下调血管紧张素受体基因表达水平的植物乳植杆菌IOB602及其应用的制作方法

本发明属于微生物，具体涉及一种下调血管紧张素受体基因表达水平的植物乳植杆菌iob602及其应用。

背景技术：

1、高血压是中国心血管疾病的主要危险因素,也是全球全因死亡和残疾的主要原因。高血压的发生发展是一个复杂的病理生理过程，是多种血压调节机制失衡的作用结果。

2、目前，大量研究表明高血压发病相关机制主要包括血管功能异常、神经系统调节、肾素-血管紧张素-醛固酮系统（renin-angiotensin-aldosteronesystem, raas）、肾脏重吸收紊乱、激肽-激肽释放酶系统等方面。其中，raas系统过度激活是引起血管收缩、炎症及血管重构的重要机制。raas是心血管与肾脏功能的重要调节系统，在机体血压控制和循环血容量调节方面发挥重要作用。由血管紧张素原（angiotensinogen, agt）、血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme, ace）、血管紧张素ι（angiotensin ι, ang ι）、血管紧张素ⅱ（angiotensin ⅱ, ang ⅱ）、angⅱ受体（ang ⅱ receptor, atr）和醛固酮（aldosterone, ald）等多种活性物质组成，通过对血容量和外周阻力的控制，参与血压的短期和长期调节。

3、目前，直接抑制 angⅱ活性的药物(如血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素ⅱ受体拮抗剂)已经是临床上常用的降压药。但是，由于机体存在反馈调节机制，单纯抑制 angⅱ活性不能完全阻断其升压作用。例如，当使用血管紧张素转换酶抑制剂时，肾素分泌会代偿性增加，从而使 angⅱ的生成出现一定程度的恢复。

4、而降低血管紧张素ii受体1型 （at1r）基因表达从受体水平上进行干预，可以在一定程度上绕过这种反馈调节机制，更直接地阻断 angⅱ的升压效应。降低 at1r基因的表达，细胞表面的at1r数量就会减少。这样一来，即使体内存在angⅱ，由于其作用的靶受体减少，angⅱ引起的一系列升压反应(如血管收缩、醛固酮分泌增加等)就会减弱，从而有助于降低血压。

5、目前降低 at1r 基因表达的技术主要有反义寡核苷酸技术、rna 干扰技术、药物干预或基因编辑技术。反义寡核苷酸技术存在稳定性问题，易被核酸酶降解，且其递送存在难题，需要借助特定载体，还可能出现非特异性结合；rna 干扰技术有脱靶效应，对基因表达抑制持续时间较短，有效递送也面临挑战；药物干预会带来副作用，不同患者反应有个体差异，长期使用可能产生耐药性；基因编辑技术脱靶风险高，存在伦理争议且技术复杂。

6、益生菌通常被认为是相对安全的，副作用较少，可以通过口服等简单的方式摄入益生菌，患者的依从性较高。且益生菌往往具有调节肠道菌群等其他有益作用，对肠道健康、免疫系统等产生积极影响。

7、然而，目前关于益生菌降低 at1r 基因表达的研究还处于初步阶段，其有效性仍需要进一步深入研究和验证。

技术实现思路

1、鉴于现有技术中存在的技术问题，本发明旨在提供一种下调血管紧张素受体基因表达水平的植物乳植杆菌iob602及其应用。

2、本发明目的之一在于提供一种下调血管紧张素受体基因表达水平的植物乳植杆菌iob602，所述植物乳植杆菌iob602的分类命名为植物乳植杆菌 lactiplantibacillus  plantarum，于2018年6月29日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，简称cgmcc，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为cgmcc no.16021。

3、优选地，所述植物乳植杆菌iob602具有以下至少一种功能：

4、（1）下调血管紧张素ii受体1型at1r基因表达水平；

5、（2）激活pi3k/akt1/enos/no信号通路；

6、（3）抑制血管紧张素转换酶活性。

7、优选地，所述植物乳植杆菌iob602可用于制备植物乳植杆菌iob602菌粉和植物乳植杆菌iob602后生元。

8、优选地，所述植物乳植杆菌iob602菌粉和植物乳植杆菌iob602后生元的制备方法包括：

9、将冻存管中的植物乳植杆菌iob602接种至种子培养基中，并放置到35-37℃培养，活化时间为22-24h，得到活化菌液，按照1-3%接种量将活化菌液接种至种子培养基中，在35-37℃培养箱中培养18-20h得到一级种子液；将一级种子液按照1-3%接种量接种至种子培养基中，在35-37℃培养箱中培养16-18h得到二级种子液；将二级种子液按照1-3%接种量接种至发酵培养基中，于35-37℃培养箱中培养14-16h，得到扩培菌液；将扩培菌液在4-6℃，4000-6000rpm/min条件下离心20-30min，弃上清液收集离心后的沉淀，将其放置于-80~-60℃进行预冻2-3h，然后进行冷冻干燥，干燥温度设置为-60~-40℃，干燥时间为24-36h，获得植物乳植杆菌iob602菌粉；

10、将离心后的沉淀在80-95℃下灭菌30-50min，再将其放置于-80~-60℃进行预冻2-3h，然后进行冷冻干燥，干燥温度设置为-60~-40℃，干燥时间为24-36h，获得乳植物乳植杆菌iob602后生元。

11、优选地，所述种子培养基组成为：蛋白胨1-2%，牛肉膏0.5-1%，酵母膏0.4-0.8%，葡萄糖1.5-2.5%，磷酸氢二钾0.1-0.5%，乙酸钠0.3-0.8%，硫酸锰0.003-0.006%，吐温800.05-0.15%，柠檬酸铵0.1-0.3%，ph6.2-6.4。

12、优选地，所述发酵培养基组成为：蛋白胨2-3%，酵母膏1.5-2.5%，葡萄糖2-3%，磷酸氢二钾0.5-1%，乙酸钠0.2-0.5%，硫酸镁0.02-0.04%，硫酸锰0.002-0.005%，吐温80 0.3-0.6%，柠檬酸铵0.3-0.6%，ph6.2-6.4。

13、优选地，所述植物乳植杆菌iob602菌粉活菌数为1×109cfu/g-7.0×1011cfu/g。

14、优选地，所述植物乳植杆菌iob602可用于制备下调血管紧张素受体基因表达水平的药品。

15、优选地，所述植物乳植杆菌iob602可用于制备维持血压健康水平的保健品。

16、本发明有益效果：

17、本发明提供了一种下调血管紧张素受体基因表达水平的植物乳植杆菌iob602，该菌下调血管紧张素ii受体1型（at1r）基因表达水平，减少 at1r 的数量，从而降低血管紧张素ii与其结合所产生的不良效应，如血管收缩、醛固酮分泌增加、水钠潴留等，促使血压升高。pi3k被激活后，进一步激活akt1，akt1则促进内皮型一氧化氮合酶（enos）的活性。enos催化产生一氧化氮（no）。no 具有强大的血管舒张作用，可以扩张血管，降低外周阻力。血管紧张素转换酶可将血管紧张素 i 转化为具有强烈缩血管作用的血管紧张素 ii。抑制该酶的活性，可减少血管紧张素 ii 的生成，减少血管紧张素ii与其受体的结合。

18、当下调 at1r 基因表达水平时，血管紧张素 ii 与受体结合减少，一方面直接减弱了血管收缩作用。另一方面，由于血管紧张素ii对 pi3k/akt1/enos/no信号通路的抑制作用减弱，可能间接促进了该信号通路的激活。激活后的信号通路产生更多的no，进一步增强血管舒张作用，共同降低血压。

19、另外，植物乳植杆菌iob602还能减轻由高血压引起的氧化应激，降低高血压大鼠的炎症反应，缓解高血压大鼠的心肌肥厚和肾脏纤维化，改善肾脏组织萎缩凋亡的损伤。