一种智能纳米化疗药物的制备方法及其在腹腔转移肿瘤热灌注治疗中的应用

本发明属于生物医药，尤其涉及一种智能纳米化疗药物、其制备方法及在腹腔转移肿瘤热灌注治疗中的应用。

背景技术：

1、全球范围内，癌症已成为人类死亡主要原因。近年来，癌症治疗已取得长足进步，但恶性肿瘤局部浸润和远端转移仍然极大威胁患者的生存。其中，转移性腹膜肿瘤(peritoneal metastatic carcinoma)，是癌细胞经血路腹膜转移或腹膜直接种植生长形成的一种腹腔内转移肿瘤，患者病情发展快、预后差，生存期短，死亡率高，临床治疗难度大，因此，多需采用联合治疗措施延长患者生存。

2、目前，腹腔转移瘤的临床治疗方式以化疗为主，辅以手术、放疗、靶向治疗或者免疫治疗等其它治疗方案。但由于腹腔内存在一定数量的游离肿瘤细胞(peritonealfreecancercell，pfcc)和3mm以下转移瘤结节，手术无法彻底清除，加之生理性血浆-腹腔屏障的存在又限制了全身给药后腹腔内有效药物浓度累积，化疗效果差，导致患者预后不良。针对腹腔转移瘤化疗反应弱、治疗预后差的问题，临床发展了一种将手术治疗与局部治疗相结合的治疗方式即腹腔热灌注治疗。

3、腹腔热灌注治疗是指在细胞减少术(crs)切除腹膜表面及上下腹部器官中的一部分肉眼可见的肿瘤后，通过导管向腹腔内循环灌注恒温加热的化疗溶液，并维持一定时间。通过加热与化疗的协同增敏作用和治疗液体循环灌注冲刷作用，可以有效清除腹腔内残留的癌细胞及微小肿瘤灶。

4、然而持续热冲淋下，肿瘤细胞受环境高温刺激，过表达热休克蛋白，出现热耐受现象；且灌注用化疗药物对肿瘤不存在靶向特异性，导致热灌注后期肿瘤杀伤效果下降与治疗过程中系统毒性增强。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种尺寸较小、具有光热转化效能并且对肿瘤部位具有靶向性的智能纳米化疗药物、完善其制备方法及其在腹腔转移肿瘤热灌注治疗中应用。

2、本发明提供了一种智能纳米化疗药物的制备方法，包括以下步骤：

3、s1)将钼酸铵与水混合，得到钼酸铵溶液；

4、将磷酸二氢钠与水混合，得到磷酸二氢钠溶液；

5、s2)将钼酸铵溶液与磷酸二氢钠溶液混合，搅拌至无色，得到混合溶液；

6、s3)将混合溶液与还原剂混合，反应后，加入醇溶剂沉淀，得到纳米粒子；所述还原剂选自坏血酸钠和/或抗坏血酸衍生物；

7、s4)将所述纳米粒子与化疗药物在水中混合，得到智能纳米化疗药物。

8、优选的，所述钼酸铵溶液的浓度为0.1～1mol/l

9、所述磷酸二氢钠溶液的浓度为0.1～0.5mol/l。

10、优选的，所述钼酸铵与磷酸二氢钠的摩尔比为(40～60)：1。

11、优选的，所述还原剂选自l-抗坏血酸钠和/或l-抗坏血酸；

12、所述化疗药物选自丝裂霉素c、顺铂与5-氟尿嘧啶中的一种或多种。

13、优选的，所述还原剂以还原剂溶液的形式加入；所述还原剂溶液的质量浓度为100～200mg/ml；

14、所述混合溶液与还原剂溶液的体积比为(3～10)：1；

15、所述纳米粒子与化疗药物的质量比为(40～60)：1。

16、优选的，所述步骤s2)中混合的转速为1000～2000rpm；

17、所述步骤s3)中反应至出现蓝黑色，加入醇溶剂沉淀；

18、所述醇溶剂为乙醇。

19、优选的，所述纳米复合物的粒径小于10nm。

20、本发明还提供了一种上述制备方法制备的智能纳米化疗药物。

21、本发明还提供了一种上述制备方法制备的智能纳米化疗药物在制备用于腹腔热灌注治疗药物的应用。

22、本发明还提供了一种纳米粒子的制备方法，包括以下步骤：

23、s1)将钼酸铵与水混合，得到钼酸铵溶液；

24、将磷酸二氢钠与水混合，得到磷酸二氢钠溶液；

25、s2)将钼酸铵溶液与磷酸二氢钠溶液混合，搅拌至无色，得到混合溶液；

26、s3)将混合溶液与还原剂混合，反应后，加入醇溶剂沉淀，得到纳米粒子；所述还原剂选自坏血酸钠和/或抗坏血酸衍生物。

27、本发明提供了一种智能纳米化疗药物的制备方法，包括以下步骤：s1)将钼酸铵与水混合，得到钼酸铵溶液；将磷酸二氢钠与水混合，得到磷酸二氢钠溶液；s2)将钼酸铵溶液与磷酸二氢钠溶液混合，搅拌至无色，得到混合溶液；s3)将混合溶液与还原剂混合，反应后，加入醇溶剂沉淀，得到纳米粒子；所述还原剂选自坏血酸钠和/或抗坏血酸衍生物；s4)将所述纳米粒子与化疗药物在水中混合，得到智能纳米化疗药物。与现有技术相比，本发明制备的智能纳米化疗药物具有以下优点：

28、1)材料尺寸较小易于代谢：超小纳米粒子(≤10nm)很难被吞噬细胞及网状内皮系统识别和清除，可轻易穿过肾脏的过滤系统被代谢排出体外，通过透射电子显微镜(tem)图发现，此智能纳米化疗药物的直径小于10nm，这表明此智能纳米化疗药物易代谢；

29、2)具有较高的光热转换效率：将此智能纳米化疗药物在近红外一区(nir i)808nm的近红外光(nir，1.5w/cm2)下照射10min，根据在此条件下的温度变化，计算出光热转换效率为26.68％，这就表明此智能纳米化疗药物体系具备良好的光热转换效率；

30、3)具有酸性自组装性能：在弱酸条件下处理此智能纳米化疗药物，结果显示随着ph变小，材料表面电荷分布逐渐变小，并且材料水合粒径逐渐变大，这表明此智能纳米化疗药物在弱酸条件下会发生自组装；

31、4)对热耐受细胞的杀伤效果显著：在生理环境下，分别利用酸化处理后的智能纳米化疗药物和丝裂霉素c与热耐受的结直肠癌细胞共孵育并且激光照射后，智能纳米化疗药物的细胞杀伤效果显著高于丝裂霉素c，表明本发明制备的智能纳米化疗药物能够有效杀伤热耐受癌细胞。

技术特征：

1.一种智能纳米化疗药物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述钼酸铵溶液的浓度为0.1～1mol/l

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述钼酸铵与磷酸二氢钠的摩尔比为(40～60)：1。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述还原剂选自l-抗坏血酸钠和/或l-抗坏血酸；

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述还原剂以还原剂溶液的形式加入；所述还原剂溶液的质量浓度为100～200mg/ml；

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s2)中混合的转速为1000～2000rpm；

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述智能纳米化疗药物的粒径小于10nm。

8.权利要求1～7任意一项制备方法制备的智能纳米化疗药物。

9.权利要求1～7任意一项制备方法制备的智能纳米化疗药物在制备用于腹腔热灌注治疗药物的应用。

10.一种纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

技术总结本发明提供了一种智能纳米化疗药物的制备方法。本发明制备的纳米化疗药物尺寸小，且具有抗氧化效果，载药后缓解了化疗药物在腹腔热灌注治疗中带来的肾脏损伤；具有光热转化效果，能通过NIR照射将光能转化为热能，实现腹腔热灌注治疗后，对腹腔内部肿瘤结节的无创靶向加热治疗，对热耐受肿瘤细胞发挥二次增强杀伤作用；能够响应肿瘤微环境的弱酸性，形成自组装结构，由接近小分子的高分散状态转变为微米尺寸的聚集态，精确富集在肿瘤部位发挥后续治疗作用。本材料将有效解决结直肠癌、卵巢癌等腹腔肿瘤腹腔热灌注化疗中肾脏负担大、细胞产生热耐受以及毒副作用大等的局限性，对实现腹腔转移瘤的精确治疗，改善患者预后具有重要意义。技术研发人员：李景虹,李玉捷,吴琪娉,申颖受保护的技术使用者：中国科学技术大学技术研发日：技术公布日：2024/10/10