人HHIPmRNA在食管鳞状细胞癌诊断、靶向治疗中的应用及检测试剂盒与外源性表达质粒

本发明涉及人hhip mrna在食管鳞状细胞癌诊断、靶向治疗中的应用及检测试剂盒与外源性表达质粒，属于生物医学。

背景技术：

1、食管癌是一种常见的人类消化道恶性肿瘤，其高侵袭性与肿瘤异质性始终是食管癌临床治疗难以突破的瓶颈。我国食管癌患者的病理类型主要为鳞状细胞癌，现阶段临床治疗手段主要以手术切除为主，辅助以放化疗、免疫治疗等，患者总体5年生存率不足20％。因此，发现食管鳞状细胞癌发生、发展的新型驱动基因，并明确其在食管鳞状细胞癌恶性进展中的生物学作用及分子机制，对于推动食管鳞状细胞癌临床诊疗策略的发展及患者预后提升具有重大意义。

2、聚合酶链式反应(polymerase chain reaction，pcr)是以碱基互补配对为原则，以dna片段为模版，特定扩增特异性引物对所识别dna序列之间的片段。该技术在靶基因mrna表达水平检测方面展现出了非常高的敏感性与特异性。此外，相比于其它技术，比如sanger测序、二代测序等，pcr技术在检测特定基因mrna表达水平方面具有操作简单、成本较低等优势。用于检测靶基因mrna表达水平的完整pcr过程包括逆转录与实时荧光定量两大步骤，其中引物的特异性决定了其能否有效结合目的mrna逆转录产物(cdna片段)以及最终目的基因mrna表达水平定量的准确性。因此，用于pcr的特异性引物的设计极为重要。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明提供了人hhip mrna在食管鳞状细胞癌诊断、靶向治疗中的应用及检测试剂盒与外源性表达质粒。

2、本发明的技术方案如下：

3、检测人hhip mrna表达水平的试剂在制备食管鳞状细胞癌临床诊断产品中的应用。

4、根据本发明优选的，所述hhip mrna的核苷酸序列如seq no.1所示。

5、根据本发明优选的，所述检测人hhip mrna表达水平的试剂包括特异性识别人hhip mrna逆转录产物cdna的物质；

6、所述特异性识别人hhip mrna逆转录产物cdna的物质为seq id no.2所示的上游引物和seq id no.3所示的下游引物。

7、根据本发明优选的，所述检测人hhip mrna表达水平的试剂的检测样本选自细胞、组织、血浆或血清。

8、特异性上调hhip mrna表达水平的物质在制备食管鳞状细胞癌靶向治疗产品中的应用。

9、根据本发明优选的，所述hhip mrna的核苷酸序列如seq no.1所示。

10、根据本发明优选的，所述特异性上调hhip mrna表达水平的物质为外源性人hhipmrna表达质粒。

11、进一步优选的，所述外源性人hhip mrna表达质粒含有hhip基因编码序列；所述hhip基因编码序列如seq id no.4所示。

12、一种用于食管鳞状细胞癌临床诊断的试剂盒，所述试剂盒包括特异性扩增hhipmrna逆转录产物cdna的引物对；

13、所述特异性扩增hhip mrna逆转录产物cdna的引物对为seq id no.2所示的上游引物和seq id no.3所示的下游引物。

14、根据本发明优选的，所述试剂盒还包括实时荧光定量pcr的检测试剂。

15、一种用于食管鳞状细胞癌靶向治疗的药物，所述药物包括特异性上调hhip mrna表达水平的外源性人hhip mrna表达质粒；

16、所述外源性人hhip mrna表达质粒含有hhip基因编码序列；所述hhip基因编码序列如seq id no.4所示。

17、有益效果：

18、本发明首次发现食管鳞状细胞癌肿瘤组织中的hhip mrna表达水平相较于癌旁正常食管黏膜明显下调，并设计出能够有效检测食管鳞状细胞癌肿瘤组织与临近正常食管黏膜中hhip mrna表达水平的特异性引物对，以及特异性上调hhip mrna表达水平的外源性人hhip mrna表达质粒。本发明实验证明，应用外源性人hhip mrna表达质粒能够有效上调食管鳞状细胞癌细胞中hhip表达水平，同时显著抑制其细胞增殖、迁移与侵袭能力。因此，本发明以hhip mrna作为食管鳞状细胞癌临床诊断与治疗的靶点，提出了hhip mrna在食管鳞状细胞癌临床诊断与靶向治疗中的用途，尤其是在制备食管鳞状细胞癌临床诊断试剂盒与靶向治疗药物中的应用。

技术特征：

1.检测人hhip mrna表达水平的试剂在制备食管鳞状细胞癌临床诊断产品中的应用。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述hhip mrna的核苷酸序列如seq no.1所示。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测人hhip mrna表达水平的试剂包括特异性识别人hhip mrna逆转录产物cdna的物质；

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述检测人hhip mrna表达水平的试剂的检测样本选自细胞、组织、血浆或血清。

5.特异性上调hhip mrna表达水平的物质在制备食管鳞状细胞癌靶向治疗产品中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述hhip mrna的核苷酸序列如seq no.1所示。

7.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述特异性上调hhip mrna表达水平的物质为外源性人hhip mrna表达质粒；

8.一种用于食管鳞状细胞癌临床诊断的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括特异性扩增hhip mrna逆转录产物cdna的引物对；

9.如权利要求8所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括实时荧光定量pcr的检测试剂。

10.一种用于食管鳞状细胞癌靶向治疗的药物，其特征在于，所述药物包括特异性上调hhip mrna表达水平的外源性人hhip mrna表达质粒；

技术总结本发明涉及人HHIP mRNA在食管鳞状细胞癌诊断、靶向治疗中的应用及检测试剂盒与外源性表达质粒。本发明首次发现，食管鳞状细胞癌肿瘤组织中的HHIP mRNA表达水平相较于癌旁正常食管黏膜明显下调，并设计出检测HHIP mRNA表达水平的特异性引物对，以及特异性上调HHIP mRNA表达水平的外源性人HHIP mRNA表达质粒。本发明实验证明，应用外源性人HHIP mRNA表达质粒能够有效上调食管鳞状细胞癌细胞中HHIP表达水平，同时显著抑制其细胞增殖、迁移与侵袭能力。因此，本发明以HHIP mRNA作为食管鳞状细胞癌临床诊断与治疗的靶点，提出了HHIP mRNA在食管鳞状细胞癌临床诊断与靶向治疗中的用途，尤其是在制备食管鳞状细胞癌临床诊断与靶向治疗产品中的应用。技术研发人员：赵小刚,刘芝华,李培超,赵丫卉,田忠献受保护的技术使用者：山东大学第二医院技术研发日：技术公布日：2024/6/18