保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病的营养组合物及其应用的制作方法

本发明涉及食品，尤其涉及一种保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病的营养组合物及其应用。

背景技术：

1、母乳是婴儿最好的食物，为婴儿的生长发育提供了生长发育必备的营养元素。当母乳条件缺乏时，婴幼儿配方食品则成为低龄婴儿的全部能量来源。其中，水解（部分水解或广泛水解）的牛乳蛋白配方通常是消化或者免疫功能较弱的婴儿的选择。但是在蛋白水解酶的加工处理，转化生长因子为代表的部分生理功能重要但含量较低的蛋白质被分解后并未得到补充。

2、母乳中含有21000多个不同的蛋白质，除了主要的营养成分和免疫成分，还具有微量的生长因子等成分。转化生长因子β（transforming growth factor beta, tgf-β）是一多功能蛋白质，可以影响多种细胞的生长、分化、细胞凋亡及免疫调节等功能。转化生长因子-β包括三个亚型，分别为：转化生长因子-β1（tgf-β1），转化生长因子-β2（tgf-β2）和转化生长因子-β3（tgf-β3）。tgf-β1在不同种族和不同个体之间的母乳中的浓度变化很大。在正常的泌乳过程中，tgf-β1浓度在初乳到成熟乳中会轻微下降。母乳研究通常会关注tgf-β1与降低婴儿过敏性疾病、哮喘、特异性皮炎等发生率的关联（khaleva，2019）。

3、在母乳具有免疫活性的蛋白质中，乳铁蛋白是初乳中含量丰富的免疫相关蛋白。在婴儿的机体内，乳铁蛋白受体在小肠中丰度更高。口服摄入的乳铁蛋白在肠道中具有直接的和间接的抗菌活性，直接的抗菌活性通过与病原体表面的脂多糖或磷脂壁酸结合，间接的抗菌活性可能通过乳铁蛋白细胞进入肠道细胞后，调节肠道细胞的基因转录，从而影响粘膜免疫功能，最终实现杀灭细菌（lönnerdal，2009）。

4、但是，目前水解（部分或广泛）的牛乳蛋白配方由于蛋白水解酶的加工处理和配方设计，几乎不含tgf-β1和乳铁蛋白，与母乳中的蛋白质构成种类存在较大差异。同时，目前市场上大多数水解牛奶蛋白的婴幼儿配方奶粉没有考虑tgf-β1等生长因子对于婴幼儿的正常生长发育的重要性。

5、申请人意外发现乳铁蛋白可以调节肠道上皮细胞的细胞因子，增加肠道细胞的tgf-β1的基因的转录，从而增加内源性的tgf-β1。同时，申请人发现tgf-β1对于保持肠道物理屏障的完整性也有重要作用。

6、肠道屏障（intestinal barrier）主要由粘液层、上皮屏障和肠道血管屏障组成，通过促进营养吸收和防止病原体进入，同时参与菌群-肠-脑轴的调节，在健康和疾病中起着至关重要的作用。肠上皮紧密连接蛋白紧密连接的破洞或功能异常时，上皮细胞间的缝隙变大，肠道通透性增大。柳叶刀子刊报道，肠道屏障功能受损及肠道通透性增加与认知障碍等中枢疾病有关；临床和动物证据表明，肠道屏障受损导致菌群、菌群致病性代谢产物或中枢神经相关病理蛋白异位进入血液，或激活炎症反应，或扩散到大脑，引发中枢神经系统病变；通过益生菌/益生元、菌群代谢物等改善肠屏障完整性有益于相关中枢疾病的防治(pellegrini, c. 2023)。因此肠道屏障的完整不仅可以预防病原菌入侵，保障营养的高效吸收和利用，还可以预防因肠道通透性增加而导致的中枢神经系统病变。

技术实现思路

1、为了克服现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病的营养组合物。

2、本发明的目的之二在于提供所述保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病的营养组合物的应用。

3、本发明的目的之一采用如下技术方案实现：

4、一种保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病的营养组合物，包括tgf-β1和乳铁蛋白。

5、作为本发明的一个优选方案，在所述营养组合物中，所述tgf-β1的含量为 0. 5~100 ng/ml。优选地，所述tgf-β1的含量为 0.5~50 ng/ml，所述tgf-β1的含量为0.5~10 ng/ml，所述tgf-β1的含量为1~10 ng/ml，更加优选地，所述tgf-β1的含量为 10 ng/ml。

6、更加具体地，所述tgf-β1在所述营养组合物中含量为0.5 ng/ml、1 ng/ml、1.2ng/ml、1.8 ng/ml、3.35 ng/ml、9.78 ng/ml、10 ng/ml、20 ng/ml、30 ng/ml、40 ng/ml、50ng/ml、60 ng/ml、70 ng/ml、80 ng/ml、90 ng/ml、100 ng/ml。

7、作为本发明的一个优选方案，在所述营养组合物中，所述tgf-β1的含量为 0. 5~100 ng/g。优选地，所述tgf-β1的含量为 0.5~50 ng/g，所述tgf-β1的含量为0.5~10 ng/g，所述tgf-β1的含量为1~10 ng/g。更加优选地，所述tgf-β1的含量为 10 ng/g。

8、更加具体地，所述tgf-β1在所述营养组合物中含量为0.5 ng/g、1 ng/g、1.2 ng/g、1.8 ng/g、3.35 ng/g、9.78 ng/g、10 ng/g、20 ng/g、30 ng/g、40 ng/g、50 ng/g、60 ng/g、70 ng/g、80 ng/g、90 ng/g、100 ng/g。

9、作为本发明的一个优选方案，在所述营养组合物中，所述乳铁蛋白的含量为10~1200 ug/ml。优选地，所述乳铁蛋白的含量为10~800 ug/ml，更加优选地，所述乳铁蛋白的含量为100 ug/ml。

10、更加具体地，所述乳铁蛋白在所述营养组合物中含量为10 ug/ml、15 ug/ml、20ug/ml、30 ug/ml、40 ug/ml、50 ug/ml、60 ug/ml、70 ug/ml、80 ug/ml、90 ug/ml、100 ug/ml、150 ug/ml、200 ug/ml、250 ug/ml、300 ug/ml 、350 ug/ml、400 ug/ml、440 ug/ml、500ug/ml、550 ug/ml、600 ug/ml、700 ug/ml、800 ug/ml、900 ug/ml、1000 ug/ml、1100 ug/ml、1200 ug/ml。

11、作为本发明的一个优选方案，在所述营养组合物中，所述乳铁蛋白的含量为10~1200 ug/g。优选地，所述乳铁蛋白的含量为100~800 ug/g，更加优选地，所述乳铁蛋白的含量为100 ug/g。

12、更加具体地，所述乳铁蛋白在所述营养组合物中含量为10 ug/g、15 ug/g、20 ug/g、30 ug/g、40 ug/g、50 ug/g、60 ug/g、70 ug/g、80 ug/g、90 ug/g、100 ug/g、150 ug/g、200 ug/g、250 ug/g、300 ug/g 、350 ug/g、400 ug/g、440 ug/g、500 ug/g、550 ug/g、600ug/g、700 ug/g、800 ug/g、900 ug/g、1000 ug/g、1100 ug/g、1200 ug/g。

13、作为本发明的一个优选方案，所述tgf-β1来源于以下中的一种或任意组合：乳清蛋白片段、从奶中分离的多肽生长因子、以生物工程产生的重组tgf-β1。

14、更加具体地，所述tgf-β1来源可以以生物活性肽如来自armor proteines（法国）的tm0301或xp-828l的乳清蛋白片段的形式，或以从奶中分离的多肽生长因子的形式，或以生物工程产生的重组tgf-β1的形式。

15、作为本发明的一个优选方案，所述tgf-β1来源于牛乳、羊乳、马乳或骆驼乳。更加优选地，所述tgf-β1来源于牛乳。

16、作为本发明的一个优选方案，所述乳铁蛋白来源于牛乳、羊乳、马乳或骆驼乳。更加优选地，所述乳铁蛋白来源于牛乳。

17、作为本发明的一个优选方案，所述乳铁蛋白用于刺激肠道上皮细胞内转化生长因子的表达，从而诱导肠道内产生内源性的tgf-β1。

18、作为本发明的一个优选方案，所述tgf-β1和/或乳铁蛋白通过以下（ⅰ）~（ⅲ）中的一项或多项实现保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病：

19、（ⅰ）促进肠道上皮紧密连接蛋白的表达；

20、（ⅱ）提高肠道上皮细胞的跨膜电阻；

21、（ⅲ）预防和/或修复肠出血性大肠杆菌引起的上皮屏障功能受损。

22、作为本发明的一个优选方案，所述紧密连接蛋白包括claudin-1。

23、作为本发明的一个优选方案，所述提高肠道上皮细胞的跨膜电阻，包括提高：由于慢性作用或急性作用导致的肠道上皮细胞跨膜电阻的下降。

24、作为本发明的一个优选方案，所述肠出血性大肠杆菌包括肠出血性大肠杆菌o157：h7。

25、本发明的目的之二采用如下技术方案实现：

26、本发明还提供了tgf-β1和乳铁蛋白复合物在制备保护肠道屏障和/或预防中枢神经系统疾病的产品中的应用。

27、作为本发明的一个优选方案，所述产品包括食品、保健品、营养补充剂和药品。

28、作为本发明的一个优选方案，所述产品包括乳制品，所述乳制品包括乳粉、液体乳、干酪、奶油、炼乳或其他乳类制品。

29、本发明还提供了一种乳基水解配方，包括tgf-β1和乳铁蛋白。

30、作为本发明的一个优选方案，所述乳基水解配方还可以包括以下组分中的一种或任意组合：碳水化合物、蛋白质来源、脂质来源、益生菌、益生元等。

31、作为本发明的一个优选方案，所述益生元包括母乳低聚糖。

32、本发明以婴幼儿的生长发育需求、母乳初乳组成和最新的母乳研究为依据，提供了一种乳基水解配方，包括tgf-β1和乳铁蛋白。

33、本发明所提供的乳基水解配方，施用给目标主体诸如婴幼儿时，可以促进婴幼儿肠道屏障完整和/或预防中枢神经系统疾病。

34、作为本发明的一个优选方案，所述乳基水解配方为部分水解配方或深度水解配方。所述部分水解配方中，有35%至60%的蛋白质/肽群具有小于1000道耳顿（dalton）的分子量。所述深度水解配方中，有至少95%的蛋白质/肽群具有小于1000道耳顿（dalton）的分子量者。

35、作为本发明的一个优选方案，所述乳基水解配方为部分水解配方。更加优选地，采用的是乳清蛋白：酪蛋白比例为6：4的部分水解蛋白。

36、相比现有技术，本发明的有益效果在于：

37、（1）本发明所提供的营养组合物，是一种支持肠道粘膜机械屏障完整性的蛋白组合物，可以降低肠道通透性，有效阻止细菌穿透黏膜进入深部组织。

38、（2）本发明所提供的营养组合物，是一种可以预防肠出血性大肠杆菌（ehec）引起的屏障破坏的蛋白组合物，可以防止ehec引起的紧密蛋白分泌减少，预防腹泻及肠出血性大肠杆菌肠炎。

39、（3）本发明所提供的营养组合物，是一种可以补充水解配方中的tgf-β1的含量并促进内源性tgf-β1的产生的蛋白组合物，可以缩小目前的水解的婴幼儿配方食品与母乳在生长因子种类和水平的差异，满足食用水解乳基配方奶粉的低月龄婴幼儿肠道屏障完整和预防中枢神经系统疾病的需求。

40、（4）本发明所提供的营养组合物，可以用于制备水解乳基配方奶粉，以弥补因为水解蛋白加工过程中损失的生长因子，添加了具有免疫功能的乳铁蛋白，可以缩小目前的水解的婴幼儿配方食品与母乳在蛋白质的种类和免疫功效上的差异，使得产品更加贴近母乳。