植物乳植杆菌Mle-3应用及组合物和复合微生物制剂的制作方法

本发明涉及微生物工程，尤其涉及植物乳植杆菌mle-3应用、一种微生物组合物、以及一种复合微生物制剂及其制备方法。

背景技术：

1、由于致病菌和条件致病菌大量繁殖会引起人体各种疾病。而研究证明，益生菌具有对抗肠道病原菌与致病微生物菌群竞争粘连的独特能力，可以调节脂肪储存和刺激肠道血管生成、维持肠道菌群的稳定、减少乳糖不耐症、预防抗生素诱发的腹泻、预防结肠癌、提高免疫力、降胆固醇、以及治疗抑郁症、帕金森症等与大脑神经中枢有关的疾病等。

2、而氧化应激及其导致的氧化损伤现象已成为备受关注的机体病变。乳酸菌是一类革兰氏阳性、可发酵碳水化合物并且产生大量乳酸的细菌总称，是目前公认安全的食用菌种。现有研究表明乳酸菌作为肠道常驻菌群，可以直接在机体氧化损伤的重点部位肠道发挥抗氧化作用，维持肠道处于氧化还原平衡状态。

3、乳酸菌在机体中发挥抗氧化作用主要通过以下途径：通过自身的抗氧化酶系统；形成具有还原活性或调节氧化应激的大分子或小分子代谢物；通过代谢产物转导细胞信号的方式调节氧化还原平衡调节因子的表达水平；调节肠道菌群抑制氧化应激状态的形成。

4、虽然机体可以通过膳食补充抗氧化物质，有效增强机体的抗氧化能力，但许多化学合成的抗氧化剂存在安全性问题。而乳酸菌作为天然的抗氧化物，因具有降低活性氧生成的作用而受到越来越多的关注。

5、现在虽然筛选出多株具有抗氧化功能的乳酸菌，但其往往经口进入机体，稳定性不足，而且在对机体抗氧化效果不足；同时其益生功能单一、益生功能不明确，这都限制了乳酸菌的实际功效。

6、因此，筛选出具有高抗氧化能力的乳酸菌株，并增强其稳定性与粘附性，对于增强机体抗氧化能力具有十分重要的意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的植物乳植杆菌mle-3应用、一种微生物组合物、以及一种复合微生物制剂及其制备方法。

2、植物乳植杆菌（ lactiplantibacillus plantarum）mle-3在如下（1）-（5）任一项的应用：

3、（1）制备抗氧化产品；

4、（2）制备抗衰老产品；

5、（3）制备修复结肠粘膜的产品；

6、（4）制备抑制肠道中螺杆菌属（ helicobacter）或/和未分类的鼠杆状菌科（ unclassified_muribaculaceae）生长的产品；

7、（5）制备促进肠道中普雷沃氏菌科ucg-001家族（ prevotellaceae_ucg_001）或/和普雷沃氏菌科nk3b31家族（ prevotellaceae_nk3b31_group）生长的产品。

8、优选地，植物乳植杆菌mle-3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.30556。

9、优选地，产品为微生物制剂、保健食品或药品。

10、一种微生物组合物，包括：所述植物乳植杆菌mle-3。

11、优选地，上述微生物组合物还包括：植物乳杆菌（ lactiplantibacillus  plantarum）mll-6、短双歧杆菌（ bifidobacterium breve）。

12、优选地，上述微生物组合物中，植物乳植杆菌mle-3的活菌数为5-15×109 cfu/g，植物乳杆菌mll-6的活菌数为2-6×109 cfu/g，短双歧杆菌的活菌数为9-14×108 cfu/g。

13、一种复合微生物制剂，其原料按质量份包括：上述微生物组合物1-2份，海藻酸钠1-2份，端羧基聚酰胺胺1-3份，谷胱甘肽0.1-1份，活性多糖0.1-0.5份，氯化钙0.08-0.24份。

14、优选地，活性多糖为松花粉多糖。

15、上述复合微生物制剂的制备方法，包括如下步骤：

16、s1、将谷胱甘肽加入至盐酸中搅拌均匀，向其中加入松花粉多糖，80-90℃搅拌10-20min，冷却至室温，过滤，洗涤，真空干燥得到活化多肽；

17、s2、将上述微生物组合物、海藻酸钠、端羧基聚酰胺胺、活化多肽加入至水中搅拌20-30min，得到水相材料；

18、s3、持续搅拌油相，在持续搅拌过程中依次加入水相材料和氯化钙水溶液，加入完全后继续搅拌5-15min，40-45℃静置2-4h，过滤，洗涤，冷冻干燥。

19、优选地，s3中，油相为花生油、菜籽油、大豆油、玉米油、山茶油、核桃油、橄榄油、棕榈油、葡萄籽油、葵花籽油中至少一种。

20、优选地，s3中，氯化钙水溶液的质量分数为8-12%。有益效果:本发明提供上述植物乳植杆菌mle-3，其抗氧化能力强，远远高于现有的菌株，其可增强总抗氧化能力，降低血清中羟自由基、超氧阴离子和丙二醛含量，提高血清中谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶的活性，从而提高机体免疫力。

21、本申请人发现：采用植物乳植杆菌mle-3与植物乳杆菌mll-6、短双歧杆菌复配，表现出较好的协同行为，使所得微生物组合物在肠道中定植并在机体中发挥极强的抗氧化活性。

22、本发明在谷胱甘肽上接枝活性多糖，既可显著增强谷胱甘肽稳定性，又与端羧基聚酰胺胺复配，两者通过键合形成网络，有效对微生物组合物捕捉，并在海藻酸钠的配合下固化，形成空间结构不仅对微生物组合物稳定负载，进行有效缓释。

23、本发明所得复合微生物制剂胆盐耐受性好，同时在人工胃液、肠液中菌株存活率高，远远高于现有菌株，并能长期稳定发挥微生物组合物的活性，同时粘附性能优异，生长和定植效果好，显著增强益生菌抗氧化活性，能够广泛应用在微生物制剂、食品、保健食品和药品中，提高机体抗氧化能力和免疫力，适于大规模推广应用。

技术特征：

1.植物乳植杆菌（lactiplantibacillus plantarum）mle-3在如下（1）-（5）任一项的应用：

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，植物乳植杆菌mle-3保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.30556。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，产品为微生物制剂、保健食品或药品。

4.一种微生物组合物，其特征在于，包括：如权利要求1所述应用中植物乳植杆菌mle-3。

5.根据权利要求4所述微生物组合物，其特征在于，还包括：植物乳杆菌（lactiplantibacillus plantarum）mll-6、短双歧杆菌（bifidobacterium breve）；

6.一种复合微生物制剂，其特征在于，其原料按质量份包括：如权利要求4或5所述微生物组合物1-2份，海藻酸钠1-2份，端羧基聚酰胺胺1-3份，谷胱甘肽0.1-1份，活性多糖0.1-0.5份，氯化钙0.08-0.24份。

7.根据权利要求6所述复合微生物制剂，其特征在于，活性多糖为松花粉多糖。

8.一种如权利要求6或7所述复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

9.根据权利要求8所述复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，s3中，油相为花生油、菜籽油、大豆油、玉米油、山茶油、核桃油、橄榄油、棕榈油、葡萄籽油、葵花籽油中至少一种。

10.根据权利要求8所述复合微生物制剂的制备方法，其特征在于，s3中，氯化钙水溶液的质量分数为8-12%。

技术总结本发明涉及微生物工程技术领域，具体公开了植物乳植杆菌Mle‑3应用、一种微生物组合物、以及一种复合微生物制剂及其制备方法。植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）Mle‑3在如下（1）‑（5）任一项的应用：（1）制备抗氧化产品；（2）制备抗衰老产品；（3）制备修复结肠粘膜的产品；（4）制备抑制肠道中螺杆菌属（Helicobacter）或/和未分类的鼠杆状菌科（unclassified_Muribaculaceae）生长的产品；（5）制备促进肠道中普雷沃氏菌科UCG‑001家族或/和普雷沃氏菌科NK3B31家族生长的产品。技术研发人员：黄大生,刘伟,唐艺婧,高红,王栋,陈雷受保护的技术使用者：杭州菌吾细研生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/11/18