一株用于改善面部毛孔粗大问题的副干酪乳杆菌及其应用的制作方法

本发明涉及功能微生物筛选与应用，具体涉及一株副干酪乳杆菌及其在改善面部毛孔粗大问题中的应用。

背景技术：

1、皮肤微生态是指皮肤表面的细菌、真菌和原生动物等各种微生物，与皮肤表面的细胞、组织及其分泌物，以及皮肤微环境共同组成的生态系统，皮肤微生物、宿主和外界环境三者共同构成了皮肤生态平衡。近年来，根据皮肤微生态研究成果开发的各类化妆品原料越来越多，相应的原料来源有益生菌、益生元和后生元等。后生元是指对宿主健康有益的灭活微生物或其成分，包括益生菌细胞壁成分，如胞外多糖、肽聚糖等，也包括益生菌细胞分泌的代谢产物，如乳酸、乙酸、细菌素和各类小分子肽。其作用机制包括调节常驻菌群、增强上皮屏障功能、调节局部和全身免疫、调节系统代谢和通过神经系统发出系统信号。有研究表明，鞘磷脂酶、脂磷壁酸和乳酸等后生元能够增加角质层神经酰胺的生成，而角质层神经酰胺水平降低通常被认为是特异性皮炎、银屑病和刺激性皮炎的可能病因；含有益生菌发酵产物的护肤品可以紧致皮肤，淡化脸部细纹，同时发酵产物中的α-酮戊二酸能间接促进神经酰胺的生成，增强皮肤屏障；kim等人研究发现，植物乳植杆菌apsulloc331261可以减少铜绿假单胞菌的生长，调控皮肤微生态平衡。由此可见，后生元具有改善皮肤健康问题的重要应用潜能，并且已经成为了皮肤科学界、化妆品行业最为关注的热点之一。

2、细腻均匀的肤质是健康美丽皮肤的重要外在表现之一，但是受到多种外源性和内源性因素的影响，毛孔粗大问题始终困扰着众多人群。面部皮肤毛孔粗大不仅会严重妨碍美观，还会影响到皮肤正常功能的发挥。目前，临床上对于毛孔粗大通常将其定义为：依据皮肤分析仪检测到的任何一个尺寸大于0.02mm2的圆形毛囊开口。引起毛孔粗大可能因素包括：皮脂分泌量过高、皮肤衰老导致毛囊周围支持结构弹性丧失、皮肤炎症导致皮肤组织水肿进而引起毛孔粗大。例如，当皮脂产生速率每3h超过1.5mg/10cm2时，个体可能会出现油性皮肤、痤疮、毛孔粗大和脂溢性皮炎等状况；随着年龄的增长，皮肤弹性逐渐丧失，毛囊周围的支持结构缺乏，毛孔周围的弹性降低，毛囊体积增加。紫外线照射产生的光老化，也会损害皮肤胶原纤维，破坏皮肤结构完整性；不良生活习惯如熬夜、生活作息不规律会通过影响肾血管紧张素-醛固酮系统引发神经血管功能障碍，导致血管扩展，造成皮肤炎症和局部水肿。

3、目前，治疗毛孔粗大的方法主要有药物及化学制剂、光电治疗、聚焦超声、光动力治疗、肉毒素治疗、微针治疗和水光注射治疗。但是现有治疗方案存在治疗成本高、药物毒副作用大，以及个体治疗依从性差等问题。因此，开发一株具有改善面部毛孔粗大问题的乳酸菌具有重要的社会经济效益。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一株副干酪乳杆菌及其在改善面部毛孔粗大问题中的应用。所述副干酪乳杆菌的耐酸能力和抗氧化能力很强，能有效改善由皮肤氧化、老化等导致的面部毛孔粗大的问题，可广泛应用于护肤品中。

2、本发明一方面涉及副干酪乳杆菌发酵裂解液在改善面部毛孔粗大问题中的应用。

3、所述副干酪乳杆菌为副干酪乳杆菌vhprobi e12(lacticaseibacillusparacasei vhprobi e12)，已于2021年5月24日保藏于中国武汉武汉大学的中国典型培养物保藏中心，其保藏号为cctcc no：m2021587。

4、所述副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液的制备方法包括如下步骤：

5、(1)发酵液制备

6、在无菌条件下，将副干酪乳杆菌vhprobi e12种子液以3％的体积比接种于发酵培养基中，37℃条件下培养24h，转速为100rpm，通风量为1l/min，罐压为0.05mpa，发酵终点ph在3.5-4.2，制备得到副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵液；

7、(2)发酵液乳化均质

8、利用均质机对副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵液进行乳化均质，压力1000bar，乳化均质3遍后，再置于80℃水浴锅中水浴30min，彻底杀灭发酵液中的活细胞，即得到副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液。

9、所述发酵培养基中各组分及其含量分别为：蔗糖25g/l、酵母粉30g/l、大豆蛋白胨20g/l、硫酸镁0.10g/l和硫酸锰0.05g/l。

10、本发明还涉及所述副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液在护肤品中的应用。

11、本发明还提供了一种改善面部毛孔粗大问题的护肤品，包含副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液。

12、所述护肤品还包括丁二醇、鲸蜡醇乙基己酸酯、甘油辛酸酯/癸酸酯、鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯、山梨坦橄榄油酸酯、鲸蜡硬脂醇、聚二甲基硅氧烷、1，2-己二醇、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物、对羟基苯乙酮、苯氧乙醇、peg-100硬脂酸酯、乙二钠中的任意一种或多种。

13、所述护肤品中各组分及其质量百分比分别为：副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液8％、丁二醇5％、鲸蜡醇乙基己酸酯2％、甘油辛酸酯/癸酸酯1.5％、鲸蜡硬脂醇橄榄油酸酯1.4％、山梨坦橄榄油酸酯0.6％、鲸蜡硬脂醇0.5％、聚二甲基硅氧烷0.5％、1，2-己二醇0.4％、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/vp共聚物0.4％、对羟基苯乙酮0.3％、苯氧乙醇0.25％、peg-100硬脂酸酯0.2％、乙二钠0.05％和水78.9％。

14、本发明提供的副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液能够降低hacat细胞中活性氧水平，缓解皮肤氧化应激导致的毛孔粗大问题。

15、本发明提供的副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液能够有效降低面部皮肤经氧化刺激后产生的mda水平，有助于解决毛孔粗大问题。

16、本发明提供的副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液与皮肤成纤维细胞共孵育后，后者i型胶原蛋白表达量上升，能够改善皮肤老化带来的弹性松弛，使毛孔周围弹性下降得以减轻，从而缓解毛孔增大现象。

17、本发明提供的副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液对人成纤维细胞增殖有明显的促进作用，可以缓解皮肤老化引起的毛孔粗大。

18、本发明提供的副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液能够起到抗炎作用，缓解因外界刺激导致的皮肤免疫炎症反应，增强皮肤屏障，减轻外源性刺激物质导致的毛孔粗大问题。

19、本发明提供的副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液能够抑制皮脂腺细胞脂质合成，脂质抑制率达到20.88％，可防止油脂分泌过多毛孔堵塞进而造成的毛孔粗大问题。

20、人体功效试验证实，使用副干酪乳杆菌vhprobi e12发酵裂解液制成的润肤乳能显著改善鼻周毛孔粗大问题，经皮水分流失现象减轻，皮肤含水量增加，皮肤毛孔粗大情况减轻，能够使皮肤趋于光滑细嫩。经过60天使用后，受试者鼻周毛孔、额头毛孔和脸颊毛孔密度显著减少。问卷调查结果显示，受试者鼻周皮肤感觉更平滑、细嫩和舒服。