一种复合益生菌在制备对畜禽类动物具有抗氧化和降解胆固醇活性的益生菌剂中的应用的制作方法

本发明属于微生物，涉及一种复合益生菌在制备对畜禽类动物具有抗氧化和降解胆固醇活性的益生菌剂中的应用。

背景技术：

1、胆固醇广泛存在于动物体内，是体内组织细胞的基本活性物质。而机体内胆固醇过多可能会导致动脉脂质沉积，引发高脂血症，从而提高心脑血管类疾病的发病率。因此，降低血清胆固醇对于防治高脂血症、降低心脑血管疾病的发病率具有重要的意义。氧化作用是机体正常存在的，但同时也可能带来很大的危害，动脉粥样硬化、关节炎、心血管等疾病都和自由基的作用有关。目前饲料中使用的天然抗氧化物质主要是从动植物中提取的，但是动植物中天然抗氧化物质含量较低，提取工艺复杂、成本高，而且从这些资源提取势必使这些动植物资源遭到严重破坏，造成生物多样性和生态环境的损失。研究开发低廉、安全的天然抗氧化物已成为研究热点。

2、益生菌是一类能够改善宿主特定部位微生物平衡并兼有其他益生生理功能的微生物，乳酸菌是目前公认安全等级较高的，可在食品和饲料中使用的微生物，可利用菌体本身以及在肠道中分泌胆盐水解酶来降低血清胆固醇，从而起到防治高脂血症的作用。同时，许多体内外实验也表明，某些乳酸菌在长期进化演变过程中具有显著的抗氧化活性，可清除体内的自由基，能够通过清除自由基和抑制脂质氧化，进而改善氧化应激，平衡脂类代谢，减少高脂血症的发生。因此，乳酸菌作为一种功能性的饲料添加剂，具有重要的开发潜力。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种复合益生菌在制备对畜禽类动物具有抗氧化和降解胆固醇活性的益生菌剂中的应用。

2、为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种复合益生菌在制备对畜禽类动物具有抗氧化和降解胆固醇活性的益生菌剂中的应用，所述复合益生菌由保藏编号为cgmcc 21879的凝结芽孢杆菌bacillus coagulans bc66菌株、保藏编号为cctcc no：m 2023230的乳酸片球菌pediococcus acidilactici pa153菌株和保藏编号为cgmcc 21766的植物乳杆菌lactobacillus plantarum lp194菌株组成。

4、本发明创造性地发现将bc66菌株、pa153菌株和lp194菌株复配使用，对畜禽类动物具有优异的抗氧化和降低胆固醇水平的功效，且三种菌株之间存在潜在的相互配合关系，在上述功效上协同增效，在使用总菌量一致的情况下，与单一的bc66菌株、pa153菌株或lp194菌株相比，三种菌的复配方式的效果显著提高。因此，该益生菌剂为提高畜禽类动物的体内抗氧化性和降低胆固醇水平提供了全新的策略。由于凝结芽孢杆菌、乳酸片球菌、植物乳杆菌均为益生菌，因此其在用于制备相关功效产品时，安全性高，且不易产生抗性。

5、优选地，所述bc66菌株、pa153菌株与lp194菌株的活菌数之比为(1-3):(1-3):1，例如1:1:1、1:2:1、1:3:1、2:1:1、2:2:1、2:3:1、3:1:1、3:2:1、3:3:1等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

6、基于bc66菌株、pa153菌株与lp194菌株的潜在相互作用关系，本发明还发现当三种菌株以上述特定的活菌数配比进行复配使用时，其在提高畜禽类动物的体内抗氧化性和降低胆固醇方面的功效更加显著。

7、优选地，所述益生菌剂中的总活菌数不低于1×1010cfu/g或1×1010cfu/ml，例如1×1010cfu/ml(cfu/g)、5×1010cfu/ml(cfu/g)、1×1011cfu/ml(cfu/g)、5×1011cfu/ml(cfu/g)、1×1012cfu/ml(cfu/g)、1×1013cfu/ml(cfu/g)、1×1014cfu/ml(cfu/g)等；该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

8、优选地，所述益生菌剂的剂型包括溶液剂、冻干粉剂、胶囊剂、片剂或颗粒剂。本发明所涉及的益生菌剂的剂型不受限制，包括最常用的冻干粉剂，或进一步制得的胶囊剂、片剂或颗粒剂。

9、优选地，所述益生菌剂的剂型为冻干粉剂，所述益生菌剂由包括如下步骤的方法制得：

10、将bc66菌株、pa153菌株和lp194菌株分别接种于培养基中依次进行活化和发酵培养，得到发酵液；发酵液分别离心，与保护剂混合后进行冷冻干燥，得到bc66菌粉、pa153菌粉和lp194菌粉；将bc66菌粉、pa153菌粉和lp194菌粉按照活菌数配比进行混合，得到所述益生菌剂。

11、优选地，所述保护剂包括脱脂乳、明胶、糊精、阿拉伯胶、右旋糖酐、藻胶钠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、乳糖、海藻糖、山梨醇或木糖醇中的任意一种或至少两种的组合。

12、第二方面，本发明提供一种具有抗氧化和降解胆固醇活性的畜禽类动物饲料，所述畜禽类动物饲料包括畜禽类动物基础饲料和益生菌剂，所述益生菌剂中的菌株由保藏编号为cgmcc 21879的凝结芽孢杆菌bacillus coagulans bc66菌株、保藏编号为cctcc no：m2023230的乳酸片球菌pediococcus acidilactici pa153菌株和保藏编号为cgmcc 21766的植物乳杆菌lactobacillus plantarum lp194菌株组成。

13、优选地，所述畜禽类动物饲料中的总活菌数不低于1×108cfu/g或1×108cfu/ml，例如1×108cfu/ml(cfu/g)、5×108cfu/ml(cfu/g)、1×109cfu/ml(cfu/g)、5×109cfu/ml(cfu/g)、1×1010cfu/ml(cfu/g)、1×1011cfu/ml(cfu/g)、1×1012cfu/ml(cfu/g)等；该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

14、优选地，所述bc66菌株、pa153菌株与lp194菌株的活菌数之比为(1-3):(1-3):1，例如1:1:1、1:2:1、1:3:1、2:1:1、2:2:1、2:3:1、3:1:1、3:2:1、3:3:1等，上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

15、优选地，所述益生菌剂的剂型包括溶液剂、冻干粉剂、胶囊剂、片剂或颗粒剂。上述益生菌剂的剂型不受限制，包括最常用的冻干粉剂，或进一步制得的胶囊剂、片剂或颗粒剂。

16、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

17、本发明创造性地发现将bc66菌株、pa153菌株和lp194菌株复配使用，对畜禽类动物具有优异的抗氧化和降低胆固醇水平的功效，且三种菌株之间存在潜在的相互配合关系，在上述功效上协同增效，在使用总菌量一致的情况下，与单一的bc66菌株、pa153菌株或lp194菌株相比，三种菌的复配方式的效果显著提高。因此，该益生菌剂为提高畜禽类动物的体内抗氧化性和降低胆固醇水平提供了全新的策略。由于凝结芽孢杆菌、乳酸片球菌、植物乳杆菌均为益生菌，因此其在用于制备相关功效产品时，安全性高，且不易产生抗性。

18、本发明所涉及的bc66菌株的分类命名为凝结芽孢杆菌bacillus coagulans，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2021年03月08日，保藏编号为cgmcc 21879，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

19、本发明所涉及的pa153菌株的分类命名为乳酸片球菌pa153 pediococcusacidilactici pa153，保藏单位为中国典型培养物保藏中心，保藏时间为2023年03月02日，保藏编号为cctcc no：m 2023230，地址为：中国.武汉.武汉大学。

20、本发明所涉及的lp194菌株的分类命名为植物乳杆菌lactobacillus plantarum，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2021年01月29日，保藏编号为cgmcc 21766，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。