一株罗伊氏粘液乳杆菌及其在降解亮氨酸含量中的应用

本发明属于微生物领域，涉及食品发酵，特别是指一株罗伊氏粘液乳杆菌及其在降解亮氨酸含量中的应用。

背景技术：

1、流行病学调查研究发现，肥胖人群血液循环中亮氨酸水平显著高于正常人群。进一步研究发现，体内血液循环中亮氨酸水平升高明显增加未来机体患胰岛素抵抗和2型糖尿病的风险。此外，亮氨酸限制饮食具有增加机体能量消耗、减少脂肪生成、提高葡萄糖耐量、改善胰岛素抵抗、促进白色脂肪组织棕色化、改善肠道菌群组成、改善认知功能和延长寿命等许多有益于健康的作用。并且，这种亮氨酸限制饮食模式并不会引起骨骼肌蛋白质合成的减少和肌肉萎缩。然而，由于天然食品中亮氨酸几乎均已结合态的形式存在于蛋白质中，目前没有安全、健康、可持续的降低食品中亮氨酸含量的方法。乳酸菌作为公认安全的一类益生菌，具有增强免疫、抑菌、调节肠道菌群等益处，有报道称乳酸菌能利用亮氨酸产生醛酮等香味物质。因此，通过乳酸菌来降低饮食中亮氨酸含量并发酵一种低亮氨酸的食品，或将成为一项极具发展潜力且实现诸多健康益处的有效方式。公开号为cn116262915 a的申请，公开了一种3-异丙基苹果酸脱水酶突变体，通过将3-异丙基苹果酸脱水酶的第84位氨基酸由丙氨酸突变为亮氨酸、缬氨酸或异亮氨酸，实现缬氨酸产量均有提升，亮氨酸产量显著下降，并没有发现天然的可降低亮氨酸含量的微生物。

2、鉴于此，有必要筛选一株安全、高效、高活性降解亮氨酸的乳酸菌，并采用该菌进行后续食品发酵，以解决上述难题。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明提出一株罗伊氏粘液乳杆菌及其在降解亮氨酸含量中的应用。

2、本发明的技术方案是这样实现的：

3、一株罗伊氏粘液乳杆菌，其分类名为 limosilactobacillus reuteri，于2024年6月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc m 20241244，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。

4、本发明的罗伊氏粘液乳杆菌hngd-nn1是从内蒙古地区的奶酪中分离筛选获得，其菌落特征如下：菌落直径约2 ~3 mm，菌落呈现乳白色、菌落凸起、呈圆形，不透明，表面光滑，菌落边缘整齐，为革兰氏阳性菌，并通过扫描电镜观察到该菌体呈短杆状，单个。

5、上述的罗伊氏粘液乳杆菌的培养方法，将罗伊氏粘液乳杆菌接种于mrs培养基中32-40℃静置培养18-48 h。

6、含有上述的罗伊氏粘液乳杆菌的菌剂。

7、罗伊氏粘液乳杆菌（ limosilactobacillus reuteri）hngd-nn1不仅具有良好耐酸能力和耐胆盐能力，同时也具有抑菌和定植胃肠道的潜力。

8、上述菌剂为调节肠道、抑制致病菌的菌剂。

9、上述的罗伊氏粘液乳杆菌或上述的菌剂在食品发酵中的应用。

10、上述食品中含有亮氨酸。

11、上述食品为酸奶。

12、上述的罗伊氏粘液乳杆菌或上述的菌剂在降低食品中亮氨酸含量中的应用。

13、一种低亮氨酸酸奶的制备方法，步骤为：将上述的罗伊氏粘液乳杆菌或上述的菌剂接种至灭菌低脂乳中，并进行充分搅拌以保证其混合均匀，然后在37-42℃下培养至凝乳状态，最后将其冷藏至4℃冰箱内熟化24 h。

14、上述灭菌低脂乳中接种的菌剂，罗伊氏粘液乳杆菌的接种量为108cfu/ml。

15、本发明具有以下有益效果：

16、1、本发明的罗伊氏粘液乳杆菌hngd-nn1可用于食品发酵，用于降低食品中亮氨酸含量。在leu液体选择培养基中亮氨酸降解率为66.62%，在mrs液体培养基中菌株hngd-nn1的亮氨酸降解率49.24%。

17、2、本发明的罗伊氏粘液乳杆菌hngd-nn1具有较好的疏水性能力和自凝集能力，具有定植肠道的潜力和抑制致病菌的潜力。

18、3、本发明的罗伊氏粘液乳杆菌hngd-nn1还具有良好的发酵特性，与商用发酵剂发酵酸奶相比，罗伊氏粘液乳杆菌hngd-nn1酸奶中亮氨酸降解率高达61.27%，且采用罗伊氏粘液乳杆菌hngd-nn1具有卓越的益生功能，具体表现为酸奶中亮氨酸含量较低，菌种活性较高，易于通过胃部并定植肠道，它还能实现经济成本低的效果，使更多的人能够享受到亮氨酸限制饮食带来的益处。

技术特征：

1. 一株罗伊氏粘液乳杆菌，其分类名为limosilactobacillus reuteri，于2024年6月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc m 20241244，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。

2.权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌的培养方法，其特征在于：将罗伊氏粘液乳杆菌接种于mrs培养基中32-40℃静置培养18-48h。

3.含有权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌的菌剂。

4.根据权利要求3所述的菌剂，其特征在于：所述菌剂为调节肠道菌群、抑制致病菌的菌剂。

5.权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌或权利要求3所述的菌剂在食品发酵中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述食品中含有亮氨酸。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于：所述食品为酸奶。

8.权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌或权利要求3所述的菌剂在降低食品中亮氨酸含量中的应用。

9.一种低亮氨酸酸奶的制备方法，其特征在于，步骤为：将权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌或权利要求3所述的菌剂接种至灭菌低脂乳中，并进行充分搅拌以保证其混合均匀，然后在37-42℃下培养至凝乳状态，最后将其冷藏至4℃冰箱内熟化24h。

10. 根据权利要求9所述的低亮氨酸酸奶的制备方法，其特征在于：所述灭菌低脂乳中接种的菌剂，以108 cfu/ml为罗伊氏粘液乳杆菌的接种量。

技术总结本发明属于微生物领域，涉及食品发酵，特别是指一株罗伊氏粘液乳杆菌及其在降解亮氨酸含量中的应用。罗伊氏粘液乳杆菌分类名为Limosilactobacillus reuteri，于2024年6月17日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC M 20241244，保藏地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号。该菌能够有效降解亮氨酸，进一步研究发现该菌还具有良好的耐酸、耐胆盐能力及在胃肠道定植的潜力。此外，这是首次发现并采用乳酸菌来降解亮氨酸的方法，并通过该菌株发酵生产低亮氨酸酸奶产品。这将为肥胖、糖尿病等需要限制亮氨酸摄入的慢病人群提供一种更加安全有效的饮食解决方案，从而有助于改善人们的身体健康、促进健康生活。技术研发人员：谢岩黎,刘金杰,许晨吉,杨玉辉,杨浩,张洪鑫受保护的技术使用者：河南工业大学技术研发日：技术公布日：2024/10/10