细胞色素c粗品生产工艺的制作方法

专利名称：细胞色素c粗品生产工艺的制作方法技术领域：本发明属于生物化学工程，涉及一种从动物心脏提取细胞色素C粗品的生产工艺。现有的生产工艺，包括原料处理，一次提取，二次提取，吸附，沸石的清洗，洗脱，盐析，沉淀，透析等工艺步骤，这种工艺，吸附时间长，回收效率低，容易造成母液变质。本发明的任务是提供一种分层沉淀，动态柱法吸附的工艺，缩短了吸附时间，提高了回收效率。本发明的任务是这样完成的，将动物心脏经过处理，提取母液，将澄清母液加入装有沸石的交换柱中，交换柱下端有排水孔，母液自上而下，缓缓流经沸石，从排水孔排出，使沸石得以充分吸收母液中的细胞色素C，再把沸石经洗脱，盐析、沉淀、透析之后即得细胞色素C粗品。实施例1、原料处理将动物心脏切除血管、绞碎，2、一次提取把心脏碎肉，按重量加入1.5倍去离子水，用2N硫酸铵调PH3.8-4.8，除去脂肪，再加2N的NH3OH调PH6.0-6.2，离心将液体离出后再用2NNH3OH调PH7.5。3、二次提取把一次提取后的心渣，用一次提取的工艺再提取离心液，与一次提取的离心液合并。4、吸附将离心液加防腐剂，放入沉淀桶，自然沉淀，约6小时，把上部澄清母液与下部糊状液体分开，下部糊状液体，可以与一、二次提出中的心渣合并，再次提取，上部澄清母液加入有沸石的交换柱，母液自上而下缓缓流经沸石，交换柱下部有排水孔，经沸石吸附后的液体自排水孔流出，为了提高吸附效率，经沸石吸附后的液体，可以再次经过交换柱吸附。5、沸石的清洗将吸附有细胞色素C的沸石，用清水洗涤，洗涤后将沸石装入洗脱柱中。6、洗脱用25%的硫酸铵溶液，加入洗脱柱中，收集流出的红色洗脱液。7、盐析将洗脱液加入固体硫酸铵，搅拌，溶解，用折叠纸过滤，滤液为红色清溶液。8、沉淀在搅拌下缓缓加入三氯醋酸溶液，离心，使细胞色素C与三氯醋酸结合，自然沉淀，收集沉淀物，9、透析将沉淀物用低温蒸馏水溶解，装入透析袋，用离子水冲洗透析得透析液，用滤纸过滤透析液，即得细胞色素C粗品。本发明具有操作简单，生产时间短，吸附效率高的优点。权利要求1.一种细胞色素C粗品生产工艺，由原料处理，一次提取，二次提取、吸附，沸石的清洗、洗脱、盐析、沉淀、透析等工艺步骤，其特征是吸附工艺采用动态吸附，将动物心脏经过处理，提取母液，将澄清母液加入装有沸石的交换柱中，交换柱下端有排水孔，母液自上而下，缓缓流经沸石，从排水孔排出，使沸石得以充分吸附母液中的细胞色素C。2.一种细胞色素C粗品生产工艺，其特征是从排水孔排出的液体，可以再次用交换柱吸附。全文摘要本发明属于生物化学工程技术领域，涉及一种从动物心脏中提取细胞色素C粗品的生产工艺，它由原料处理、一次提取、二次提取、吸附、沸石的清洗、洗脱、盐析、沉淀、透析等工艺步骤完成，其特征是吸附工艺采用分层沉淀动态吸附的方法，这样可以缩短吸附时间，提高吸附效率，避免了因吸附时间过长而造成母液变质。文档编号C07K1/14GK1106019SQ9411075公开日1995年8月2日 申请日期1994年8月4日 优先权日1994年8月4日发明者陈庆功 申请人:陈庆功