一种临床用间充质干细胞及NK细胞保存液、间充质干细胞及NK细胞产品及其制备方法与流程

本申请属于干细胞，尤其涉及一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液、间充质干细胞及nk细胞产品及其制备方法。

背景技术：

1、近几年干细胞、免疫细胞的基础研究和应用取得重大进展，细胞治疗疾病的研究逐渐由实验室进入临床研究阶段，且国内外已有细胞产品上市。但是细胞产品不同于其它化学药品和生物制品，细胞的保存、运输和应用过程都需要在溶液中，这就对细胞的保存液提出了较高的技术要求，保存液既不能对细胞和人体产生有毒有害的作用，还要方便细胞的保存、运输和临床应用，尽量不降低细胞的活率和生物学功能。

2、现有的保存液有许多种，目前使用的细胞保存液为0.9％氯化钠注射液90～98份，20％人血白蛋白注射液2～10份；但是在上述保存液保存下，间充质干细胞保存12h后细胞存活率下降到90％以下，nk细胞保存24h后细胞存活率下降到90％以下，细胞功能明显下降。显然上述保存液的保存条件不利于细胞的长期保存和远距离运输和使用，无法满足临床研究和应用的需要。虽然市面有一些细胞保存液产品可以延长细胞保存时间，但成分复杂，不具备药辅资质，目前仅适用于科学研究，不能应用于临床。

技术实现思路

1、本申请实施例提供一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液、间充质干细胞及nk细胞产品及其制备方法，以解决相关技术存在的问题，技术方案如下：

2、第一方面，本申请实施例提供了一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，由氯化钠注射液、人血白蛋白注射液、10％右旋糖酐40葡萄糖注射液组成。

3、在一种实施方式中，由以下按体积份的组分组成：

4、0.9％氯化钠注射液40～90份，20％人血白蛋白注射液2～10份；10％右旋糖酐40葡萄糖注射液15～50份。

5、在一种实施方式中，由以下按体积份的组分组成：

6、0.9％氯化钠注射液50～80份，20％人血白蛋白注射液4～8份；10％右旋糖酐40葡萄糖注射液15～40份。

7、在一种实施方式中，保存液使用期限为：在2～8℃保存下30天内使用；或在-15～20℃保存下1年内使用。

8、在一种实施方式中，在-15～-20℃保存，使用时取出解冻复温到室温后再用于细胞保存。

9、第二方面，本申请实施例提供了一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液的制备方法，按照体积份将0.9％氯化钠注射液，20％人血白蛋白注射液、10％右旋糖酐40葡萄糖注射液在无菌条件下混合均匀，得到所述临床用间充质干细胞及nk细胞保存液。

10、第三方面，本申请实施例提供了一种间充质干细胞及nk细胞产品，所述间充质干细胞及nk细胞保存在上述保存液中。

11、在一种实施方式中，间充质干细胞或nk细胞进行洗涤后，经上述保存液重悬细胞沉淀后，调整细胞浓度，得到所述间充质干细胞及nk细胞产品。

12、在一种实施方式中，每毫升保存液中间充质干细胞数为10万100万个。

13、在一种实施方式中，每毫升保存液中nk细胞数为500万2500万个。

14、在一种实施方式中，所述间充质干细胞及nk细胞产品临床直接静脉滴注或组织局部注射。

15、上述技术方案中的优点或有益效果至少包括：

16、1、本申请的在一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，由氯化钠注射液、人血白蛋白注射液、右旋糖酐40葡萄糖注射液组成。氯化钠、人血白蛋白和右旋糖酐40葡萄糖的注射液都是临床常用的电解质补充药或血容量扩充剂，可以直接用于临床输注，成分简单，具有较高的安全性；其中0.9％氯化钠注射液的渗透压值和正常人的血浆、组织液都是大致一样的，将它用作保存液的主要成分。白蛋白能够保证细胞状态的良好，在细胞保存中能起到防止细胞结团和维持细胞膜稳定性的作用，同时还具备抗氧化功能及减少细胞自溶。低分子右旋糖酐葡萄糖注射液，提高血浆胶体渗透压，增加血容量，减低血小板黏附性并抑制红细胞凝聚，改善微循环能力等，并且葡萄糖提供机体和细胞新陈代谢的能量。通过上述三种试剂的共同作用，可维持细胞在保存过程中正常的生理环境，防止细胞聚集和维持细胞膜稳定性，减少细胞自溶，防止细胞保存运输过程的机械损伤，并提供细胞代谢所需的能量，可以较好地保护细胞，维持较高的细胞活率，可满足本地医疗机构和国内各地医疗机构开展间充质干细胞及nk细胞临床试验和应用的需要。

17、2、本申请的一种间充质干细胞及nk细胞产品，在经过长时间的保存仍然保持较高的细胞活率，并且保存液组成简单，由临床注射剂组成，细胞产品可以直接进行注射，安全性高。

18、上述概述仅仅是为了说明书的目的，并不意图以任何方式进行限制。除上述描述的示意性的方面、实施方式和特征之外，通过参考附图和以下的详细描述，本申请进一步的方面、实施方式和特征将会是容易明白的。

技术特征：

1.一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，其特征在于，由氯化钠注射液、人血白蛋白注射液、右旋糖酐40葡萄糖注射液组成。

2.根据权利要求1所述的一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，其特征在于，由以下按体积份的组分组成：

3.根据权利要求1所述的一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，其特征在于，由以下按体积份的组分组成：

4.根据权利要求1-3任一项所述的一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，其特征在于，保存液使用期限为：在2～8℃保存下30天内使用；或在-15～20℃保存下1年内使用。

5.根据权利要求4所述的一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液，其特征在于，

6.一种临床用间充质干细胞及nk细胞保存液的制备方法，其特征在于，按照体积份将0.9％氯化钠注射液，20％人血白蛋白注射液、10％右旋糖酐40葡萄糖注射液在无菌条件下混合均匀，得到所述临床用间充质干细胞及nk细胞保存液。

7.一种间充质干细胞及nk细胞产品，其特征在于，所述间充质干细胞及nk细胞保存在权利要求1-6任一项所述的保存液中。

8.根据权利要求7所述的间充质干细胞及nk细胞产品，其特征在于，间充质干细胞或nk细胞进行洗涤后，经权利要求1-6任一项所述的保存液重悬细胞沉淀后，调整细胞浓度，得到所述间充质干细胞及nk细胞产品。

9.根据权利要求7所述的间充质干细胞及nk细胞产品，其特征在于，

10.根据权利要求7-9任一项所述的间充质干细胞及nk细胞产品，其特征在于，所述间充质干细胞及nk细胞产品临床直接静脉滴注或组织局部注射。

技术总结本申请提出一种临床用间充质干细胞及NK细胞保存液、间充质干细胞及NK细胞产品及其制备方法，保存液由0.9％氯化钠注射液40～90份，20％人血白蛋白注射液2～10份；10％右旋糖酐40葡萄糖注射液15～50份构成；可以直接用于临床注射的试剂，成分简单，具有较高的安全性；并且通过特定组成含量组分的共同作用，可以较好地保护细胞，维持较高的细胞活率，间充质干细胞、NK细胞保存3天以上，细胞存活率大于90％，并保持量好的活性；可满足本地医疗机构和国内各地医疗机构开展间充质干细胞临床试验和应用的需要。技术研发人员：黄春艳,沈政,梁嘉文,黄兰,王彩铃,林姣,陈俊莉受保护的技术使用者：北昊干细胞与再生医学研究院有限公司技术研发日：技术公布日：2024/10/10