检测CA125的ELISA试剂盒及其应用的制作方法

背景技术

0、背景技术：

1、目前临床上和体检中已经广泛使用ca125/muc16作为标志物诊断或辅助诊断多种癌症以及炎症疾病。血清ca125检测最常用的方法为elisa试剂盒，其由包被抗原或抗体的固相载体、酶标抗体、底物、终止液、对照等成分组成。

2、ca125在某些正常人群中也有稍高的表达、在一些妇科疾病中和老年女性人群中也常有变化，因此，ca125作为疾病标志物，特别是单独作为疾病标志物时特异性并不高，其检测试剂盒的灵敏度和特异性需要精益求精的改进。

技术实现思路

0、技术实现要素：

1、elisa检测试剂盒的性能很大程度上取决于抗体性能，因此，针对上述情况，本申请申请人开发了新的ca125检测抗体并基于此提供了试剂盒。

2、一方面，本申请提供了一种检测ca125的elisa试剂盒，所述试剂盒中包括ca125单克隆抗体125e7和ca125单克隆抗体125g1；

3、所述ca125单克隆抗体125e7的重链cdr1序列为seq id no.3；重链cdr2序列为seqid no.4；重链cdr3序列为seq id no.5；轻链cdr1序列为seq id no.7；轻链cdr2序列为seqid no.8；轻链cdr3序列为seq id no.9；

4、所述ca125单克隆抗体125g1的重链cdr1序列为seq id no.11；重链cdr2序列为seq id no.12；重链cdr3序列为seq id no.13；轻链cdr1序列为seq id no.15；轻链cdr2序列为seq id no.16；轻链cdr3序列为seq id no.17。

5、进一步地，所述试剂盒中的ca125单克隆抗体125e7包被于固相载体上。

6、进一步地，所述ca125单克隆抗体125g1上连接有酶标记。

7、进一步地，所述酶标记为辣根过氧化物酶。

8、进一步地，所述试剂盒还包含选自底物溶液、阴性对照、阳性对照、稀释液、洗涤液、终止液中的一种或多种的成分。

9、进一步地，所述ca125单克隆抗体125e7的重链可变区序列为seq id no.2；轻链可变区序列为seq id no.6

10、进一步地，所述ca125单克隆抗体125g1的重链可变区序列为seq id no.10；轻链可变区序列为seq id no.14。

11、另一方面，本申请提供了上述试剂盒在制备诊断肿瘤的试剂中的应用。

12、进一步地，所述试剂用于检测血清中的ca125蛋白水平。

13、基于已知的elisa检测原理(如双抗夹心法)，本领域技术人员可以常规的选择酶(例如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、半乳糖苷酶等)，并选择适合的底物(如tmb、过氧化氢等)。本领域技术人员可以常规调整试剂盒中各成分的用量和浓度等参数来获得理想的检测效果。

14、本申请的试剂盒使用申请人筛选开发的单克隆抗体作为包被和标记抗体，具备良好的灵敏度和特异性，实际检测结果表明，其效果优于进口试剂盒。

技术特征：

1.一种检测ca125的elisa试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括单克隆抗体125e7和单克隆抗体125g1；

2.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒中的单克隆抗体125e7包被于固相载体上。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒中的单克隆抗体125g1上连接有酶标记。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，所述酶标记为辣根过氧化物酶。

5.根据权利要求1所述的试剂盒，所述试剂盒还包含选自底物溶液、阴性对照、阳性对照、稀释液、洗涤液、终止液中的一种或多种的成分。

6.根据权利要求1所述的试剂盒，所述单克隆抗体125e7的重链可变区序列为seq idno.2；轻链可变区序列为seq id no.6。

7.根据权利要求1所述的试剂盒，所述单克隆抗体125g1的重链可变区序列为seq idno.10；轻链可变区序列为seq id no.14。

8.根据权利要求1-7任一项所述的试剂盒在制备诊断肿瘤的试剂中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，所述试剂用于检测血清中的ca125蛋白水平。。

技术总结本申请提供了一种检测CA125的ELISA试剂盒及其应用，其包括单克隆抗体125E7，其重链CDR1序列为SEQ ID NO.3；CDR2序列为SEQ ID NO.4；CDR3序列为SEQ ID NO.5；轻链CDR1序列为SEQ ID NO.7；CDR2序列为SEQ ID NO.8；CDR3序列为SEQ ID NO.9以及单克隆抗体125G1；其重链CDR1序列为SEQ ID NO.11；CDR2序列为SEQ ID NO.12；CDR3序列为SEQ ID NO.13；轻链CDR1序列为SEQ ID NO.15；CDR2序列为SEQ ID NO.16；CDR3序列为SEQ ID NO.17。技术研发人员：张权庚,赵雪,陈霞,徐文,胡义忠,黄金保,赵丽虹受保护的技术使用者：安徽德合功生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/9/29