一种长效胰高血糖素衍生物的制作方法

本发明涉及生物，特别是涉及一种长效胰高血糖素衍生物。

背景技术：

1、胰高血糖素样肽-1(glp-1)是由体内表达的胰高血糖素原(proglucagon)在特定组织中加工而成的小肽，分子量约3kda左右。在人体内，胰高血糖素原分子的选择性切割产生glp-1的两种生物活性形式分别是：glp-1(7-37)-oh和glp-1(7-36)-nh2。其中后者30个氨基酸的形式占体内的主要部分，比例为80％左右。glp-1的生理作用表现为：刺激胰岛β细胞增殖再生，阻止胰岛β细胞凋亡；促进胰岛素分泌，抑制胰腺胰蛋白酶和酯酶的分泌，抑制胰高血糖素分泌，减弱胃肠蠕动，抑制胃排空，降低食欲减少食物吸收及保护心血管系统等。临床可用于2型糖尿病和肥胖症的治疗。和胰岛素相比，glp-1导致低血糖症的风险较低。

2、胰高血糖素((glucagon，简称gcg))作为体内调节血糖的激素，也是由proglucagon在组织中加工形成的，分子量约3kda左右，生物活性形式为：gcg-(1-29)oh。作为体内唯一升血糖的激素，可以用于提高低血糖状况下的血糖水平，促进脂肪分解，增加饱腹感。gcg和降糖类药物联用，可以增加能量消耗，降低体重(physiol rev 97:721–766,2017)。

3、葡萄糖依赖性促胰岛素肽，也称为胃抑制肽(gip)，是一种生理性肠降血糖素激素，可通过刺激胰岛素分泌和抑制胃酸分泌来降低血糖。

4、glp-1和gcg及gip均是由胰高血糖素原(proglucagon)处理加工而成，因此序列上存在很高的同源性，统称为肠促血糖素(incretins)类激素。有报道通过改造gcg序列来达到增强glp-1或gip活性的作用，例如专利wo2011075393及wo2012177444的改造产生了gcg/glp-1双活性杂合肽，专利wo2013192130的改造产生了gcg/gip双活性杂合肽，而wo2015067716提到基于对gcg的改造得到了gcg/glp-1/gip三活性杂合肽。然而，目前仍未有此类双活性甚至多活性的杂合肽药物获批上市。另外，目前在研的双活性或多活些杂合肽类药物普遍活性极高，但众所周知，glp-1r激动剂副作用一般为恶心，呕吐、腹泻，紧张，腹痛等，临床患者甚至会因为严重副作用而退出临床试验，因此，开发出一款副作用更低、疗效相当甚至更优越的产品，仍然具有深远的意义。

技术实现思路

1、鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种长效胰高血糖素衍生物，用于解决现有技术中的问题。

2、为实现上述目的及其他相关目的，本发明第一方面提供一种长效胰高血糖素衍生物，所述长效胰高血糖素衍生物的氨基酸序列包括seq id no.9所示的序列：

3、hx2qgtftsdx10skx13x14dsqaaqdfvqwllaggpssgappps-nh2(seq id no.9)；

4、其中，x2表示aib；

5、x10表示y、或交联了第一长效载体的k；

6、x13表示y、或aib；

7、x14表示l、或交联了第二长效载体的k。

8、在本发明一些实施方式中，所述第一长效载体和/或第二长效载体为脂肪酸链。

9、在本发明一些实施方式中，所述脂肪酸链的碳链长度为5-30，优选为8-30；

10、和/或，所述脂肪酸链的化学结构式如下之一所示：

11、

12、其中，每一n各自独立地为3～28，优选为6～28，更优选为17、18、或19。

13、在本发明一些实施方式中，所述脂肪酸链通过接头与k连接，所述接头选自-abu-、-gaba-、-eaca-、-β-ala-、-γglu-、-d-γglu-或其二肽、-β-ala-β-ala-、-γglu-γglu-及其立体异构体形式、-5-aminopentanoyl-、-8-aminooctanoyl-、-9-aminononanoyl-、-10-aminodecanoyl-、-oeg-、-2xoeg-、-γglu-oeg-、-γglu-2xoeg-、-d-γglu-2xoeg-、-2xoeg-γglu-、-γglu-3xoeg-、-γglu-8xpeg-、-γglu-3xoeg-γ-glu-8xpeg-中的一种或多种的组合。

14、在本发明一些实施方式中，x13表示y，x14表示l，x10表示交联了脂肪酸链的k，接头为-2xoeg-γglu-；

15、和/或，x13表示aib，x14表示l，x10表示交联了脂肪酸链的k，接头为-2xoeg-γglu-；

16、和/或，x13表示aib，x10表示y，x14表示交联了脂肪酸链的k，接头为-2xoeg-γglu-。

17、在本发明一些实施方式中，所述长效胰高血糖素衍生物的氨基酸序列包括seq idno.6～8其中之一所示的序列。

18、本发明第二方面提供上述的长效胰高血糖素衍生物的制备方法，包括：通过固相合成法制备所述长效胰高血糖素衍生物。

19、本发明第三方面提供上述的长效胰高血糖素衍生物在制备药物中的用途，所述药物优选为用于治疗代谢性疾病的药物中的用途。

20、在本发明一些实施方式中，所述代谢性疾病选自糖尿病、肥胖、血脂失调、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪肝炎、与糖尿病相关的其他代谢综合征、甘油三酯过高、低hdl胆固醇及高ldl胆固醇、胰岛素抗性、肥胖症或葡萄糖耐受不良。

21、本发明第四方面提供一种药物组合物，包括治疗有效量的上述的长效胰高血糖素衍生物。

技术特征：

1.一种长效胰高血糖素衍生物，所述长效胰高血糖素衍生物的氨基酸序列包括seq idno.9所示的序列：

2.如权利要求1所述的长效胰高血糖素衍生物，其特征在于，所述第一长效载体和/或第二长效载体为脂肪酸链。

3.如权利要求2所述的长效胰高血糖素衍生物，其特征在于，所述脂肪酸链的碳链长度为5-30，优选为8-30；

4.如权利要求2所述的长效胰高血糖素衍生物，其特征在于，所述脂肪酸链通过接头与k连接，所述接头选自-abu-、-gaba-、-eaca-、-β-ala-、-γglu-、-d-γglu-或其二肽、-β-ala-β-ala-、-γglu-γglu-及其立体异构体形式、-5-aminopentanoyl-、-8-aminooctanoyl-、-9-aminononanoyl-、-10-aminodecanoyl-、-oeg-、-2xoeg-、-γglu-oeg-、-γglu-2xoeg-、-d-γglu-2xoeg-、-2xoeg-γglu-、-γglu-3xoeg-、-γglu-8xpeg-、-γglu-3xoeg-γ-glu-8xpeg-中的一种或多种的组合。

5.如权利要求2所述的长效胰高血糖素衍生物，其特征在于，x13表示y，x14表示l，x10表示交联了脂肪酸链的k，接头为-2xoeg-γglu-；

6.如权利要求2所述的长效胰高血糖素衍生物，其特征在于，所述长效胰高血糖素衍生物的氨基酸序列包括seq id no.6～8其中之一所示的序列。

7.如权利要求1-6任一权利要求所述的长效胰高血糖素衍生物的制备方法，包括：通过固相合成法制备所述长效胰高血糖素衍生物。

8.如权利要求1-6任一权利要求所述的长效胰高血糖素衍生物在制备药物中的用途，所述药物优选为用于治疗代谢性疾病的药物。

9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述代谢性疾病选自糖尿病、肥胖、血脂失调、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪肝炎、与糖尿病相关的其他代谢综合征、甘油三酯过高、低hdl胆固醇及高ldl胆固醇、胰岛素抗性或葡萄糖耐受不良。

10.一种药物组合物，包括治疗有效量的如权利要求1～6任一权利要求所述的长效胰高血糖素衍生物。

技术总结本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种长效胰高血糖素衍生物。本发明提供一种长效胰高血糖素衍生物，所述长效胰高血糖素衍生物的氨基酸序列包括SEQ ID NO.9所示的序列。本发明所提供的长效胰高血糖素衍生物，在动物实验中却显示，和类似脂肪酸修饰的GLP‑1R单激动剂Semaglutide(J Med Chem.2015，58(18):7370‑80)相比，小鼠体内糖耐受性及减重活性都更强，而且可以持续更长的时间。技术研发人员：黄岩山,倪晟,夏金强,朱明月,方晨,孙鹏,赵航,徐兵勇受保护的技术使用者：浙江道尔生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/6/18