一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束及其制备方法

本发明属于功能材料，具体涉及一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束及其制备方法。

背景技术：

1、近年来，随着基因工程技术的发展，蛋白质药物的开发和需求与日俱增，已成为医药产品中的重要组成部分。蛋白质药物具有活性高、特异性强、毒性低、功能明确等特点。由于该类生物制品对活性和纯度的要求极其严格，因此对分离纯化技术提出了新的要求，一方面要求分离纯化技术具有高效的基本特点，更重要是保证蛋白质的活性。

2、目前，保证蛋白质活性的分离纯化方法主要是反胶束萃取法，反胶束萃取法在分离纯化蛋白质时能保证蛋白质活性，但分离纯化时间长，一些课题组利用反胶束萃取分离蛋白质，后萃取时间可达48h～72h，极大的限制了反胶束萃取蛋白质的应用。

3、因此，亟需设计一种保证蛋白质活性的分离纯化方法，能够在保证蛋白质高活性的同时，提高蛋白质萃取效率，促进高纯度蛋白的工业化应用。

技术实现思路

1、本发明的目的是：解决现有分离纯化蛋白质效率低的问题，提供一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束及其制备方法，不仅使蛋白质保持高活性，而且其快速光响应性使其通过光照使萃取的蛋白质快速释放，大幅度提高蛋白质萃取的效率，极大的促进了液液萃取高活性、高纯度蛋白的工业化应用。

2、为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，包括以下步骤：

3、s1、光响应相转移表面活性剂dasas的制备

4、将dasas中间体、烷基胺和四氢呋喃tfh加入到烧瓶中，其中dasas中间体的投入量和烷基胺的投入量摩尔比为1:1，在水浴锅中进行室温反应，并将得到的混合物旋干，得到淡紫色dasas固体，将固体碾成粉末并用正己烷反复洗涤纯化，最终得到光响应相转移表面活性剂dasas；

5、dasas的工艺合成路线如下：

6、

7、s2、快速光响应自组装反胶束的制备

8、将浓度为0.05g/l～0.5g/l的光响应相转移表面活性剂dasas溶解于甲苯和正丙醇的混合溶液后，加入浓度为6g/l～15g/l的ctab中进行超声溶解，再加入等体积的蒸馏水涡流搅拌，最终在上层有机相形成光响应自组装反胶束。

9、所述步骤s1中，dasas中间体通过以下方法制备得到：

10、将糠醛和丙二酸环(亚)异丙酯按摩尔比1:1和蒸馏水置于烧瓶中，在75℃的水浴锅中反应2h，反应结束后冷却至室温，将得到的混合物抽滤，溶解，纯化，旋干，得到淡黄色dasas中间体的固体；

11、dasas中间体的工艺合成路线如下：

12、

13、所述步骤s1中，烷基胺采用二己胺或十二胺，室温反应的时间为30min。

14、所述步骤s2中，甲苯和正丙醇的浓度比为4:1～3，其中甲苯是溶剂，正丙醇是助溶剂。

15、优选的，甲苯和正丙醇的浓度比为4:1，dasas的添加浓度为0.2g/l，ctab的添加浓度为7g/l。

16、所述步骤s2中，超声溶解的时间为30min，涡流搅拌的时间为10min。

17、本发明还公开了一种利用上述的制备方法得到的分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束。

18、本发明的有益效果是：本发明制备得到的快速光响应自组装反胶束，不仅能够使蛋白质保持高活性，而且其快速光响应性使其通过光照使萃取的蛋白质快速释放，大幅度提高蛋白质萃取的效率，极大的促进了液液萃取高活性、高纯度蛋白的工业化应用。

技术特征：

1.一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中，dasas中间体通过以下方法制备得到：

3.根据权利要求1所述的一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中，烷基胺采用二己胺或十二胺，室温反应的时间为30min。

4.根据权利要求1所述的一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中，甲苯和正丙醇的浓度比为4:1～3，其中甲苯是溶剂，正丙醇是助溶剂。

5.根据权利要求4所述的一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，其特征在于：优选的，甲苯和正丙醇的浓度比为4:1，dasas的添加浓度为0.2g/l，ctab的添加浓度为7g/l。

6.根据权利要求1所述的一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中，超声溶解的时间为30min，涡流搅拌的时间为10min。

7.一种利用权利要求1～6中任一所述的制备方法得到的分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束。

技术总结本发明公开了一种分离纯化蛋白质的快速光响应自组装反胶束及其制备方法，属于功能材料技术领域；其制备方法包括以下步骤：以糠醛和丙二酸环(亚)异丙酯为原料合成DASA中间体与二己胺/十二胺反应制备光控相转移非离子表面活性剂DASAs，所合成的DASAs具有良好的相转移能力和循环再生性，将该DASAs与十六烷基三甲基溴化铵CTAB溶解在有机相中自组装形成快速光响应自组装反胶束，该快速光响应自组装反胶束对蛋白质具有良好的选择性和反萃取速率。本发明通过自组装反胶束不仅使蛋白质保持高活性，而且其快速光响应性使其通过光照使萃取的蛋白质快速释放，大幅度提高蛋白质萃取的效率，极大的促进了液液萃取高活性、高纯度蛋白的工业化应用。技术研发人员：朱卫霞,王振亚,寇有明,刘沛鑫受保护的技术使用者：郑州大学技术研发日：技术公布日：2024/6/13