具有抗癌活性的6-n、n-二羟乙基嘌呤类新化合物及制备方法

专利名称：具有抗癌活性的6-n、n-二羟乙基嘌呤类新化合物及制备方法技术领域：本发明涉及一类具有抗癌活性的6-N、 N-二羟乙基嘌呤类新化合物及制备 方法。属于化学与医药技术领域 背景技术-在现代抗肿瘤治疗药物中，占重要作用的是经改造与修饰的核苷及其 衍生物，其中常见到改造的嘌呤碱基。由于人体基因结构中的嘌呤环具有 相对固定的位置，所以人们相继研究了多种具有嘌呤环结构的药物，例如近年来许多文献报道在嘌呤环上引入不同的功能基团后，所得的嘌呤衍生 物具有抗病毒、抗癌和降血压等重要的生物医学活性。有报道在嘌呤环上的6-C上引入不同的基团，所得的6-取代嘌呤核苷化合物具有一定的抗 癌活性。这类化合物还可作为选择性激酶、抗真菌药物、植物生长的抑制 剂以及巯基丙氨酸组织蛋白酶的抑制剂等。6-N烷基取代嘌呤与6-N羟基 烷基嘌呤类化合物业具有很好的抗癌活性，显著的6-取代氮烷基核苷类 化合物的研究实例为腺苷受体抑制剂N-环戊基腺苷(CPA)和N-环己基腺 苷(CHA)，其结构式如下OH OH CPAOH OH CHA4阿昔洛韦(Acyclovir, ACV)是英国Wdlcoem公司开发的特异性的 抗疱疹病毒的无环核苷类药物，被病毒感染的细胞优先吸收，在体内经胸 腺嘧啶激酶活化为三磷酸型，抑制病毒DNA合成酶。更昔洛韦 (Ganciclovir, GAV)是美国Syntex公司于1988年批准上市的抗病毒无环 鸟苷类似物，其作用机制与ACV相似，抑制病毒DNA合成和复制，但 有骨髓毒性。另外一些无环核苷类药物如喷昔洛韦(Penddovir， PIV)、 二羟丙基腺嘌呤(DHPA)、西多夫韦(Cidofovir)等均己投入临床使用。这些无环核苷共同的结构特征是其侧链末端均保留有可增强其水溶 性的羟基。这些药物的结构式如下-所以开展9位带有不同取代基的，6-N, N-二羟乙基嘌呤类化合物的合成及 生物医学活性研究具有重要的学术意义与广阔的应用前景。 发明内容本发明的目的是针对目前世界上急需合成并寻找新的抗病毒、抗肿瘤 的嘌昤类核苷药物的研究现状，基于很多嘌呤衍生物具有抗病毒、抗癌和降血压等重要的生物医学活性，合成一种具有抗病毒、抗肿瘤活性强的6-n,n-二羟乙基嘌呤新化合物及其制备方法。本发明的技术方案是， 一种具有抗癌活性的6—n、 n—二羟乙基嘌呤类新化合物，其特征在于该类化合物具有以下结构II其中W为h、卤素、HN2或nr 上述nr3中的r3为烯丙基(—CH2CH==CH2)、甲基取代的烯丙基3 CH9CH5^CH,OCH2)或乙基取代的烯丙基(~CH2OCHC二 CHg )其中W为h、苄基或者卤代苄基(烯丙基(入十x)、烯丙基)、甲基、乙基烯丙基()或正丁基(？)(上述的(n)化合物，是r1所代表的不同的取代基与r2所代表的不同 的取代基的任意组合的化合物，以及这些化合物及其在药学上可接受的酸或碱所形成的加成盐。6—n、 n—二羟乙基嘌呤类新化合物的制备方法， 其特征在于合成方法是以9位带有上述112不同取代基的6-氯嘌呤，2，6-二氯嘌呤，2-氨基-6-氯嘌呤，2—N， N—二烯丙基—6氯嘌呤，2—N， N—二甲基烯丙基一6氯嘌呤类化合物(I )为原料，分别在微波辐射下， 以水为溶剂，与二乙醇胺反应，得到6—N、 N—二羟乙基嘌呤类化合物 (II )。所用的微波辐射的微波功率是100-400W，反应时间是5-60分钟。 本发明的6-N, N-二羟乙基嘌呤新化合物的嘌呤环上有羟烷基取代，因而 具有抗病毒和抗肿瘤活性更好的优点，采用在微波辐射下，以水溶剂完成 合成反应，因而具有绿色环保的显著优点。具体实施例本发明更确切的涉及化合物(II)<formula>formula see original document page 7</formula>R1代表下列基团中的一种: H;卤素；NR3;其中的RM戈表烯丙基(—CH2CH = CH2)，或甲基取代的烯丙基JH3 &2CH3 (~CH2(i=CH2)，或是乙基取代的烯丙基(—"CH2C=CH2 )。f代表下列基团的一种苄基或者卤代苄基烯丙基(J ) 甲基烯丙基(>、> 乙基烯丙基(y正丁基)6—N， N—二 (2-羟乙基)嘌呤类化合物的合成，是按照下列步骤进 行的以9位带有上述ie不同取代基的6-氯嘌呤，2， 6-二氯嘌呤，2-氨 基-6-氯嘌呤，2-N， N-二烯丙基-6氯嘌呤，2-N， N-二甲基烯丙基-6氯嘌 呤类化合物(I )为原料，分别在微波辐射下，以水为溶剂，与二乙醇胺 反应，得到6-N,N-二 (2-羟乙基)嘌呤类化合物(11)。所用的微波功率 可以是100-400W，反应时间可以是5—60分钟。在50毫升圆底烧瓶中加入lmmol9-苄基-2， 6-二氯嘌呤、1.5mmo1 二乙醇胺、20 mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为 400 W、反应时间15 min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液 冷却至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N，N-二羟乙基 9-苄基2-氯嘌呤，收率89%。NMR (DMSO, 400 MHz) 3 8.28 (s， 1H), 7.37-7.26 (m, 5H)， 5.35 (s, 2H)， 4.81 (s， 2H), 4.28 (s, 2H)， 3.77 (s， 2H)， 3.67-3.66 (m， 4H).实施例1"CNMR(DMSO, 100 MHz) S 154.2, 152.6， 151.3, 140.5, 136.6, 128.7， 127.7: 127.2, 118.0, 59.8， 58.0， 52.1， 51.4, 46.1.HRMS: calcd for C16H18C1N502 [M + Na+] 370.1047, found 370.1049.实施例2:在50毫升圆底烧瓶中加入1 mmol 9-烯丙基-6-氯嘌呤、1.5 mmol 二 乙醇胺、25mL7jC。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为400 W、反应时间10min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液冷却 至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N，N-二羟乙基9-烯 丙基嘌呤，收率91%。NMR (DMSO, 400 MHz) S 8.20 (s， 1H), 8.13 (s, 1H)， 6.10-6.00 (m， 1H), 5.18 (dd, J = 10.4 Hz， J， =1.2 Hz, 1H), 5.01 (dd， J = 17.2 Hz， J， =1.2 Hz, 1H)， 4.83-4.78 (m， 4H)， 4.27-4.26 (m， 2H), 3,81 (s，lH)， 3.67 (s，lH).13CNMR(DMSO, 100 MHz) S 153.7, 151.7， 150.1, 139.6, 133.2， 118.7， 117.3,58.7, 51.7， 44.7.HRMS: calcd for C12H17N502 [M + Na+] 286.1280， found 286.1280.实施例3:在50毫升圆底烧瓶中加入1 mmol 9-正丁基-6-氯嘌呤、1.5 mmol 二 乙醇胺、30mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为400 W、反应时间15min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液冷却 至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N,N-二羟乙基-9-正9丁基-嘌呤，收率75%。& NMR (CDC13, 400 MHz) S 8.31 (s, 1H), 7.76 (s, 1H)， 4.卯-4.87 (m， 2H)， 4.19 (t, J= 7,2 Hz， 2H)， 4.10 (s， 4H)， 3.98-3.96 (m， 4H)， 1.89-1.82 (m， 2H), 1.39-1.34 (m, 2H), 0.96 (t, J= 7.2 Hz, 3H).13C NMR (CDC13, 100 MHz) 5 155.7， 151.9， 150.6， 138.9, 119.7， 61.4， 52.2, 43.7,31.9， 19.8, 13.4.HRMS: calcd for C13H21N502 [M + Na+] 302.1593, found 302.1592.实施例4:在50毫升圆底烧瓶中加入1 m mol 9-苄基-6-氯嘌呤、1.5 m mol 二乙 醇胺、20mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为300 W、 反应时间20min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液冷却至室 温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N,N-二羟乙基-9-苄基嘌 呤，收率68%。& NMR (CDC13， 400 MHz) S 8.34 (s, IH)， 7.72 (s, 1H) 7.36-7.26 (m, 5H): 5.35 (s， 2H), 4.88 (s, 2H), 4.09 (s， 4H)， 3.97-3.95 (m， 4H).13C NMR (CDC13, 100 MHz) 5 155.9, 152.3, 150.8, 138.8， 135.4， 129.0, 128.4， 127.8， 119.6， 61.5， 583， 52.3， 47.2HRMS: calcd for C16H19N502 [M + Na+〗336.1437， found 336.1436.实施例5:在50毫升圆底烧瓶中加入lmmol9-烯丙基-2， 6-二氯嘌呤、1.5 m10mol 二乙醇胺、20mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率 为200 W、反应时间40min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶 液冷却至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N, N-二羟乙 基9-烯丙基-2-氯嘌呤，收率79%。^鹿R (DMSO, 400 MHz) 5 8.14 (s, 1H)， 6.07-6.01 (m, 1H)， 5.20 (d， 《/= 10.0 Hz， 1H)， 5.02 (d, /= 16.8 Hz, 1H), 4.80-4.75 (m， 4H)， 4.29 (s, 2H)， 3.77 (s,2H), 3.67 (s, 4H).13C NMR (DMSO, 100 MHz) S 154.2， 152.5， 151.2， 140.4， 133.0, 117.8， 117.4, 59.8,58.1,52.1,51.4, 45.0.HRMS: calcd for C12H16C1N502 [M + Na+] 320.0891, found 320.0891.在50毫升圆底烧瓶中加入1 mmo12, 6-二氯嘌呤、L5 m mol 二乙 醇胺、20mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为300 W、 反应时间20min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液冷却至室 温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N,N-二羟乙基-2-氯嘌呤， 收率91%。NMR (DMSO, 400 MHz) S 13.08 (s, IH)， 8.10 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.29 (s, 2H)， 3.77 (s， 2H), 3.67 (s， 4H). 13CNMR(DMSO, 100 MHz) S 154.1, 152.3， 152.1， 138.6, 117.6, 59.9,58.1: 52.1, 51.2. HRMS: calcd for C9H12C1N502 [M + Na+] 280.0578, found 280.0578.11实施例7:在50毫升圆底烧瓶中加入1 m mol 2， 6-二氯嘌呤核苷、1.5 m mol 二 乙醇胺、20mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为300 W、反应时间10min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液冷却 至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N,N-二羟乙基嘌呤， 收率85%。'H NMR (DMSO, 400 MHz) S 8.40 (s， 1H), 5.82 (d, /= 5.6 Hz， 1H), 5.50 (d， J= 6.0 Hz, 1H), 5.22 (d, 7= 4.8 Hz， 1H)， 5.07 (t, 5.6 Hz， 1H), 4.83-4.82 (m， 2H)， 4.50-4.46 (m， 1H), 4.26-4.25 (m， 2H), 4.11-4.09 (m， 1H)， 3.92 ((!, /= 3.6 Hz, 1H)， 3.76-3.75 (m， 2H)， 3.65-3.62 (m， 5H), 3.55-3.51 (m， 1H).13C雨R (DMSO,函MHz) S 154.2， 152.4， 151.1, 138.8, 118.3， 87.2， 85.5, 73.6， 70.2, 61.2, 59.7, 58.0， 52.1, 51.3.HRMS: calcd for C14H20ClN5O6 [M + If] 390.1180， found 390.1180.实施例8:在50毫升圆底烧瓶中加入1 m mol 2-氨基-6-氯嘌呤、1.5 mmol 二乙 醇胺、20mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率为300 W、 反应时间20min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶液冷却至室 温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物6-N,N-二羟乙基-2-氨基嘌 呤，收率83%。'HNMR(DMSO， 400 MHz) S 12.14-12.11 (m， 1H), 7.66 (s, 1H), 5.66 (s， 2H)， 4.80-4.78 (m, 2H), 4.16-4.10 (m, 4H)， 3.80-3.75 (m， 4H).13C NMR (DMSO, 100 MHz) S 159.3, 154.0， 153.3， 134.6， 112.9， 59.8, 51.2. .HRMS: calcd for C9H14N602 [M + 239.1256, found 239.1254. 实施例9:在50毫升圆底烧瓶中加入1 m mol 9- (2-氯苯甲基)-6-氯嘌呤、1.5 m mol 二乙醇胺、25mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中，设置反应功率 为400 W、反应时间10min。用TLC跟踪反应，终止反应后，将反应溶 液冷却至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物9-(2-氯苯甲基) -6^,:^-二羟乙基9-烯丙基嘌呤，收率61%。^NMR (CDC13， 400廳z) S 8.27 (s， 1H), 7.75 (s， 1H)， 7.37-7.15 (m， 4H), 5.41 (s， 2H), 4.68 (s, 2H), 4.03 (s， 4H)， 3.91-3.89 (m, 4H).13C NMR (CDC13，腦MHz)S 155.9, 152.2， 150.8, 139.0, 133.3， 132.9， 130.1, 129.9, 129.8, 127.4, 119.5， 61.5, 52.2, 44.8.HRMS: calcd for C16H18C1N502 [M + Nal 370.1047, found 370.1047.实施例10:在50毫升圆底烧瓶中加入1 m mol 9-烯丙基-2- (N， N-二烯丙基)-6-氯嘌呤、1.5mmol 二乙醇胺、25mL水。将该烧瓶放置于微波反应器中， 设置反应功率为400 W、反应时间10min。用TLC跟踪反应，终止反应 后，将反应溶液冷却至室温，减压蒸馏。然后经柱层析获得目标化合物9-烯丙基-2- (N， N-二烯丙基)-6-N, N-二羟乙基9-烯丙基嘌呤，收率57%。'H固R (DMSO, 400 MHz) S 7.45 (s, 1H), 6.00-5.95 (m， 1H), 5.90-5.83 (m， 2H), 5.28-5.11 (m, 6H), 4.63 (d， 《/= 6 Hz， 2H)， 4.20 (d， 5.6 Hz, 4H)， 4.03 (s， 4H), 3.94-3.92 (m, 4H)。13C NMR (DMSO， 100 MHz) S 158.0, 156.3, 153.2, 136.0, 134.6, 132.2， 118.6, 115.9, 113.2, 61.4, 51.0, 49.3, 45.2.HRMS: calcd for C18H26N6。2 [M + tf] 359.2195, found 359.2196-N,N-二 (2-羟乙基)嘌呤类化合物的抗癌活性实验如下用磺酰罗丹明B(SRB)法在体外对人癌细胞增殖的抑制作用进行了测定 分别将生长情况良好的、处于对数生长期的人白血病(HL-60)、人肝癌 (Bel-7402)和人胃癌(BGC-823)细胞以1X1(^个/mL浓度接种于96孔板，在 5%002培养箱中37'C培养24小时。弃去旧液，换新培养液，加入经灭菌处 理的二甲基亚砜溶解的30|jmol/L测试化合物，继续培养48小时，然后去上 清液，每个小孔中加入100)JI 10%的三氯乙酸(TCA)，静止10分钟，再于 4'C保持1小时进行固定。然后去掉固定液，每个小孔用水洗5遍。待室温干 燥后，在每个小孔中加入0.4。/。SRB100L，室温放置10分钟，用1%的醋酸 (HOAc)洗涤5遍，置于空气中干燥后，加入10mMTris200l/每孔，振荡溶 解，于540nm波长处测定OD值。结果表明，在30(jmol/L时上述十个实施例中的化合物对人白血病(HL-60)、 人胃癌(BGC-823)、人肝癌(Bel-7402)3种人癌细胞增殖都有抑制作用。1权利要求1、一种具有抗癌活性的6-N、N-二羟乙基嘌呤类新化合物，其特征在于该类化合物具有以下结构其中R1为H、卤素、HN2或NR3；上述NR3中的R3为烯丙基(-CH2CH＝CH2)、甲基取代的烯丙基 id="icf0002" file="A2009100643700002C2.tif" wi="34" he="10" top= "131" left = "23" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>或乙基取代的烯丙基 id="icf0003" file="A2009100643700002C3.tif" wi="38" he="10" top= "130" left = "106" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>其中R2为H、苄基或者卤代苄基 id="icf0004" file="A2009100643700002C4.tif" wi="31" he="16" top= "146" left = "103" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>烯丙基 id="icf0005" file="A2009100643700002C5.tif" wi="15" he="12" top= "150" left = "154" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>甲基烯丙基 id="icf0006" file="A2009100643700002C6.tif" wi="35" he="12" top= "171" left = "32" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>乙基烯丙基 id="icf0007" file="A2009100643700002C7.tif" wi="28" he="16" top= "167" left = "97" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>或正丁基 id="icf0008" file="A2009100643700002C8.tif" wi="15" he="15" top= "169" left = "150" img-content="drawing" img-format="tif" orientation="portrait" inline="yes"/>2、 根据权力要求1的式(II)化合物，是R1所代表的不同的取代基 与R2所代表的不同的取代基的任意组合的化合物，以及这些化合物及其在 药学上可接受的酸或碱所形成的加成盐。3、 6—N、 N—二羟乙基嘌呤类新化合物的制备方法，其特征在于合成方法是以9位带有上述RS不同取代基的6-氯嘌呤，2， 6-二氯嘌呤，2-氨 基-6-氯嘌呤，2—N， N—二烯丙基—6氯嘌呤，2—N， N—二甲基烯丙基一6 氯嘌呤类化合物(I )为原料，分别在微波辐射下，以水为溶剂，与二乙醇 胺反应，得到6—N、 N—二羟乙基嘌呤类化合物(11)。4、根据权利要求3的6—N、 N—二羟乙基嘌呤类新化合物的制备方法， 其特征在于所用的微波辐射的微波功率是100-400W，反应时间是5-60分 钟。全文摘要本发明公开了一类具有抗癌活性的6-N，N-二羟乙基嘌呤类新化合物。本发明属于一种有抗癌活性的化合物，本发明的6-N，N-二羟乙基嘌呤类新化合物(II)，其制备方法是，用化合物(II)为原料在微波照射下，以水位溶剂，与二乙醇胺反应得到6-N，N-二羟乙基嘌呤类新化合物(II)。本发明用于癌症的治疗。文档编号C07D473/40GK101492449SQ200910064370公开日2009年7月29日 申请日期2009年3月3日 优先权日2009年3月3日发明者静 吴, 吴艳艳, 凤 张, 杨西宁, 渠桂荣, 王东超, 王秀强, 郭海明 申请人:河南师范大学;新乡拓新生化科技有限公司