自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料及制备方法和应用

本发明涉及新材料领域，特别是涉及自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料及制备方法和应用。

背景技术：

1、电动力疗法通过金属离子表面发生的水分子解离反应，在电场作用下按需产生细胞毒性羟基自由基。不同于其他动力学疗法，电动力疗法以广泛存在的水为底物，在电场作用下能持续产生活性氧(ros)，克服了其他动力学治疗中ros生成效率有限问题，且不会加重肿瘤区域的乏氧。然而，单独的电动力疗法在免疫抑制微环境中很难实现长期的肿瘤抑制，而且氧化应激水平的升高会诱发癌细胞产生保护性自噬。自噬通过清除羟基自由基、灭活蛋白以及受损细胞器来减少毒性损伤，同时自噬产生的产物还可以为癌细胞提供能量，显著提高癌症细胞的耐药性，促进癌细胞的生存，使肿瘤治疗得到适得其反的效果。

技术实现思路

1、针对上述技术问题，本发明提供一种自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料，利用该纳米材料，通过调控免疫微环境以及实现增强的电动力治疗共同发挥对肿瘤的长期抑制作用，实现对大体积肿瘤的有效治疗，为电动力疗法进行协同治疗提供新策略。

2、为了达到上述目的，本发明提供了一种自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料，包括自噬抑制剂和载体，所述载体为铂铱纳米颗粒，所述自噬抑制剂与所述载体中铂的质量比为1：(7-13)。

3、针对上述技术问题，本发明人在研究过程中发现，动力学疗法大多依赖于肿瘤微环境中的氧气、过氧化氢等来产生具有细胞毒性的氧自由基和羟基自由基，但乏氧微环境极大限制了ros的产生效率，这是导致肿瘤对动力学疗法产生耐药的根本原因，因此，克服动力学疗法对肿瘤微环境氧浓度的依赖性对乏氧耐药肿瘤的治疗具有重大意义。在动力学疗法中，癌细胞通过自噬减轻氧化损伤和肿瘤微环境中免疫抑制细胞的大量浸润，极大阻碍了动力学疗法对肿瘤细胞的杀伤作用。因此，本发明人提出将自噬抑制剂装载于铂铱纳米颗粒，搭建抑制自噬与电动力疗法协同治疗肿瘤平台，将抑制自噬应用于电动力治疗中，通过自噬抑制剂氯喹的自噬抑制功能，阻断电动力疗法诱发的保护性自噬，从而增强电动力疗法造成的氧化应激损伤。同时电动力疗法诱发免疫原性细胞死亡(icd)效应，氯喹诱导肿瘤相关巨噬细胞(tams)向m1型极化，重塑肿瘤免疫微环境，实现协同免疫治疗和抗肿瘤作用。

4、在其中一个实施例中，所述铂铱纳米颗粒主要由氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物通过一锅法制备得到，所述氯铂酸六水合物与所述氯化铱(ⅲ)水合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1。

5、在其中一个实施例中，所述铂铱纳米颗粒的制备方法包括以下步骤：将表面吸附剂、稳定剂、水混合，热浴，加入氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂，进行合成反应，得到铂铱纳米颗粒；

6、所述表面吸附剂、稳定剂、氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂的质量比为(45-55)：(3-7)：(1.5-2)：1：(10-15)。

7、在其中一个实施例中，所述表面吸附剂包括溴化钾、氯化钾、氯化钠、碘化钾、碘化钠、草酸钾、草酸钠、溴化钠中的至少1种；所述自噬抑制剂包括氯喹、羟氯喹、3-甲基腺嘌呤、巴弗洛霉素a1中的至少1种；所述稳定剂包括泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮中的至少1中；所述还原剂包括抗坏血酸、柠檬酸钠、酒石酸钾、硼氢化钠、甲醛中的至少1种。

8、上述表面吸附剂可选择性与金属的特定晶面吸附，控制纳米粒子的形貌。

9、在其中一个实施例中，所述自噬抑制剂包括氯喹。

10、为了实现对肿瘤的有效消融，选择含有氯喹(cq)的自噬抑制剂，cq抑制癌细胞发生保护性自噬，增加癌细胞对电动力疗法的敏感性，协同增强对肿瘤的杀伤作用；除此外，电动力疗法可诱发免疫原性细胞死亡，cq诱导tams向m1型极化，重塑肿瘤免疫微环境，实现协同免疫治疗。

11、本发明还提供了所述的纳米材料的制备方法，包括以下步骤：制备铂铱纳米颗粒，装载自噬抑制剂。

12、在其中一个实施例中，所述铂铱纳米颗粒主要由氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物通过一锅法制备得到，所述氯铂酸六水合物与所述氯化铱(ⅲ)水合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1。

13、在其中一个实施例中，所述制备铂铱纳米颗粒包括以下步骤：将表面吸附剂、稳定剂、水混合，热浴，加入氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂，进行合成反应，得到铂铱纳米颗粒；

14、所述装载自噬抑制剂包括以下步骤：将自噬抑制剂与铂铱纳米颗粒混合，搅拌，离心，取沉淀，得到自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料。

15、在其中一个实施例中，所述表面吸附剂、稳定剂、氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂的质量比为(45-55)：(3-7)：(1.5-2)：1：(10-15)；

16、所述自噬抑制剂与所述载体中铂的质量比为1：(7-13)；

17、所述热浴为65-75℃的油浴，所述合成反应的时间为10-14h。

18、本发明还提供了一种用于电动力治疗的设备，该设备包括发生器、放大器、万用表、铂电极、盐桥和所述纳米材料，所述纳米材料与盐桥形成闭环通路。

19、在其中一个实施例中，所述纳米材料装填于腔室中。

20、在其中一个实施例中，采用12孔板提供腔室，将12孔板位于中间的孔作为腔室，用于装填纳米材料，将12孔板位于两侧的孔装填缓冲液，盐桥为双盐桥，与纳米材料形成闭环通路。

21、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

22、本发明的一种自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料及制备方法和应用，利用该纳米材料，通过调控免疫微环境以及实现增强的电动力治疗共同发挥对肿瘤的长期抑制作用，实现对大体积肿瘤的有效治疗，为电动力疗法进行协同治疗提供新策略。

技术特征：

1.一种自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料，其特征在于，包括自噬抑制剂和载体，所述载体为铂铱纳米颗粒，所述自噬抑制剂与所述载体中铂的质量比为1：(7-13)。

2.根据权利要求1所述的纳米材料，其特征在于，所述铂铱纳米颗粒主要由氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物通过一锅法制备得到，所述氯铂酸六水合物与所述氯化铱(ⅲ)水合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1。

3.根据权利要求2所述的纳米材料，其特征在于，所述铂铱纳米颗粒的制备方法包括以下步骤：将表面吸附剂、稳定剂、水混合，热浴，加入氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂，进行合成反应，得到铂铱纳米颗粒；

4.根据权利要求3所述的纳米材料，其特征在于，所述表面吸附剂包括溴化钾、氯化钾、氯化钠、碘化钾、碘化钠、草酸钾、草酸钠、溴化钠中的至少1种；所述自噬抑制剂包括氯喹、羟氯喹、3-甲基腺嘌呤、巴弗洛霉素a1中的至少1种；所述稳定剂包括泊洛沙姆、聚乙烯吡咯烷酮中的至少1中；所述还原剂包括抗坏血酸、柠檬酸钠、酒石酸钾、硼氢化钠、甲醛中的至少1种。

5.权利要求1-4中任一项所述的纳米材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：制备铂铱纳米颗粒，装载自噬抑制剂。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述铂铱纳米颗粒主要由氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物通过一锅法制备得到，所述氯铂酸六水合物与所述氯化铱(ⅲ)水合物的摩尔比为(0.8-1.2)：1。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述制备铂铱纳米颗粒包括以下步骤：将表面吸附剂、稳定剂、水混合，热浴，加入氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂，进行合成反应，得到铂铱纳米颗粒；

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述表面吸附剂、稳定剂、氯铂酸六水合物、氯化铱(ⅲ)水合物、还原剂的质量比为(45-55)：(3-7)：(1.5-2)：1：(10-15)；

9.一种用于电动力治疗的设备，其特征在于，该设备包括发生器、放大器、万用表、铂电极、盐桥和权利要求1-4中任一项所述的纳米材料，所述纳米材料与盐桥形成闭环通路。

技术总结本发明涉及一种自噬抑制剂协同电动力疗法的纳米材料，涉及新材料领域。该纳米材料包括自噬抑制剂和载体，载体为铂铱纳米颗粒，自噬抑制剂与载体中铂的质量比为1：(7‑13)。利用该纳米材料，通过调控免疫微环境以及实现增强的电动力治疗共同发挥对肿瘤的长期抑制作用，实现对大体积肿瘤的有效治疗，为电动力疗法进行协同治疗提供新策略。技术研发人员：江珊珊,陈帅君,许熠铭,于梦,张凤玲,徐琴琴受保护的技术使用者：南方医科大学珠江医院技术研发日：技术公布日：2024/9/2