一株肺炎克雷伯菌及其在制备用于降解缬氨酸的产品中的应用

本发明涉及微生物学、生物化学和发酵工程，特别涉及一株肺炎克雷伯菌及其在制备用于降解缬氨酸的产品中的应用。

背景技术：

1、缬氨酸参与多种生化途径，这些途径对神经健康和功能至关重要。它是甘氨酸和丝氨酸的合成前体，这两种氨基酸在突触传输和神经信号传导中具有重要作用。此外，缬氨酸代谢还贡献于乙酰辅酶a（acetyl-coa）的生成，后者是能量生产和脂质合成的重要底物。研究表明，阿尔兹海默症患者的缬氨酸代谢可能受到影响。缬氨酸的代谢异常可能导致甘氨酸和丝氨酸水平下降，从而影响神经元的正常功能。最近的研究表明，肠道菌群的失衡与多种疾病，如肠道疾病、代谢性疾病和免疫性疾病的发展有关。这些疾病的发展可能会影响缬氨酸的代谢和利用方式，增加健康风险。

2、因此，有必要提供一种能够降低宿主缬氨酸的菌株。

技术实现思路

1、本发明目的是提供一株肺炎克雷伯菌及其在制备用于降解缬氨酸的产品中的应用，该菌株能够有效地降解缬氨酸。

2、为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、在本发明的第一方面，提供了一株肺炎克雷伯菌，所述肺炎克雷伯菌的保藏编号为：cctcc no：m 20241526。

4、在本发明的第二方面，提供了所述的肺炎克雷伯菌在制备用于降解缬氨酸的产品中的应用。

5、在本发明的第三方面，提供了一种发酵菌剂，所述发酵菌剂包括：

6、将所述的肺炎克雷伯菌进行发酵获得的发酵液；

7、或将所述发酵液经喷雾干燥获得干粉菌剂。

8、在本发明的第四方面，提供了一种用于降解缬氨酸的产品，所述用于降解缬氨酸的产品包括所述的肺炎克雷伯菌、或者所述的发酵菌剂。

9、进一步地，所述用于降解缬氨酸的产品还包括药学上可接受的辅料。

10、在本发明的第五方面，提供了采用所述的肺炎克雷伯菌降解缬氨酸的方法，所述方法包括：

11、将所述的肺炎克雷伯菌或者所述的发酵菌剂加入到培养基中，或者灌胃或口服。

12、进一步地，所述培养基为lb培养基。

13、进一步地，所述培养的温度为36℃-38℃，培养ph范围6.5-7.5，最适应的接种量5%-10%。

14、作为一种具体的实施方式，采用所述的肺炎克雷伯菌降解缬氨酸的方法具体包括：

15、将该肺炎克雷伯菌接种在含有lb液体培养基的试管中，35 ℃摇床震荡培养过夜活化；

16、将培养过夜后的菌液离心处理，弃上清，用无菌水重悬，再次离心处理，弃上清，加无菌水重悬；将重悬得到的菌液od600转接于含有缬氨酸为lb培养基的三角摇瓶中，摇床震荡培养。

17、进一步地，所述方法还包括：对缬氨酸的降解率进行测定，具体包括：

18、配制缬氨酸标品溶液，使用气相色谱-质谱联用仪测定缬氨酸的峰面积，以峰面积与浓度的关系获得缬氨酸的标准曲线；

19、将待测样品用气相色谱-质谱联用仪检测，获得待测样品的峰面积，代入所述标准曲线，获得待测样品中缬氨酸的浓度c2；

20、将对照组样品用气相色谱-质谱联用仪检测，获得对照组样品的峰面积，代入所述标准曲线，获得对照组中缬氨酸的浓度c1；

21、通过公式(c1-c2)/c1，获得缬氨酸的降解率。

22、所述对照组样品为空白培养基，与实验组（待测样品）在同样的条件下进行培养。

23、进一步地，所述气相色谱-质谱联用仪的型号是g1540n，所用色谱柱是tracegoldtg-5ms色谱柱 30m×0.25 μm，气体流量：高纯氮气：1.5 ml/min，氢气：30ml/min，空气：300ml/min.进样口和检测器温度为280℃；柱温：初始温度50℃保持2min,以每分钟40℃的速率升至230℃，以每分钟20℃的速率升至320℃保持20min;进样量为1 μl;检测器温度：325℃。

24、本发明实施例中的一个或多个技术方案，至少具有如下技术效果或优点：

25、1、本发明提供的一株肺炎克雷伯菌及其应用，从低缬氨酸志愿者的新鲜粪便样品中分离出能降解高浓度缬氨酸的菌，24小时的降解率达到了30%，72小时的降解率达到了51%。

26、2、本发明提供一种参与缬氨酸代谢的肠道菌，为进一步理解肠道菌群对缬氨酸的作用能为人体缬氨酸代谢的调节提供新的途径。

27、本发明的肺炎克雷伯菌的保藏日期为2024年7月9日，保藏编号为cctcc no：m20241526。其分类命名为 klebsiella pneumoniae tongji ，保藏单位名称为中国典型培养物保藏中心，地址为中国湖北省武汉市武汉大学，邮编：430072。

技术特征：

1.一株肺炎克雷伯菌，其特征在于：所述的肺炎克雷伯菌的分类命名为klebsiella pneumoniae，保藏编号为cctcc m 20241526。

2.一种如权利要求1所述的肺炎克雷伯菌在制备用于降解缬氨酸的产品中的应用。

3.一种发酵菌剂，其特征在于，所述发酵菌剂包括：

4.一种用于降解缬氨酸的产品，其特征在于，所述用于降解缬氨酸的产品包括权利要求1所述的肺炎克雷伯菌、或者权利要求3所述的发酵菌剂。

5.根据权利要求4所述的一种用于降解缬氨酸的产品，其特征在于，所述用于降解缬氨酸的产品还包括药学上可接受的辅料。

6.一种利用肺炎克雷伯菌降解缬氨酸的方法，其特征在于，所述方法包括：将权利要求1所述的肺炎克雷伯菌或者权利要求3所述的发酵菌剂加入到培养基中，或者灌胃或口服。

7.根据权利要求6所述的的方法，其特征在于，所述的肺炎克雷伯菌或者所述的发酵菌剂加入到培养基中的培养温度为36℃-38℃。

技术总结本发明公开了一株肺炎克雷伯菌及其在制备降解缬氨酸产品中的应用，属于微生物学、生物化学和发酵工程技术领域。本发明降解缬氨酸的肺炎克雷伯菌为保藏编号为CCTCC M 20241526的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae）Tongji，该菌株能够能降低宿主缬氨酸水平，且对多种抗生素具有高度敏感性，具有临床应用前景。技术研发人员：王雄,李迪,程黎明受保护的技术使用者：华中科技大学同济医学院附属同济医院技术研发日：技术公布日：2024/11/4