大豆耐盐基因GmHAL3a及其应用

本发明属于植物基因工程领域，具体涉及一种提高大豆耐盐性的基因gmhal3a及其应用。

背景技术：

1、盐胁迫严重抑制植物的生长和发育。渗透胁迫和离子毒害是两个盐胁迫影响植物生长的主要原因。渗透胁迫指盐胁迫下细胞外的高离子浓度直接导致渗透势降低，进一步导致植物吸收水分和营养的能力下降。离子毒害发生在盐的水平超过一定阈值后，当植物无法维持体内的离子平衡时就会进一步引发一系列次级反应，如氧化胁迫、营养胁迫等[1]。因此，盐胁迫会对植物的种子萌发、生长发育、光合作用、离子积累等多个方面造成一定影响[2]。

2、大豆作为优质蛋白和食用油的主要来源。目前，全世界盐碱土壤的总面积达到约1.1×109hm2。在全球一百多个国家和地区，盐碱土面积仍在增加，它是一种非常重要的备用耕地资源[3]。因此培育耐盐碱大豆是扩大大豆种植面积和提高我国大豆总产最有效途径。

3、[1]mauro r p,perez alfocea f,cookson s j,et al.editorial：physiological and molecular aspects of plant rootstock-scion interactions[j].frontiers in plant science,2022,13(1)：852518.

4、[2]park h j,kim w y,yun d j.arole for gigantea keeping the balancebetween flowering and salinity stress tolerance[j].plant signaling&behavior,2013,8(7)：e24820.

5、[3]litalien a,zeeb b.curing the earth：a review of anthropogenic soilsalinization and plant-based strategies for sustainable mitigation[j].scienceof the total environment,2020,698(1)：134235.

技术实现思路

1、本发明的目的是提供大豆gmhal3a基因与其在调控耐盐性方面的应用，该基因可导入植物，提高大豆对盐胁迫的耐受性，以进行植物品种改良。

2、本发明所述的大豆抗病调控基因gmhal3a，其序列如seq id no.1所示。

3、本发明还提供所述的基因gmhal3a编码的蛋白，序列如seq id no.2所示。

4、本发明还提供一种包含所述基因gmhal3a的重组表达载体。

5、所述表达载体可以为本领域的常规载体连接本发明所述的基因gmhal3a形成，例如使用限制性酶kpn i和bamh i酶切载体pbingfp4插入基因gmhal3a后形成的重组表达载体。

6、本发明还提供一种转化体，由包含所述基因gmhal3a的重组表达载体导入宿主细胞所得，所述的宿主细胞优选大肠杆菌细胞或农杆菌细胞。

7、本发明提供扩增本发明所述基因的引物。

8、本发明扩增基因gmhal3a的引物可以按照本领域的常规方法进行设计，在一种实施例中，为：gmhal3a-f atggccggttcagaacctgt(seq id no.3)；gmhal3a-rtcagatatcaccattacctt(seq id no.4)。

9、本发明还提供所述大豆耐盐基因gmhal3a、重组表达载体、转化体、或者引物在提高大豆耐盐性中的应用。更具体的，是将基因gmhal3a导入大豆进行过表达。

10、本发明还提供一种提高大豆耐盐性的方法，将基因gmhal3a导入大豆进行过表达。

11、本发明还提供一种培育耐盐性大豆品种的方法，将基因gmhal3a导入大豆进行过表达，获得耐盐性大豆品种。

12、本发明还提供所述大豆耐盐基因gmhal3a、重组表达载体、转化体、或者引物在在提高盐胁迫条件下大豆叶绿素含量中的应用。

13、本发明的有益效果

14、本发明研究表明过量表达gmhal3a的转基因大豆在300mm nacl胁迫后的表型及叶绿素含量指标表明，gmhal3a在提高植物对盐胁迫耐受性方面发挥了重要的调控作用。通过采用该基因进行大豆耐盐的基因工程改良，发现该基因对培育耐盐大豆品种具有一定的作用，可以通过提高大豆的耐盐性进而为提高大豆的产量和品质服务。

技术特征：

1.大豆耐盐基因gmhal3a，其序列如seq id no.1所示。

2.权利要求1所述的基因gmhal3a编码的蛋白，序列如seq id no.2所示。

3.包含权利要求1所述基因gmhal3a的重组表达载体；优选的，所述重组表达载体，使用限制性酶kpn i和bamh i酶切载体pbingfp4插入基因gmhal3a后形成。

4.一种转化体，由包含权利要求1所述基因gmhal3a的重组表达载体导入宿主细胞所得。

5.根据权利要求4所述的转化体，其特征在于，所述的宿主细胞为大肠杆菌细胞或农杆菌细胞。

6.扩增权利要求1所述的基因gmhal3a的引物，优选的，所述引物具体如seq id no.3和seq id no.4所示。

7.权利要求1所述的基因gmhal3a、权利要求2所述的蛋白、权利要求3所述的重组表达载体、权利要求4或5所述的转化体、权利要求6所述的引物在提高大豆耐盐性中的应用；优选的，具体为将权利要求1所述的基因gmhal3a导入大豆进行过表达。

8.一种提高大豆耐盐性的方法，其特征在于，将权利要求1所述的基因gmhal3a导入大豆进行过表达。

9.一种培育耐盐性大豆品种的方法，其特征在于，将权利要求1所述的基因gmhal3a导入大豆进行过表达，获得耐盐性大豆品种。

10.权利要求1所述的基因gmhal3a、权利要求2所述的蛋白、权利要求3所述的重组表达载体、权利要求4或5所述的转化体、权利要求6所述的引物在提高盐胁迫条件下大豆叶绿素含量中的应用。

技术总结本发明公开一种大豆耐盐基因GmHAL3a及其应用，所述基因GmHAL3a对大豆应对盐胁迫过程有正调控作用，其序列如SEQ ID NO.1所示，编码的蛋白序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的基因GmHAL3a能够显著提高大豆对盐胁迫的耐受性。技术研发人员：赵晋铭,勾涵,邓肃霜,甘季雷,刘娟,郭娜,邢邯受保护的技术使用者：南京农业大学技术研发日：技术公布日：2025/1/6