一种中药复方的特征图谱的构建方法、其黄酮醇苷类化合物的含量的测定方法与流程

本申请涉及药物分析和中药检测，特别涉及一种中药复方的特征图谱的构建方法、其黄酮醇苷类化合物的含量的测定方法；所述中药复方由太子参、葛根、淫羊藿组成。

背景技术：

1、由太子参、葛根、淫羊藿组成的中药复方，经临床验证具有益气、养阴、补肾的功效，适用于轻、中度抑郁症中医辨证属气阴两虚、肾气不足证。建立该中药复方的总黄酮醇苷的特征图谱对于其质量控制、确保临床疗效、促进该中药复方的标准化和国际化都具有重要作用，有必要开发一种太子参、葛根和淫羊藿的中药复方的特征图谱的构建方法。

2、太子参、葛根和淫羊藿组成的中药复方中含有大量的黄酮醇苷类化合物，包括淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c，这些黄酮醇苷类化合物具有抑制小胶质细胞m1表型转化，促进m2表型转化，从而改善模型小鼠抑郁样行为、抑制lps诱导的bv2小胶质细胞促炎因子的表达的药理活性，对于抗抑郁起到了关键的调控作用。目前，尚未发现同时测定该中药复方中淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c的含量的方法被报道，为实现该中药复方的进一步的质量把控，有必要研究合适的检测方法，可以实现上述黄酮醇苷类化合物的同时测定。

技术实现思路

1、基于此，本申请一个或多个实施例提供了一种由太子参、葛根、淫羊藿组成的中药复方的特征图谱的构建方法、其黄酮醇苷类化合物的含量的测定方法。

2、本申请的技术方案包括如下内容：

3、一种中药复方的特征图谱的构建方法，所述中药复方由太子参、葛根、淫羊藿组成；

4、所述的构建方法包括如下步骤：

5、取所述中药复方，加提取溶剂进行提取，制得供试品溶液；

6、取所述供试品溶液进行液相色谱分析，制备所述中药复方的特征图谱；

7、其中，所述液相色谱分析的条件包括：

8、(1)流动相a为乙腈，流动相b为体积百分比为0.045％～0.055％的磷酸的水溶液；

9、(2)采用梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序包括：

10、0～12min，维持所述流动相a的体积百分比为22％，

11、12min～13min，所述流动相a的体积百分比由22％上升至24％，

12、13min～27min，维持所述流动相a的体积百分比为24％，

13、27min～28min，所述流动相a的体积百分比由24％上升至47％，

14、28min～32min，维持所述流动相a的体积百分比为47％。

15、一种中药复方中黄酮醇苷类化合物的含量的测定方法，所述中药复方由太子参、葛根、淫羊藿组成，所述黄酮醇苷类化合物包括朝藿定a、朝藿定b、朝藿定c和淫羊藿苷；

16、所述的测定方法包括如下步骤：

17、将作为对照品的淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c混合，加溶剂溶解，配制成不同浓度的混合对照品溶液；

18、取不同浓度的所述混合对照品溶液进行液相色谱分析，建立淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c的浓度和峰面积的标准曲线；

19、取所述中药复方，加提取溶剂进行提取，制得供试品溶液；

20、取所述供试品溶液进行液相色谱分析，获得淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c的峰面积；

21、可选地，将所述淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c的峰面积代入与之分别一一对应的浓度和峰面积的标准曲线计算，得到淫羊藿苷、朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c的浓度，或者

22、将所述淫羊藿苷的峰面积代入与之对应的浓度和峰面积的标准曲线计算，得到淫羊藿苷的浓度，再将淫羊藿苷的浓度的数值分别乘以朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c相对于淫羊藿苷的浓度校正因子，得到朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c的浓度。

23、其中，所述液相色谱分析的条件包括：

24、(1)流动相a为乙腈，流动相b为体积百分比为0.045％～0.055％的磷酸的水溶液；

25、(2)采用梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序包括：

26、0～12min，维持所述流动相a的体积百分比为22％，

27、12min～13min，所述流动相a的体积百分比由22％上升至24％，

28、13min～27min，维持所述流动相a的体积百分比为24％，

29、27min～28min，所述流动相a的体积百分比由24％上升至47％，

30、28min～32min，维持所述流动相a的体积百分比为47％。

31、本申请采用液相色谱法建立了由太子参、葛根、淫羊藿组成的中药复方的指纹图谱，实现对该中药复方中特征成分的表征，同时建立该中药复方的检测方法，可以用于同时测定其中的黄酮醇苷类化合物，从而为该中药复方的质量控制和临床研究提供参考。

技术特征：

1.一种中药复方的特征图谱的构建方法，其特征在于，所述中药复方由太子参、葛根、淫羊藿组成；

2.如权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述液相色谱分析的条件还包括如下至少一种：

3.如权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱的柱长为80mm～120mm，直径为2mm～2.2mm，填料的粒径为1.6μm～2μm。

4.如权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述色谱柱的型号选自如下任一种：waters acquity hss t3，waters acquity beh，waters acquity csh，waters t3和shimadzu shim-pack scepter diol-hilic-120。

5.如权利要求1～4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述提取溶剂选自有机醇，可选地，所述有机醇为甲醇；和/或，

6.中药复方中黄酮醇苷类化合物的含量的测定方法，其特征在于，所述中药复方由太子参、葛根、淫羊藿组成，所述黄酮醇苷类化合物包括朝藿定a、朝藿定b、朝藿定c和淫羊藿苷中的至少一种；

7.权利要求6所述的测定方法，其特征在于，所述液相色谱分析的条件还包括如下至少一种：

8.如权利要求7所述的测定方法，其特征在于，所述色谱柱的柱长为80mm～120mm，直径为2mm～2.2mm，填料的粒径为1.6μm～2μm。

9.如权利要求8所述的测定方法，其特征在于，所述色谱柱的型号选自如下任一种：waters acquityhss t3，waters acquitybeh，waters acquitycsh，waterst3和shimadzu shim-pack scepter diol-hilic-120。

10.如权利要求6～9任一项所述的测定方法，其特征在于，所述提取溶剂选自有机醇，可选地，所述有机醇为甲醇；和/或，

11.如权利要求6～9任一项所述的测定方法，其特征在于，所述朝藿定a、朝藿定b和朝藿定c相对于淫羊藿苷的浓度校正因子根据公式f＝ks/ki计算得到；

技术总结本申请涉及药物分析和中药检测技术领域，特别涉及一种由太子参、葛根、淫羊藿组成的中药复方的特征图谱的构建方法及其黄酮醇苷类化合物的含量的测定方法，其中，液相色谱分析的条件包括：采用流动相A乙腈、流动相B磷酸的水溶液进行梯度洗脱，0～12min，维持流动相A的体积百分比为22％，12min～13min，流动相A的体积百分比由22％上升至24％，13min～27min，维持流动相A的体积百分比为24％，27min～28min，流动相A的体积百分比由24％上升至47％，28min～32min，维持流动相A的体积百分比为47％。该方法可定量测定该中药复方的特征成分的含量，作为药物的质量控制的依据。技术研发人员：李成功,郝娟,王翻红,扎克亚受保护的技术使用者：新疆华春生物药业股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/9