一种高通量WesternBlot单抗筛选装置及其筛选方法与流程

本发明涉及实验设备领域，具体涉及一种高通量western blot单抗筛选装置及其筛选方法。

背景技术：

1、免疫印迹实验(western blot)是目前实验室进行免疫检测最常用的实验方法之一。western blot实验流程繁琐，工作量大，如果对多个样品同时进行检测，需将转印之后的膜一条条剪下，分别放入一抗的小孵育盒子或者杂交袋；再分别加入对应的二抗分别孵育；实验过程中需要在每张膜条上做标记，一旦标记错误或记录错误都会造成麻烦。

2、现有技术的部分孵育器采用物理分隔的方式将膜分割成小室，对应待孵育抗体通过注液孔直接注入小室孵育，可整张膜进行western blot实验，但是这种孵育器的膜由于是整张放置，在膜下方容易出现气泡，需要手动一一去除，这个过程容易导致膜破损，并且由于是整张膜进行孵育，注入的抗体工作液仍需分开，分开后还需防止各小室之间的液体互相渗入，而通过上盖与底板之间压力隔绝的各个小室，在实验人员对这个压力是否足够进行判断时，仅能凭借经验进行，常出现压力不够导致渗液的情况，严重影响实验结果以及实验进度。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种高通量western blot单抗筛选装置及其筛选方法，以解决现有技术中导致的上述多项缺陷。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种单抗筛选装置，包括底板、上盖，所述底板与上盖之间通过在二者四角处设置的螺栓结构连接，所述底板的上表面上设有橡胶垫，所述上盖上正对橡胶垫的位置处设有注液孔结构，所述注液孔结构中设有并排且平行设置的若干分隔槽，所述分隔槽的两端均设有毛细孔，所述上盖的两侧设有对称设置轨道结构，所述轨道结构内设有能够自由滚动的辊子，所述辊子能够在底板与上盖之间互相锁紧时被压力带动在轨道结构内移动，所述轨道结构的末端设有顶块，所述顶块在辊子移动至轨道结构的末端时将辊子抬起并封堵住指示结构，使指示结构内的液体不在流出。

3、优选的，所述底板上设有互相垂直设置的挡块。

4、优选的，所述上盖上位于轨道结构的末端处设有容纳槽。

5、优选的，所述橡胶垫的表面积大于注液孔结构的投影面积，所述毛细孔分别位于分隔槽的两端并且分别用于抗体工作液的注入与排出。

6、优选的，所述轨道结构包括固定座与轨道，所述固定座固定安装在上盖的两侧边缘处，所述轨道为水平向上倾斜设置并且在靠近容纳槽的一端为最高处。

7、优选的，所述辊子的两端为导向段，中间为辊压段，所述辊压段的直径大于导向段，所述辊子的两端设有限位柱。

8、优选的，所述顶块固定安装在底板的两侧面上，所述顶块的顶面处设有凹槽，所述凹槽位于指示结构的正下方。

9、优选的，所述指示结构包括存液管、导向管、密封垫以及封堵块，所述存液管固定安装在上盖内并且底部连接在导向管上，所述导向管通过密封垫固定安装在容纳槽内并且密封垫，所述封堵块通过两侧的滑动块滑动安装在容纳槽内并且在向上移动后能够封堵住导向管。

10、一种单抗的筛选方法，其特征在于：包括以下步骤：

11、s1.一抗孵育，包括以下步骤：

12、a.松开螺栓结构使上盖与底板不再挤紧橡胶垫，在橡胶垫上涂抹封闭液使橡胶垫表面润湿；

13、b.将免疫印迹膜平铺在橡胶垫上；

14、c.拧动螺栓结构使上盖向下移动，移动过程中会使辊子受力沿着轨道自一端向另一端移动，移动过程中会碾过免疫印迹膜，使膜平整并除去免疫印迹膜与橡胶垫之间的残留空气，直到移动到轨道末端；

15、d.在存液管内注入指示用的液体，这些液体会通过导向管缓慢渗出，并被密封垫吸收，存液管内液面下降；

16、e.继续拧动螺栓结构，使上盖继续下压，此时顶块推动辊子进入容纳槽并挤压封堵块，通过封堵块封堵住导向管，存液管内液面不再下降，表明上盖与橡胶垫的挤压程度能够防止液体渗出；

17、f.通过注液孔向分隔槽内注入抗体工作液，静置孵育；

18、g.排出抗体工作液，向分隔槽内加洗涤液进行清洗，重复3-5次；

19、s2：二抗孵育；

20、s3：底物显色；

21、h.松开螺栓结构，取下上盖，将免疫印迹膜置入洗涤液中洗涤3-5次；

22、i.将免疫印迹膜放在干净的显色板上，加入底物曝光，或者通过化学发光仪显色。

23、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

24、1.本发明设置了多道与橡胶垫挤贴后能够形成半圆形封闭结构的分隔槽，能够在同一个免疫印迹膜上进行多种抗体的检测，极大的提供检测效率；

25、2.设置的辊子能够在上盖与底板锁紧的过程中逐渐移动，去除免疫印迹膜与橡胶垫之间的空气，帮助免疫印迹膜平整的同时，还能防止出现破损；

26、3.设置在辊子移动到轨道末端时，通过继续锁紧，使辊子从辊压件变为挤压件，通过挤压阻止存液管内的指示液渗出，进而帮助实验人员判断上盖与橡胶垫之间的挤压是否足够防止分隔槽中的液体渗出。

技术特征：

1.一种单抗筛选装置，其特征在于：包括底板(1)、上盖(2)，所述底板(1)与上盖(2)之间通过在二者四角处设置的螺栓结构连接，所述底板(1)的上表面上设有橡胶垫(3)，所述上盖(2)上正对橡胶垫(3)的位置处设有注液孔结构(4)，所述注液孔结构(4)中设有并排切平行设置的若干分隔槽(41)，所述分隔槽(41)的两端均设有毛细孔(42)，所述上盖(2)的两侧设有对称设置轨道结构(5)，所述轨道结构(5)内设有能够自由滚动的辊子(6)，所述辊子(6)能够在底板(1)与上盖(2)之间互相锁紧时被压力带动在轨道结构(5)内移动，所述轨道结构(5)的末端设有顶块(7)，所述顶块(7)在辊子(6)移动至轨道结构(5)的末端时将辊子抬起并封堵住指示结构(8)，使指示结构(8)内的液体不在流出。

2.根据权利要求1所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述底板(1)上设有互相垂直设置的挡块(11)。

3.根据权利要求1所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述上盖(2)上位于轨道结构(5)的末端处设有容纳槽(21)。

4.根据权利要求1所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述橡胶垫(3)的表面积大于注液孔结构(4)的投影面积，所述毛细孔(42)分别位于分隔槽(41)的两端并且分别用于抗体工作液的注入与排出。

5.根据权利要求2所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述轨道结构(5)包括固定座(51)与轨道(52)，所述固定座(51)固定安装在上盖(2)的两侧边缘处，所述轨道(52)为水平向上倾斜设置并且在靠近容纳槽(21)的一端为最高处。

6.根据权利要求1所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述辊子(6)的两端为导向段，中间为辊压段，所述辊压段的直径大于导向段，所述辊子(6)的两端设有限位柱(61)。

7.根据权利要求1所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述顶块(7)固定安装在底板(1)的两侧面上，所述顶块(7)的顶面处设有凹槽(71)，所述凹槽(71)位于指示结构(8)的正下方。

8.根据权利要求2所述的一种单抗筛选装置，其特征在于：所述指示结构(8)包括存液管(81)、导向管(82)、密封垫(83)以及封堵块(84)，所述存液管(81)固定安装在上盖(2)内并且底部连接在导向管(82)上，所述导向管(82)通过密封垫(83)固定安装在容纳槽(21)内并且密封垫(83)，所述封堵块(84)通过两侧的滑动块(85)滑动安装在容纳槽(21)内并且在向上移动后能够封堵住导向管(82)。

9.利用权利要求1-8任一项所述的筛选装置进行单抗筛选的方法，其特征在于：包括以下步骤：

技术总结本发明公开了一种高通量Western Blot单抗筛选装置及其筛选方法，涉及实验设备领域，包括底板、上盖，所述底板与上盖之间通过在二者四角处设置的螺栓结构连接，所述底板的上表面上设有橡胶垫，所述上盖上正对橡胶垫的位置处设有注液孔结构，所述注液孔结构中设有并排切平行设置的若干分隔槽，所述分隔槽的两端均设有毛细孔，所述上盖的两侧设有对称设置轨道结构，所述轨道结构内设有能够自由滚动的辊子，所述辊子能够在底板与上盖之间互相锁紧时被压力带动在轨道结构内移动，所述轨道结构的末端设有顶块，所述顶块在辊子移动至轨道结构的末端时将辊子抬起并封堵住指示结构，使指示结构内的液体不在流出，本发明设置了多道与橡胶垫挤贴后能够形成半圆形封闭结构的分隔槽，能够在同一个免疫印迹膜上进行多种抗体的检测，极大的提供检测效率。技术研发人员：崔志辉,吴佳佳,陈昌慧受保护的技术使用者：南京优宁维生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/5