一种快速反定型检测ABO血型的试纸条及其方法与流程

本发明涉及免疫学检测装置，特别涉及一种快速反定型检测abo血型的试纸条及其方法。

背景技术：

1、人类血液有多种血型，最常见的血型系统为abo血型，abo血型是由红细胞表面抗原和血清中的抗体两者共同决定的。a型血红细胞上含a抗原，血清中含抗b抗体；b型血红细胞上含b抗原，血清中含抗a抗体；o型血红细胞上则没有a及b抗原，血清中含抗a及抗b抗体；ab型血红细胞上含a及b两种抗原，血清中则不含抗a及抗b抗体。a抗原和抗a抗体，b抗原和抗b抗体会发生免疫结合反应，使红细胞发生凝聚，利用该原理可以检测人体血液的血型。其中，利用标准的抗a、抗b抗体检测红细胞抗原的方法，称之为正定型；利用标准的a及b抗原检测血清中的抗体，称之为反定型。正反定型同时检测，才能正确判断abo血型。

2、目前临床实验室最常用的abo血型反定型的鉴定方法是血凝试验，检测试剂为标准红细胞试剂(a型、b型和o型红细胞)，检测手段为玻片法、试管法或微柱凝集法，但存在如下缺陷：(1)标准红细胞试剂保存期短，一般为2-8℃条件下保存3个月；(2)检测时需要辅助设备，就常用的试管法来说，反应时需借助离心设备，结果判读时需要摇晃，容易发生微生物污染及溶血现象，使结果判读困难；(3)每种抗体单独检测，操作繁琐，容易导致血型鉴定出差错，甚至出现严重输血事故。

3、中国专利cn202280015658.2公开了一种血型抗原三糖偶联物在血型抗体检测中的应用，具体涉及血型抗原三糖a类似物蛋白偶联物和血型抗原三糖b类似物蛋白偶联物，偶联物质为血蓝蛋白或牛血清蛋白，应用于各类型血型抗体检测。但人abo血型系统中a抗原和b抗原的结构为六糖链，血型抗原三糖偶联物的糖链缩短会导致血型抗原和血型抗体特异性结合时容易受空间位阻的影响，导致检测灵敏度不好。因此，需要一种灵敏度更高的abo血型反定型检测方法。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明提供了一种快速反定型检测abo血型的试纸条及其方法。

2、本发明采用以下技术方案：

3、一种快速反定型检测abo血型的试纸条，包括基板，所述基板上方沿层析方向依次设有冲洗垫、指示物垫、反应膜片和吸收垫，所述冲洗垫用于承载样本冲洗液，所述指示物垫上预包被至少一种固化示踪物，所述反应膜片用于承载待测样本且所述反应膜片上预包被至少两条与所述层析方向相垂直的检测线，所述检测线包括a线和b线，所述a线上包被有a血型抗原六糖偶合物，所述b线上包被有b血型抗原六糖偶合物，所述吸收垫用于吸附通过所述反应膜片后的液体。

4、进一步地，所述待测样本为待测血清样本或待测血浆样本。

5、进一步地，所述固化示踪物为抗人igm抗体。

6、进一步地，所述a血型抗原六糖偶合物是人工合成的a血型抗原六糖与牛血清蛋白的偶联物，所述b血型抗原六糖偶合物是人工合成的b血型抗原六糖与牛血清蛋白的偶联物。

7、进一步地，所述检测线还包括ctl线，所述ctl线上包被有能与所述固化示踪物相结合的抗体。

8、进一步地，所述检测线在所述反应膜片上沿层析方向依次按ctl线、a线、b线的顺序排列，或所述检测线在所述反应膜片上沿层析方向依次按ctl线、b线、a线的顺序排列。

9、进一步地，还包括设置在所述指示物垫和所述反应膜片之间的缓冲垫。

10、进一步地，所述反应膜片为硝酸纤维膜、醋酸纤维素膜、聚乙烯膜或尼龙膜中的任意一种。

11、进一步地，所述基板为聚酯板。

12、一种快速反定型检测abo血型的方法，所述方法基于上述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，该方法包括如下步骤：

13、s1、在所述反应膜片上滴加5～10ul待测样本，所述待测样本为待测血清样本或待测血浆样本；

14、s2、在所述冲洗垫上滴加50～100ul样本冲洗液，使样本冲洗液沿着层析方向逐渐流向吸收垫；

15、s3、若所述a线显色，说明待测样本中含抗-a血型抗体，若b线显色，说明待检样本中含抗-b血型抗体，同时ctl线作为对照线，必须要显色，否则试纸条失效。

16、采用上述技术方案后，本发明与背景技术相比，具有如下优点：

17、1、本发明的试纸条采用在检测线上包被人工合成的血型抗原六糖偶合物，以代替标准红细胞，克服了现有标准红细胞试剂保存期短的缺陷，检测时，仅需一次少量加样即可判读样本中是否含有抗-a或抗-b，所需样本量少，又减少人工操作失误的风险，无需设备辅助，可室温保存，有效期长，更适用于临床血型快速检测场景。

18、2、本发明采用的a血型抗原六糖偶合物和b血型抗原六糖偶合物，结构单一不存在其他血型系统干扰，且六糖链的糖链结构更接近天然血型抗原，既保证血型抗原抗体特异性结合，又弥补了检测灵敏度不好的缺陷。

19、3、本发明的试纸条采用直接在反应膜片上滴加待测样本的方法，先使待测样本中的血型抗体和固化血型抗原结合，示踪抗人igm抗体再随着冲洗液到达检测区和血型抗体结合，由此就解决了待测样本中的其他igm类抗体(即非血型igm类抗体)与抗人igm抗体结合的问题，使得检测灵敏度更高。

技术特征：

1.一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：包括基板，所述基板上方沿层析方向依次设有冲洗垫、指示物垫、反应膜片和吸收垫，所述冲洗垫用于承载样本冲洗液，所述指示物垫上预包被至少一种固化示踪物，所述反应膜片用于承载待测样本且所述反应膜片上预包被至少两条与所述层析方向相垂直的检测线，所述检测线包括a线和b线，所述a线上包被有a血型抗原六糖偶合物，所述b线上包被有b血型抗原六糖偶合物，所述吸收垫用于吸附通过所述反应膜片后的液体。

2.如权利要求1所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述待测样本为待测血清样本或待测血浆样本。

3.如权利要求2所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述固化示踪物为抗人igm抗体。

4.如权利要求3所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述a血型抗原六糖偶合物是人工合成的a血型抗原六糖与牛血清蛋白的偶联物，所述b血型抗原六糖偶合物是人工合成的b血型抗原六糖与牛血清蛋白的偶联物。

5.如权利要求4所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述检测线还包括ctl线，所述ctl线上包被有能与所述固化示踪物相结合的抗体。

6.如权利要求5所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述检测线在所述反应膜片上沿层析方向依次按ctl线、a线、b线的顺序排列，或所述检测线在所述反应膜片上沿层析方向依次按ctl线、b线、a线的顺序排列。

7.如权利要求6所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：还包括设置在所述指示物垫和所述反应膜片之间的缓冲垫。

8.如权利要求7所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述反应膜片为硝酸纤维膜、醋酸纤维素膜、聚乙烯膜或尼龙膜中的任意一种。

9.如权利要求8所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，其特征在于：所述基板为聚酯板。

10.一种快速反定型检测abo血型的方法，其特征在于：所述方法基于如权利要求1～9所述的一种快速反定型检测abo血型的试纸条，该方法包括如下步骤：

技术总结本发明公开了一种快速反定型检测ABO血型的试纸条及其方法，试纸条包括基板，基板上方沿层析方向依次设有冲洗垫、指示物垫、反应膜片和吸收垫，冲洗垫用于承载样本冲洗液，指示物垫上预包被至少一种固化示踪物，反应膜片用于承载待测样本且反应膜片上预包被至少两条与层析方向相垂直的检测线，检测线包括A线和B线，A线上包被有A血型抗原六糖偶合物，B线上包被有B血型抗原六糖偶合物，吸收垫用于吸附通过反应膜片后的液体。本发明的试纸条在检测线上包被人工合成的血型抗原六糖偶合物，并采用直接在反应膜片上滴加待测样本的方法，克服了现有标准红细胞试剂保存期短的缺陷，使得检测灵敏度更高。技术研发人员：胡晶高,李婷婷,何萍萍受保护的技术使用者：英科新创（厦门）科技股份有限公司技术研发日：技术公布日：2024/11/14