抗病毒组合物和方法

本申请大体上涉及抗病毒组合物和方法。更具体地，本申请涉及用于治疗和预防病毒发明的包含植物momo30蛋白的抗病毒组合物。

背景技术：

1、常规的hiv治疗方法，高活性抗逆转录病毒疗法(haart)，涉及抗逆转录病毒药物的组合使用，例如bictegravir/tenofovir alafenamide/恩曲他滨(biktarvy)，dolutegravir(tivicay)加替诺福韦/恩曲他滨(truvada)，拉替拉韦(isentress)加替诺福韦/恩曲他滨(truvada)，以及阿巴卡韦/dolutegravir/拉米夫定。haart可以将血浆病毒载量更长时间地减少到无法检测的水平。平均而言，在约12个月的治疗后，有50％的患者的血浆病毒载量降至50拷贝/ml以下。但是，包括haart在内的抗病毒治疗并非没有缺陷，其不能保证长期治愈。

2、抑制病毒载量和减缓cd4计数的减少可以延长相对正常寿命的时间。但是，即使是较新的haart制剂也具有相关的毒性和产生抗逆转录病毒耐药性的风险。最重要的是，必须在患者的一生中维持治疗以保持其作用。在大多数情况下，停用haart会导致病毒载量反弹和疾病进展。维持haart成本很高，超出了第三世界国家许多个人的承受能力。在艾滋病毒/艾滋病发病率最高的非洲人口中尤其如此。

3、鉴于上述情况，需要用于治疗hiv和其他病毒感染的改良且成本更低的治疗选择。特别地，需要可以短期施用并且可长期抑制病毒载量的治疗。

技术实现思路

1、一方面，本申请涉及包含或表达momo30蛋白的组合物。momo30蛋白的大小约为30kda，能够结合hiv gp 120，对加热和蛋白酶处理均稳定，在治疗水平对细胞无毒，并可以阻止病毒糖蛋白与细胞受体的相互作用，导致包膜病毒(如hiv-1)的失活。

2、在另一方面，本申请涉及用于预防或减轻hiv感染的症状的方法，该方法包括向有此需要的受试者口服施用有效量的momo30蛋白组合物，所述momo30蛋白组合物通过包括下述步骤的方法制备：(a)干燥包含momo30蛋白的植物；(b)在水性介质中提取干燥的植物；(c)裂解来自提取的植物中的细胞以形成植物细胞裂解液；(d)将植物细胞裂解液离心以除去碎片和微粒，以形成澄清的植物细胞裂解液；(e)通过以下方式形成momo30蛋白组合物：(i)使澄清的植物细胞裂解液通过分子量截留过滤器并收集含有momo30的保留物；或(ii)通过使用抗momo30抗体进行免疫亲和纯化从澄清的植物细胞裂解液中纯化momo30蛋白。将由此形成的momo30蛋白组合物以液体或干燥形式口服施用于受试者，以使momo30蛋白组合物基本上不含大小小于10kda的植物成分，并且包含大小约30kda的蛋白，该蛋白在100℃煮沸20分钟后是稳定的，其结合hiv gp120，并包含seq id no：1的氨基酸序列。

3、在某些优选的实施方式中，包含momo30蛋白的植物是苦瓜属(momordica genus)的成员。在一个更具体的实施方式中，所述植物是胶苦瓜(momordica balsamina)。

4、在一些实施方式中，用于制备momo30蛋白组合物的方法包括在施用前对植物提取物进行免疫亲和纯化的步骤。在其他实施方式中，该方法包括以下步骤：在水性缓冲液中洗脱momo30保留物，以形成在溶液中的水性momo30蛋白组合物。

5、在一些实施方式中，将momo30蛋白组合物干燥并以干燥形式施用于受试者。在一些实施方式中，将momo30蛋白组合物干燥并以干燥形式，例如胶囊或片剂口服施用于受试者。在其他实施方式中，将momo30蛋白组合物以液体形式施用于受试者。在某些特定的实施方式中，将momo30蛋白组合物配制成液体形式的用于口服施用的草本茶。

6、在另一方面，一种用于制备momo30蛋白组合物的方法，包括以下步骤：(a)干燥包含momo30蛋白的植物；(b)在水性介质中提取干燥的植物；(c)裂解来自提取的植物中的细胞以形成植物细胞裂解液；(d)将植物细胞裂解液离心以除去碎片和微粒，以形成澄清的植物细胞裂解液；(e1)使植物细胞裂解液通过分子量截留过滤器，以及收集含有momo30的保留物，或(e2)通过使用抗momo30抗体进行免疫亲和纯化从澄清的植物细胞裂解液中纯化momo30蛋白，以使由此形成的momo30蛋白组合物基本上不含大小小于10kda的植物成分，并包括大小约30kda的蛋白，该蛋白在100℃煮沸20分钟后是稳定的，其结合hiv gp120，并包含seq id no：1的氨基酸序列。

7、在某些优选的实施方式中，包含momo30蛋白的植物是苦瓜属的成员。在一个更具体的实施方式中，所述植物是胶苦瓜。

8、在另一方面，本申请提供了用于预防或减轻hiv感染的症状的包含momo30蛋白的药物组合物，其中所述药物组合物通过包括以下步骤的方法制备：(a)干燥包含momo30蛋白的植物；(b)在水性介质中提取干燥的植物；(c)裂解来自提取的植物中的细胞以形成植物细胞裂解液；(d)将植物细胞裂解液离心以除去碎片和微粒，以形成澄清的植物细胞裂解液；(e)由此制备干燥的momo30蛋白组合物；(f)向干燥的momo30蛋白组合物中添加一种或多种药学上可接受的载体，以及(g)由此以粉末、胶囊、片剂或液体的形式形成药学上可接受的口服组合物。由此产生的组合物基本上不含大小小于10kda的植物成分，并且包括大小约30kda的蛋白，该蛋白在100℃下煮沸20分钟后是稳定的，其结合hiv gp120，并且包含氨基seq id no：1的酸序列。

9、在某些优选的实施方式中，包含momo30蛋白的植物是苦瓜属的成员。在一个更具体的实施方式中，所述植物是胶苦瓜。

10、在一些实施方式中，在制备干燥的momo30蛋白组合物之前，使澄清的植物细胞裂解液通过30-50kda分子量截留过滤器。在其他实施方式中，在制备干燥的口服momo30蛋白组合物之前，使用抗momo30抗体对澄清的植物细胞裂解液进行免疫亲和纯化。

11、在一些实施方式中，药物组合物以粉末形式施用。在其他实施方式中，药物组合物以胶囊或片剂的形式施用。在其他实施方式中，药物组合物以液体形式施用。

12、在另一方面，本申请包括momo30蛋白。在另一个实施方式中，所述组合物包含编码或可操作地连接以表达momo30蛋白的核酸。在优选的实施方式中，momo30蛋白来自苦瓜属的植物物种。

13、特别优选的物种是胶苦瓜。

14、另一方面，用于预防或治疗病毒感染的方法包括向有此需要的受试者施用momo30蛋白或通过体内或离体基因疗法的编码momo30的核酸。

技术特征：

1.一种预防或减轻hiv感染的症状的方法，包括向有此需要的受试者口服施用有效量的momo30蛋白组合物，所述momo30蛋白组合物组合物通过包括以下步骤的方法制备：

2.如权利要求1所述的方法，其中，在施用前对所述澄清的植物细胞裂解液进行免疫亲和纯化。

3.如权利要求1所述的方法，其中，将所述momo30保留物在水性缓冲液中洗脱以形成在溶液中的水性momo30蛋白组合物。

4.如权利要求3所述的方法，其中，将所述momo30蛋白组合物干燥并以干燥形式施用。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述干燥形式是胶囊或片剂。

6.如权利要求4所述的方法，其中，将所述干燥形式作为草本茶施用于所述受试者。

7.如权利要求3所述的方法，其中，将所述momo30溶液加入一种或多种药学上可接受的载体中，并以液体口服施用于所述受试者。

8.一种制备momo30蛋白组合物的方法，包括以下步骤：

9.如权利要求8所述的方法，包括使所述澄清的植物细胞裂解液通过30kda分子量截留过滤器并收集所述含有momo30的保留物的步骤。

10.如权利要求8所述的方法，包括通过使用抗momo30抗体进行免疫亲和纯化从所述澄清的植物细胞裂解液中纯化所述momo30蛋白的步骤。

11.一种用于预防或减轻hiv感染的症状的包含momo30蛋白的药物组合物，其中，所述药物组合物通过包括以下步骤的方法制备：

12.如权利要求11所述的药物组合物，其中，在制备所述干燥的momo30蛋白组合物之前，使所述澄清的植物细胞裂解液通过30-50kda分子量截留过滤器。

13.如权利要求11所述的药物组合物，其中，在制备所述干燥的momo30蛋白组合物之前，使用抗momo30抗体对所述澄清的植物细胞裂解液进行免疫亲和纯化。

14.如权利要求11所述的药物组合物，其为粉末形式。

15.如权利要求11所述的药物组合物，其为胶囊或片剂形式。

16.如权利要求11所述的药物组合物，其为液体形式。

技术总结本申请涉及包含或表达源自胶苦瓜的MOMO30蛋白的组合物和方法。所述MOMO30蛋白大小约为30kDa，在120℃下高压灭菌30分钟后是稳定的，抵抗胰蛋白酶的蛋白水解切割，表现出甘露糖敏感的HIV gp120结合性，表现出血凝素和几丁质酶活性，能够激活和刺激T细胞增殖，能够预防HIV‑1感染或减轻HIV‑1感染患者的症状，并且包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。可以将所述MOMO30蛋白和/或其编码核酸用于预防或治疗由HIV和其他包膜病毒引起的病毒感染的方法中。技术研发人员：迈克尔·D·鲍威尔,埃里克·维丁·阿格尼·格博多索受保护的技术使用者：莫尔豪斯医学院技术研发日：技术公布日：2024/9/2