一种用X射线衍射内标标曲法定量药物制剂中API的方法与流程

本发明涉及药物领域，具体涉及到一种用x射线衍射内标标曲法定量药物制剂中活性成分(active pharmaceutical ingredient,api)的方法。

背景技术：

1、目前药物制剂中api含量的确定可以通过标准曲线法完成。在传统标准曲线法中，利用不同已知api含量的标准样品分别对应某个特征x射线衍射峰的不同强度，来绘制强度与含量的标准曲线图。继而对某个未知api含量样品进行x射线衍射(xrd)测定，得到的特征x射线衍射峰强度可以通过上述标准曲线得到该样品的api含量。

技术实现思路

1、但是，上述这种传统的标准曲线法面临诸多问题。

2、首先，在标准曲线的绘制过程中，容易受到以下两个因素的影响，一是每次样品制备过程中的人为误差会带来被测样品密度上的差异，进而导致制订标曲时的样品的衍射体积与实际样品测试时的衍射体积会有所不同；二是api与药物制剂中其它组份例如辅料的x射线吸收系数不同导致的误差。因此，传统方法的标准曲线的线性相关系数r2很难达到0.99以上。当在已知api含量的标准样品中加入与api的x射线吸收系数相近的内标后，标准曲线的线性相关系数r2很容易就可以达到0.99甚至0.999以上。这时标准曲线的横坐标仍然是api的含量，纵坐标是api特征衍射峰的强度与内标特征衍射峰强度的比值。

3、另外，x射线光源的强度会随时间变化而变化，即使绘制出高精度的标准曲线，当制定标准曲线和测试实际样品的时间跨度超过一周时，制订标准曲线时的光源强度与测试实际样品时的光源强度会显著不同，这也会影响到未知样品的api含量分析。该问题可以利用引入光源强度漂移校正因子来解决。

4、具体内标法绘制标准曲线理论基础如下：

5、一般情况下，待测相的衍射线强度与其含量(vj或wj)间没有简单的线性关系。

6、方法概要：在被测的粉末试样中加入一种含量恒定的标准物质，混合均匀后制成复合试样，测量复合试样中待测相的某一衍射峰强度与内标物质某一衍射峰强度，根据两个强度之比来计算待测相的含量。

7、公式推导：设被测试样由n个相组成，待测相为a，在其中掺入内标物质s后，被测试样与内标物质混合均匀后制成复合试样。其中wa为a在被测试样中的重量百分数；wa′为a在复合试样中的重量百分数；ws为s在复合试样中的重量百分数。三者关系如下，

8、wa′＝wa×(1-ws)                      (1)

9、根据x射线定量分析的普适公式，复合试样中a与s的衍射强度分别为，

10、

11、

12、所以两者的强度比为，

13、

14、结合(1)式，可得，

15、

16、令，

17、

18、最终得到内标法的基本方程，

19、

20、上述方程中，其中ka与ks分别为待测相a与内标物质s的强度因子，(μm)j为各组成相的质量吸收系数，c为物理常量，表达式如下，

21、

22、其中，i0为入射x射线强度，λ为入射x射线波长，r为衍射仪测角仪半径，e为电子电荷，m为电子质量，c为光速。

23、复合试样中a与s相的强度比ia/is与待测试样中a相的重量分数wa呈线性关系，k为其斜率。若k已知，测量复合试样中的ia与is，即可计算出待测试样中a的重量分数wa。

24、通过在标注样品中加入与api吸收系数相近的内标，可显著提高标准曲线的线性相关系数r2至0.99甚至0.999以上。这明显提高了标准曲线法确定未知样品中api含量的可靠性。当api为无机药物时，常用的内标为al2o3(质量吸收系数为31.5cm2/g)。当api为有机药物时，常用的内标为lif(质量吸收系数为11.7cm2/g)。当使用不合适的内标时，线性相关系数r2的值也会受到影响。

25、实验步骤：

26、(1)测绘定标曲线

27、配制一系列(3个以上)待测相a含量已知但数值各不相同的样品，向每个试样中掺入含量恒定的内标物s，混合均匀制成复合试样。其中，内标物s的掺入量以其衍射峰强度合适即可，建议内标物选定衍射峰强度在待测相选定衍射峰的0.1～10倍之间，以减小积分时带来的误差。在a相及s相的衍射谱中分别选择某一衍射峰为选测峰，衍射峰选择以强度合适，附近无干扰峰，特征性强为标准。通过测量各复合试样中的衍射强度ia与is，绘制曲线，即为待测相的定标曲线。定标曲线的斜率即为方程(7)的系数k。

28、(2)制备复合试样

29、在待测样品中掺入与定标曲线中比例相同的内标物s制备成复合试样。

30、(3)测试复合试样

31、在与绘制定标曲线相同的实验条件下，测量复合试样中a相与s相的选测峰强度ia与is。选测峰需与绘制定标曲线选测峰相同。

32、(4)计算含量

33、由待测样复合试样的在事先绘制的待测相定标曲线上查出待测相a的含量wa。或者利用方程(7)计算得出待测相a的含量wa。

34、本发明提出的上述方法提高了未知样品中api含量确定的准确性。

35、如果不使用本发明的内标法，则需要引入光源强度漂移系数。光源强度漂移系数理论基础如下：

36、当制订标准曲线与实际测试样品发生的时间跨度较长，例如超过一周时，需要引入光源强度飘移系数f来校正光源强度变化带来的对定量结果不准确的影响。

37、漂移系数f等于x射线衍射仪配套的标准样品(例如刚玉和硅粉)特征衍射峰的峰面积的比值。测试过程为：(1)绘制标准曲线时，首先取适量仪器配套标准样品(刚玉或硅粉)进行x射线测试，记录特征峰强度i1；(2)若在长时间以后进行未知样品的测试，可在测试前首先对相同质量的仪器配套标准样品(刚玉或硅粉)进行x射线测试，记录此时特征峰强度i2。

38、则漂移系数f为，

39、f＝i1/i2                             (9)

40、方程(9)中，分子是进行建立标准曲线时该特征峰的峰面积i1，分母是分析实际样品时该特征峰的峰面积i2；(3)对实际未知样品进行x射线测试后，对特征峰强度乘以f，对修正后的强度再使用标准曲线进行分析即可得到更精确的api定量结果，即，

41、

42、由此可见，采用本发明的内标标曲法，可以省略上述繁琐的光源强度漂移校正步骤，使得药物制剂中api含量的确定更加简单、准确、高效。

技术特征：

1.一种用x射线衍射内标标曲法定量药物制剂中api的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述配制一系列待测相a含量已知但数值各不相同的样品，为配制3个以上，优选配制5个以上，更有选配制5-10个。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述在a相及s相的衍射谱中分别选择某一衍射峰为选测峰，其中选择选测峰地标准为：选择以强度合适、附近无干扰峰、特征性强的衍射峰为选测峰。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述内标物s的掺入量按照以下方法确定：内标物s选定衍射峰强度在待测相选定衍射峰强度的0.1～10倍之间。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述内标物s的掺入量按照以下方法确定：内标物s选定衍射峰强度在待测相选定衍射峰强度的1-8倍。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述内标物s的掺入量按照以下方法确定：内标物s选定衍射峰强度在待测相选定衍射峰强度的2-6倍。

技术总结一种用X射线衍射内标标曲法定量药物制剂中API的方法，该方法在被测的粉末试样中加入一种含量恒定的标准物质，混合均匀后制成复合试样，测量复合试样中待测相的某一衍射峰强度与内标物质某一衍射峰强度，根据两个强度之比来计算待测相的含量。技术研发人员：李霄鹏受保护的技术使用者：李霄鹏技术研发日：技术公布日：2024/9/9