加味没竭片品质检测方法与流程

本发明涉及一种没竭片品质检测方法，尤其涉及加味没竭片品质检测方法。

背景技术：

1、加味没竭片具有行气破滞、活血化瘀、消积定痛的功效，在临床应用广泛。该方由血竭、蒲黄、制乳香、制没药、赤芍、莪术、三棱、地龙、炒土鳖虫共9味饮片组成，处方中制没药、莪术等饮片具有挥发性成分，但复方制剂中目前尚无质量控制方法，即无法检测加味没竭片品质是否符合要求。

2、尽管复方制剂中前期已有芍药苷、血竭素含量测定方法，但原方法供试品溶液色谱中，芍药苷峰与杂质峰分离度差，检测结果不准确；血竭素峰随着时间一直在降低，检测结果不可靠。

技术实现思路

1、本发明建立的加味没竭片挥发性成分指纹图谱方法，为复方制剂中挥发性成分均匀性考察提供了新的分析手段，保证了检测结果的准确性，提升了检测结果的可靠性，优化了药苷、血竭素含量测定方法专属性、准确度、精密度、线性、耐用性好。

2、为达到以上至少一个优势，本发明提供一种加味没竭片品质检测方法，所述加味没竭片品质检测方法包括：

3、s1001，将预定量的水和适量干净玻璃珠放置于一容器，将加味没竭片粉末加入所述容器中，摇匀混合，其中所述容器连接一挥发油测定器，自所述挥发油测定器上端加水使充满刻度部分，并溢流入所述容器时为止，并随后加入乙酸乙酯进入所述挥发油测定器；

4、s1002，通过加热所述容器，并使其持续蒸馏预定时间后，停止，以使加味没竭片中的挥发油通过蒸馏溶解于乙酸乙酯中，收集含有挥发油的乙酸乙酯，并通过加入无水乙醇，最终滤得含有挥发油的无水乙醇，以形成待测挥发油混合液；

5、s1003，取预定量的呋喃二烯对照品，并加入预定量的无水乙醇，以形成呋喃二烯对照品溶液；

6、s1004，通过高效液相色谱分别测定待测挥发油混合液和呋喃二烯对照品溶液，以形成色谱图；

7、s3001，将与步骤s1001相同的加味没竭片粉末加入所述容器中，摇匀混合后，加入预定量的75％甲醇，以形成待测芍药苷溶液；

8、s3002，取芍药苷对照品适量，精密称定，加75％甲醇制成对比溶液；

9、s3003，通过高效液相色谱分别测定待测芍药苷溶液和芍药苷对照品溶液，以形成色谱图；

10、s4001，将与步骤s1001相同的加味没竭片粉末加入所述容器中，摇匀混合后，加入预定量的20％磷酸甲醇溶液，以形成待测血竭素溶液；

11、s4002，取血竭素高氯酸盐对照品适量，精密称定，加20％磷酸甲醇溶液制成的血竭素对照溶液；

12、s4003，通过高效液相色谱分别测定待测血竭素溶液和血竭素对照溶液，以形成色谱图；

13、根据所述步骤s1004、步骤s3003以及所述步骤s4003得到的色谱图确定所述加味没竭片品质。

14、根据本发明一实施例，所述加味没竭片品质检测方法包括：

15、s2001，加入乙酸乙酯后，加热所述容器之前，加热所述挥发油测定器内容物，以使乙酸乙酯和水达到饱和状态。

16、3、根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，在所述步骤s1004中，其至少满足以下至少一个条件：

17、色谱条件及系统适用性：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相a为乙腈，流动相b为水，梯度洗脱程序为0～45min，60％→95％a；45～60min，95％a；60～60.1min，95％→100％a；60.1～80min，100％a；80～80.1min，100％～60％a；80.1～95min，60％a；检测波长216nm；进样量5μl，柱温25℃；流速0.9ml/min；理论板数按呋喃二烯峰计算不低于5000；

18、所述色谱柱为zorbax eclipse xdb-c18；

19、将供试品溶液与对照品溶液分别进行测定，记录色谱图，选定的保留时间区间内(5～60min)，将多组供试品溶液色谱图导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件与标准图谱详比较，相似度不低于0.90。

20、根据本发明一实施例，在所述步骤s3003中，其至少满足以下至少一个条件：

21、色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相a，以0.01％冰乙酸水溶液为流动相b，进行梯度洗脱程序为0～10min，28％a；10～25min，28％→33％a；25～35min，33％a；35～40min，33％→100％a；40～50min，100％a；50～55min，100％→28％a；55～70min，28％a；；流速为1ml/min；检测波长为232nm；柱温为20℃，理论板数按芍药苷峰计算应不低于3000；

22、分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

23、超声处理功率420w，频率40khz；

24、所述色谱柱选自shim-pack scepter c18、zorbax sb-c18、inertsustain c18中的任一一种。

25、根据本发明一实施例，在所述步骤s4003中，其至少满足以下至少一个条件：

26、色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol·l-1磷酸二氢钠溶液(44：56)为流动相；流速为1ml/min；检测波长为474nm；柱温为30℃，理论板数按血竭素峰计算应不低于4000；

27、分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

28、超声处理功率420w，频率40khz；

29、所述色谱柱包括zorbax sb-c18、shim-pack velox sp-c18、inertsustain c18。

30、根据本发明一实施例，在所述步骤s4001加入预定量的20％磷酸甲醇溶液后，通过超声处理所述加入预定量的20％磷酸甲醇溶液；并用20％磷酸甲醇溶液补足减失的重量。

31、根据本发明一实施例，在所述步骤s3001中，加入预定量的75％甲醇后，超色处理预定时长，并放冷预定时间后，用75％甲醇补足减失的重量。

技术特征：

1.加味没竭片品质检测方法，其特征在于，所述加味没竭片品质检测方法包括：

2.根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，所述加味没竭片品质检测方法包括：

3.根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，在所述步骤s1004中，其至少满足以下至少一个条件：

4.根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，在所述步骤s3003中，其至少满足以下至少一个条件：

5.根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，在所述步骤s4003中，其至少满足以下至少一个条件：

6.根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，在所述步骤s4001加入预定量的20％磷酸甲醇溶液后，通过超声处理所述加入预定量的20％磷酸甲醇溶液；并用20％磷酸甲醇溶液补足减失的重量。

7.根据权利要求1所述加味没竭片品质检测方法，其特征在于，在所述步骤s3001中，加入预定量的75％甲醇后，超色处理预定时长，并放冷预定时间后，用75％甲醇补足减失的重量。

技术总结本申请公开加味没竭片品质检测方法，其包括通过高效液相色谱分别测定待测挥发油混合液和呋喃二烯对照品溶液，以形成色谱图，通过高效液相色谱分别测定待测芍药苷溶液和芍药苷对照品溶液，以形成色谱图；通过高效液相色谱分别测定待测血竭素溶液和血竭素对照溶液，以形成色谱图；根据所述步骤S1004、步骤S3003以及所述步骤S4003得到的色谱图确定所述加味没竭片品质。技术研发人员：刘余敏,黄旭骅,李鹏欣,张小惠,陶启民,黄文略受保护的技术使用者：上海蔡同德堂中药制药厂有限公司技术研发日：技术公布日：2024/11/4