一种含钆核磁共振成像造影剂的血清样品中痕量Se的精准分析方法与流程

本发明涉及一种血清样品中元素的测定方法，具体涉及一种含钆核磁共振成像造影剂的血清样品中痕量se的精准分析方法。

背景技术：

1、se是人体必需的微量元素之一，是生物体多种酶和蛋白质的重要组成部分，对人体的生理健康有重要影响。在人体中已发现25种基因编码的se蛋白，通过酶促作用，se蛋白主要实现抗氧化、调节氧化还原、合成甲状腺激素、传导钙信号等生理功能。众多研究表明，大骨节病和克山病是典型的体内缺se引起的疾病，随着se对人体作用研究的不断深入，人们发现缺se还会引起代谢紊乱。人体内的se水平分为三种情况：痕量硒浓度维持机体正常生长发育，中等se浓度维持功能稳定，而se浓度略高于人体略高于健康要求的水平时，就会引发毒害作用，如指甲的非正常脱落、皮肤病变及神经系统受损等。由于se在人体内的安全浓度范围很小，对人体血清中se浓度变化进行监测是临床医学研究的重要课题。

2、目前已发展了多种原子光谱分析技术用于血清中se的检测，主要包括原子荧光光谱(afs)法、原子吸收光谱(aas)法、电感耦合等离子体发射光谱(icp-oes)法、电感耦合等离子体质谱(icp-ms)法。其中afs具有灵敏度高，检测限低，尤其是结合氢化物发生(hg)技术能降低检测限在1个数量级以上，但荧光淬灭效应以及所固有的散射光干扰降低了afs的理论上所具有的优势；采用aas测定se的共振吸收线接近真空紫外区，而icp-oes测定se的激发电位高，导致aas和icp-oes测定se的灵敏度低且检测限偏高，难以满足血清中痕量se的检测要求；尽管icp-ms比afs、aas和icp-oes具有更低的检测限和更高的灵敏度，已成为测定血清中se最常用分析技术，但仍然面临着多种挑战：se的第一电离能高，即使在高温等离子体(icp)中的电离效率也很低，影响se的分析灵敏度。而se的所有同位素都将面临质谱干扰，其中高丰度同位素80se(丰度49.6％)和78se(23.8％)受到来自氩基离子和基质ca的严重干扰，当血清样品中含有钆(gd)磁共振成像照影剂时，由于gd具有较低第二电离能(12.09ev)，所形成的双电荷离子gd++也会严重干扰80se和78se测定，传统的四极杆icp-ms(icp-qms)无法消除这些干扰，即使采用扇型磁场icp-ms(sf-icp-ms)也不能分离所有干扰。

3、电感耦合等离子体串联质谱(icp-ms/ms)利用位于八极杆反应池系统(ors)前后的两个四极杆质量过滤器(q1，q2)，准确控制进入ors内的离子种类，提高了消除质谱干扰的能力。在ms/ms模式下，采用o2为反应气通过o原子质量转移反应，将se+转移为seo+进行测定，实现了高丰度同位素se的测定。然而，有研究表明，在o2反应模式下加入少量h2能进一步降低se的背景等效浓度(bec)，意味着在o2反应模式下消除干扰仍然不彻底。n2o作为icp-ms/ms的反应气，较低的o原子亲和能使n2o更易发生o原子质量转移反应，许多在o2反应模式下发生o原子转移的吸热反应，在n2o反应模式下表现为放热反应。同时，n2o还能与少量离子发生n原子质量转移反应。因此，n2o是比o2更有效的质量转移反应气体。本研究采用icp-ms/ms对含钆磁共振成像照影剂血清中se进行测定，在ms/ms模式下选择n2o为反应气消除质谱干扰，以期建立准确无干扰测定含钆磁共振成像照影剂血清中se的高通量分析方法。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供两种含钆核磁共振成像造影剂的血清样品中痕量se的精准分析方法，建立了准确无干扰测定含钆核磁共振成像照影剂血清中se的高通量分析方法。

2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种含钆核磁共振成像造影剂的血清样品中痕量se的精准分析方法，其特征在于，包括以下步骤：

3、(1)标准样品溶液的配制，取se单元素标准溶液，配制不同浓度梯度的se标准系列溶液；标准溶液的溶剂为稀释剂，所述稀释剂为含有小分子醇、edta、triton x-100和nh4oh的水溶液；

4、(2)内标溶液配制，所述内标溶液为100μg/l的y内标溶液；

5、(3)全血样品的配制，对于标准参考物质动物血清采用微波消解法进行消解，定容，得到标准参考物质样品溶液；

6、(4)配制待检测样品，准确移取血清样品于采样管中，所述血清样品中含有钆核磁共振成像造影剂，加入稀释剂，充分混合均匀得到样品溶液；

7、(5)上机检测，吸取上述待检测样品、标准样品、空白稀释剂溶液和全血样品，以icp-ms/ms，选择n2o或者n2o和氢气的混合气作为反应气，通过n原子转移消除质谱干扰，通过标准的t型内标混合接头在线加入内标溶液，进行检测，计算得到样品中se的含量；

8、icp-ms/ms的参数条件为：

9、射频功率1550w

10、载气流量0.80l min-1

11、取样深度8mm

12、辅助气体氩气流量0.4lmin-1

13、积分时间3.0s

14、反应气n2o或n2o与氢气的混合气

15、反应气流速0.30ml min-1

16、八极杆偏置电压﹣18v

17、动能歧视电压﹣10v。

18、上述方案中，所述小分子醇为乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇中的一种，稀释剂中，各物质的体积浓度为：4％小分子醇，0.1％ edta、0.1％ triton x-100和2％ nh4oh。

19、上述方案中，se单元素标准溶液的浓度为1000mg/l。

20、上述方案中，待检测样品的配制为0.1ml血清样品加入10ml稀释剂。

21、上述方案中，选用78se和80se的任意一种作为分析同位素。

22、另一种含钆核磁共振成像造影剂的血清样品中痕量se的精准分析方法

23、，其特征在于，包括以下步骤：

24、(1)标准样品溶液的配制，取se单元素标准溶液，配制不同浓度梯度的se标准系列溶液；标准溶液的溶剂为稀释剂，所述稀释剂为含有小分子醇、edta、triton x-100和nh4oh的水溶液；

25、(2)内标溶液配制，所述内标溶液为100μg/l的y内标溶液；

26、(3)全血样品的配制，对于标准参考物质动物血清采用微波消解法进行消解，定容，得到标准参考物质样品溶液；

27、(4)配制待检测样品，准确移取血清样品于采样管中，所述血清样品中含有钆核磁共振成像造影剂，加入稀释剂，充分混合均匀得到样品溶液；

28、(5)上机检测，吸取上述待检测样品、标准样品、空白稀释剂溶液和全血样品，以icp-ms/ms，选择n2o或者n2o和氢气的混合气作为反应气，通过o原子转移消除质谱干扰，通过标准的t型内标混合接头在线加入内标溶液，进行检测，计算得到样品中se的含量；

29、icp-ms/ms的参数条件为：

30、射频功率1550w

31、载气流量0.80l min-1

32、取样深度8mm

33、辅助气体氩气流量0.4lmin-1

34、积分时间3.0s

35、反应气n2o或n2o与氢气的混合气

36、反应气流速0.30ml min-1

37、八极杆偏置电压﹣18v

38、动能歧视电压﹣10v。

39、上述方案中，所述小分子醇为乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇中的一种，稀释剂中，各物质的体积浓度为：4％小分子醇，0.1％ edta、0.1％ triton x-100和2％ nh4oh。

40、上述方案中，选用78se作为分析同位素。

41、n2o作为icp-ms/ms的反应气，较低的o原子亲和能使n2o更易发生o原子质量转移反应，许多在o2反应模式下发生o原子转移的吸热反应，在n2o反应模式下表现为放热反应。同时，n2o还能与少量离子发生n原子质量转移反应。因此，n2o是比o2更有效的质量转移反应气体。本发明采用icp-ms/ms对含钆磁共振成像照影剂血清中se进行测定，在ms/ms模式下选择n2o为反应气消除质谱干扰，以期建立准确无干扰测定含钆磁共振成像照影剂血清中se的高通量分析方法。