞CNE1。试验方法MTT体外细胞毒试验方法取对数生长期的人癌细胞制成2xl(^个细胞/mL的细胞悬液，按0.19mL/孔接种到96孔板，于37。C、5%(302培养24小时后，按O.OlmL/孔加入不同浓度的样品溶液，另设生理盐水对照孔，每浓度设4个平行孔，加药后再培养72小时，培养结束前3小时按O.OlmL/孔加入浓度为10mg/mL的3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)，培养结束时吸出培养液，每孔加O.lmL的二甲基亚砜(DMSO),于测量波长540nm参比波长655nm下测量OD值。按下式计算细胞生长抑制率(IR)，以简化概率单位法计算半数抑制浓度(IC5G)。IR°/。=(l-平均OD值加舰/平均OD值对照组)xi00%。测定结果见表4。表4部分式I-1化合物的抗肿瘤活性数据(IC5。值)化合物KBKBv200MCF-7MCF-7/Ad1>50>50>50>502>50>50>50>503>50>50>50>504>50>50>50>505>50>50>50>506>50>50>50>507〉50>50>50>508>50>50>50>509>50>50>50>5010>50>50>50>50113.022.7550.046.5124.634.2839.817.613>50>50>50>5014>50>50>50>5015>50>50>50>5016>50>50>50>5018>50>50>50>5019>50>50>50>5020>5048.9>50>5023>50>50>50>5024>50>50>50>5025>50>50>50>50264.264.085.753.5127>50>50>50>5028>5032.728.222.5实施例9抗肿瘤活性试验供试靶标人鼻咽癌细胞6-10B、CNE1、H0NE1、SUNE1;人肺癌细胞H460、Calu-3;白血病细胞HL-60。试验方法MTT体外细胞毒试验方法。测定结果见表5。表5部分式I-1化合物的抗肿瘤活性数据(iCs。值)化合物6-10BCNE1H0NE1SUNE1H460Calu-3HL-60113,620.944.603.324.1027.0NT123.190.733.142.823.0435.40.322569.23.5328.415.971.032.0NT264.061.165.553.646.8836.30.37实施例IO抗肿瘤活性试验供试耙标口腔底癌细胞KB;人鼻咽癌细胞CNE1、CNE2。试验方法MTT体外细胞毒试验方法。测定结果见表6。表中长春新碱和氟脲嘧啶作为阳性对照药。表6部分式I-2、I-3化合物的抗肿瘤活性数据(iCs。值)化合物.IC50(uM)KBCNE1CNE230>50--310.1240.0640.0573229.320.2-3327.348.5-3417.614.7-365.459.9037>50—38>50-395.649.60406.2314.2Vincristin0.0063--Fluorouracil12.5--注Vincristin—长春新碱；Fluorouracil—氟脲嘧啶。实施例11化合物12对小鼠肝癌(Hep-S)移植瘤的生长抑制作用在取腹水型小鼠移植性肝癌腹水，用生理盐水按1:3稀释，接种于小鼠腋窝皮下0.2mL/只，接种次日随机分2组，即生理盐水对照组和化合物12给药组，每组9只动物。接种次日起化合物12给药组按每公斤体重IOO呢的剂量每天腹腔注射给药2次，连续给药4天停药1天，共给药8次，生理盐水对照组相应按每公斤体重10mL的剂量腹腔注射生理盐水。末次给药后第2日处死动物，剥离瘤块并称瘤重，按以下公式计算肿瘤生长抑制率(IR%)。IR%=[(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重]x100。/。结果显示化合物12对小鼠肝癌移植瘤的生长抑制率为52.3%，化合物12给药组瘤重与对照组比较有非常显著差异(P〈0.01)，表明化合物12具有抑制肿瘤生长作用。权利要求1、一类3，7，8-多取代吡啶并[4，3-d]嘧啶衍生物，其特征是具有通式I所表示的结构式式I中，X表示CN，CONH2；Y表示甲硫基，甲砜基，C1-C3的烷氨基；R表示C1-C6的烷基，杂环基为吡啶、噻吩或呋喃的杂环取代C1-C2烷基，苯基C1-C3烷基或取代苯基C1-C3烷基，苯基或取代苯基；所涉及的苯环上的取代基为卤素、C1-C3的烷基或烷氧基，取代基在苯环任一位置上的单取代或多取代，在苯环上的取代基相同或不相同；其中，通式I涵盖了如下通式I-1、通式I-2和通式I-3所示的三类化合物通式I-1、I-2、I-3中的R和通式I中的含义相同；通式I-1中的Y表示C1-C3的烷氨基。2.以通式I-1表示的多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物的制备方法(A法)，其特征是使通式B所表示的化合物与原甲酸三乙酯反应生成吡啶醚脒中间体C，C再与d-C6的脂肪伯胺、苯基d-C4垸基伯胺或取代苯基d-C4垸基伯胺或杂环取代d-C2烷基胺反应，在室温或加热条件关环，得到化合物I-1:BCI-1通式B、C及I-1中的Y表示d-C3的烷氨基；RNH2表示d-Q的烷基，杂环基为吡啶、噻吩或呋喃的杂环取代Ci-C2烷基，苯基d-C3烷基或取代苯基d-C3烷基。3.以通式1-2表示的多取代吡啶并[4,3-d]嘧啶衍生物的制备方法(B法)，其特征是使通式D所表示的化合物经水解反应得到化合物I-2:通式D和1-2中的R与权利要求1中的定义相同。4.以通式1-3表示的多取代吡啶并[4，3-d]嘧啶衍生物的制备方法(C法)，其特征是使通式D所表示的化合物经氧化反应得到化合物I-3，通式D和1-3中的R与权利要求1中的定义相同。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>5、权利要求1所述的以通式I表示的化合物的应用，其特征是作为抗肿瘤药物的有效成份。6、权利要求1所述的以通式I表示的化合物的应用，其特征是作为对于人口腔底癌细胞株KB具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。7、权利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于对长春新碱耐药的人口腔底癌细胞KBv200具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。8、权利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人乳腺癌细胞株MCF-7具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。9、权利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于对阿霉素耐药的人乳腺癌细胞株MCF-7/Adr具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。10、权利要求1所述的以通式I表示的化合物的应用，其特征是作为对于人鼻咽癌细胞CNE1具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。11、权利要求1所述的以通式I表示的化合物的应用，其特征是作为对于人H3CSZ、N"、CH3D、NT、CH:I隱2.OH'CH..OHCH3鼻咽癌细胞CNE2具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。12、权利要求1所述的以通式I-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人鼻咽癌细胞6-10B具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。13、权利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人鼻咽癌细胞H0NE1具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。14、权利要求1所述的以通式I-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人鼻咽癌细胞SUNE1具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。15、权利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人肺癌细胞H460具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。16、权利要求1所述的以通式I-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人肺癌细胞Calu-3具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。17、权利要求1所述的以通式1-1表示的化合物的应用，其特征是作为对于人白血病细胞HL-60具有细胞毒活性的抗肿瘤药物的有效成份。全文摘要通式为I的具有抗肿瘤活性的3，7，8-多取代吡啶并[4，3-d]嘧啶衍生物，式中X表示CN，CONH₂；Y表示甲硫基，甲砜基，C₁-C₃的烷氨基；R表示C₁-C₆的烷基，杂环基为吡啶、噻吩或呋喃的杂环取代C₁-C₂烷基，苯基C₁-C₃烷基或取代苯基C₁-C₃烷基，苯基或取代苯基；所涉及的苯环上的取代基主要为卤素、C₁-C₃的烷基或烷氧基，取代基在苯环任一位置上的单取代或多取代，在苯环上的取代基相同或不相同。该化合物对人口腔底癌细胞KB、对长春新碱耐药的人口腔底癌细胞KBv200、人乳腺癌细胞株MCF-7、对阿霉素耐药的人乳腺癌细胞株MCF-7/Adr、人鼻咽癌细胞株6-10B、CNE1、CNE2、HONE1、SUNE1；人肺癌细胞株H460、Calu-3；人白血病细胞株HL-60等多种肿瘤细胞具有显著的抑制作用，可用作抗肿瘤药剂的有效成分。文档编号C07D471/04GK101619063SQ200910062289公开日2010年1月6日申请日期2009年6月2日优先权日2009年6月2日发明者梁永钜,符立梧,莫文妍,贺红武申请人:华中师范大学;中山大学肿瘤防治中心