一种盐酸美金刚片中DMAG杂质的检测方法与流程

本发明涉及制剂，特别涉及一种盐酸美金刚片中dmag杂质的检测方法。

背景技术：

1、盐酸美金刚片，原料药为盐酸美金刚，化学名称为1-氨基-3，5-二甲基金刚烷胺盐酸盐，分子式：c12h21n·hcl，分子量：215.77。盐酸美金刚片的适应症为治疗中重度至重度阿尔茨海默型痴呆。

2、美金刚分子中包含-nh2属于比较活泼基团，易与其他物质反应，如美拉德反应(是氨基化合物与还原糖之间发生的非酶促褐变反应)，产生次要产物n-(二甲基金刚烷)甘氨酸(简写：dmag)。n-(二甲基金刚烷)甘氨酸(dmag)是盐酸美金刚片中已知的杂质之一。首先，系统适应性和线性是评估分析方法性能的重要指标。然而，当前系统的适应性和线性仍有待改善。其次，传统检测方法，色谱洗脱时间较长，使用三氟乙酸配制流动相，毒性大。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明提出一种盐酸美金刚片中dmag杂质的检测方法，解决上述问题。

2、本发明的技术方案是这样实现的：

3、一种盐酸美金刚片中dmag杂质的检测方法，所述dmag杂质为n-(二甲基金刚烷)甘氨酸，采用液质联用色谱法进行测定dmag的含量；高效液相色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.08～0.12％v/v甲酸水溶液为流动相a，甲醇为流动相b；进行线性梯度洗脱，线性梯度洗脱程序：在0min～3.0min内流动相a和流动相b的体积比保持在54～56:46～44；在3.0min～3.1min内流动相a和流动相b的体积比逐渐从54～56:46～44下降至19～21:81～79；在3.1min～4.0min内流动相a和流动相b的体积比保持在19～21:81～79；在4.0min～4.1min内流动相a和流动相b的体积比逐渐从19～21:81～79上升至54～56:46～44；在4.1min～5.0min内流动相a和流动相b的体积比保持在54～56:46～44。

4、进一步的，所述线性梯度洗脱程序具体为：

5、 时间/min 流动相a(v/v，％) 流动相b％(v/v，％) 0.0 55 45 3.0 55 45 3.1 20 80 4.0 20 80 4.1 55 45 5.0 55 45

6、进一步的，高效液相色谱条件还包括：流速为0.2-0.4ml/min，柱温为45-50℃，进样量0.9-1.1μl；优选流速为0.3ml/min，柱温为50℃，进样量1μl。

7、进一步的，所述色谱柱的型号为behc18，规格为100mm×2.1mm，填充剂的粒径为1.7μm。

8、进一步的，配制对照品溶液、供试品溶液使用的稀释剂为体积比为45～55:45～55甲醇-水。

9、进一步的，质谱条件：离子化模式h-esi，离子喷雾电压3000v，保护气流30arb，辅助气流5arb，气化温度350℃，毛细管温度325℃，检测模式srm(+)。

10、进一步的，质谱扫描参数见下：

11、 化合物 极性 母离子质荷比(m/z) 子离子质荷比(m/z) 碰撞能量(v) 射频电压(v) dmag 正离子 238 163 16 75

12、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

13、(1)采用本发明盐酸美金刚片中dmag杂质的检测方法，美金刚与dmag杂质之间的分离效果较好，具有良好的分离度，其中主峰与dmag杂质峰分离度3.57，峰型对称性良好，在系统适用性溶液中，n-(二甲基金刚烷)甘氨酸(dmag)的峰值相对标准偏差(rsd)较小，线性溶液的测定结果显示相关系数r＝0.9999，表明本发明的检测方法具有很好的适用性。本发明有效改善检测方法的准确性和稳定性，可更准确、可靠地对盐酸美金刚片中dmag杂质进行分析。

14、(2)采用本发明的检测方法，在取得良好的效果前提下，缩短色谱洗脱时间，而且避免了传统使用毒性较大的三氟乙酸作为流动相，提高了检测的安全性。

技术特征：

1.一种盐酸美金刚片中dmag杂质的检测方法，所述dmag杂质为n-(二甲基金刚烷)甘氨酸，其特征在于，采用液质联用色谱法进行测定dmag的含量；高效液相色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.08～0.12％v/v甲酸水溶液为流动相a，甲醇为流动相b，进行线性梯度洗脱；线性梯度洗脱程序：在0min～3.0min内流动相a和流动相b的体积比保持在54～56:46～44；在3.0min～3.1min内流动相a和流动相b的体积比逐渐从54～56:46～44下降至19～21:81～79；在3.1min～4.0min内流动相a和流动相b的体积比保持在19～21:81～79；在4.0min～4.1min内流动相a和流动相b的体积比逐渐从19～21:81～79上升至54～56:46～44；在4.1min～5.0min内流动相a和流动相b的体积比保持在54～56:46～44。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述线性梯度洗脱程序具体为：

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，高效液相色谱条件还包括：流速为0.2-0.4ml/min，柱温为45-50℃，进样量0.9-1.1μl。

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，高效液相色谱条件还包括：流速为0.3ml/min，柱温为50℃，进样量1μl。

5.根据权利要求1或3所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的型号为behc18，规格为100mm×2.1mm，填充剂的粒径为1.7μm。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，配制系统适用性溶液、对照品溶液、供试品溶液使用的稀释剂为体积比为45～55:45～55甲醇-水。

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，质谱条件：离子化模式h-esi，离子喷雾电压3000v，保护气流30arb，辅助气流5arb，气化温度350℃，毛细管温度325℃，检测模式srm(+)。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，质谱扫描参数见下：

技术总结本发明提供一种盐酸美金刚片中DMAG杂质的检测方法。所述DMAG杂质为N‑(二甲基金刚烷)甘氨酸，采用液质联用色谱法进行测定DMAG的含量；高效液相色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.08～0.12％v/v甲酸水溶液为流动相A，甲醇为流动相B；进行线性梯度洗脱，线性梯度洗脱程序：在0min～3.0min内流动相A和流动相B的体积比保持在54～56:46～44；在3.0min～3.1min内流动相A和流动相B的体积比逐渐从54～56:46～44下降至19～21:81～79；在3.1min～4.0min内流动相A和流动相B的体积比保持在19～21:81～79；在4.0min～4.1min内流动相A和流动相B的体积比逐渐从19～21:81～79上升至54～56:46～44；在4.1min～5.0min内流动相A和流动相B的体积比保持在54～56:46～44。本发明有效改善检测方法的准确性和稳定性，可更准确、可靠地对盐酸美金刚片中DMAG杂质进行分析。技术研发人员：陈湘,林洁希,林尤仁受保护的技术使用者：海南林恒制药股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/27