一种凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法

本发明涉及一种益生菌微胶囊的制备方法，特别是涉及一种凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，它属于高分子材料加工。

背景技术：

1、随着科技的进步和人们生活水平的提高，对营养食品的要求也日益严格，传统的营养食品只能维持营养成分，不能发挥一些功效，从而无法满足人们对于健康的诉求。近年来，益生菌因为其独特的功能性质成为世界研究的新宠，但是其较低消化通过性和储藏稳定性成了在食用和加工储藏过程中的巨大问题。

2、凝结芽孢杆菌（ bacillus coagulans）是益生菌中的一种，它具有内生芽孢、助消化、防止便秘和产生代谢产物的优点，其代谢产物具有抗炎、降低血脂等功能性质。但是，凝结芽孢杆菌只有在肠道内部定植发酵才能发挥出作用，已有研究发现直接食用凝结芽孢杆菌的效果十不存一。尽管凝结芽孢杆菌可提升其在消化系统中的存活率，可是低 ph 的胃酸、各种消化酶及胆盐仍能对其产生较大破坏，使其无法到达肠道定植发酵而失去活性。单纯的凝结芽孢杆菌具有良好的抗炎、抗氧化的功效，并且可在体内定植发酵。但是胃酸会迫使其变为孢子形态，需进行萌发后才能更好地在肠道参与竞争进行定殖。

3、现有技术中，益生菌在食用和加工过程中存在一定的局限性。对益生菌进行包埋技术是解决当前问题的主要手段，将不同蛋白质、多糖、脂肪的种类按不同的比例可制成物理、机械性能不同的壁材来满足不同益生菌的活性需求，因而益生菌微胶囊近几年来得到了迅速发展。 中国专利，授权公告号为cn112544977b，公开了一种益生菌微胶囊的制备方法，目的是提高益生菌的活性和稳定性能；中国专利，授权公告号为cn106993813b，公开了一种益生菌微胶囊的制备方法，目的也是提高益生菌的活性和稳定性能。可见将益生菌制备成微胶囊后可以提高其稳定性。有检索出的多篇文献可见，将益生菌制成微胶囊可以采用不同的方法及壁材，并且使用的菌种也不相同。不是所有的益生菌都适用于同一壁材及制备方法，不同的制备方法及壁材会直接影响益生菌包埋效果及稳定性。

4、因此，选择适合凝结芽孢杆菌的壁材，研发出适合凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，是本领域技术人员急需解决的技术问题。经检索未查询到与本申请相同或类似的文献公开。

技术实现思路

1、本发明就是为了解决上述技术问题而提供了凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，它提高了凝结芽孢杆菌的存活率和稳定性，制备的凝结芽孢杆菌微胶囊具有较高抗性和较强阻隔性，克服了凝结芽孢杆菌在食用及储藏中的局限性。

2、为了解决上述技术问题，本发明是通过下述技术方案实现的：

3、一种凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，它包括下述步骤：取活化后的凝结芽孢杆菌1质量份，溶于97质量份无菌生理盐水中，制成凝结芽孢杆菌悬液，将经过灭菌处理的1质量份菊粉和1质量份黄原胶加入到凝结芽孢杆菌悬液当中进行包埋处理，静置完全溶解，之后经过均质处理制备成初级液体微胶囊，将初级液体微胶囊放入低温冰箱预冷，将液体形态变为冰晶固体形态，而后将冰晶形态的微胶囊放入冻干机中，冻干制成凝结芽孢杆菌微胶囊。

4、优选的，上述活化后的凝结芽孢杆菌制备方法如下：将凝结芽孢杆菌冻干粉1质量份溶解在99质量份的无菌生理盐水中，并接种到已经灭好菌的 mrs 平板培养基中，37℃培养 24h制成种子液，挑取一环种子液，接种到 mrs 肉汤培养基中并置于摇床 37℃培养48h活化完成。

5、优选的，上述包埋处理是取凝结芽孢杆菌悬液在4℃、2500r/min 下离心10min，收集沉淀，并将沉淀分散在所述生理盐水中。

6、优选的，上述静置时间为4 h。

7、优选的，上述冻干时间为48 h。

8、优选的，上述均质处理是12000 r/min 均质处理2 min。

9、优选的，上述灭菌是将菊粉和黄原胶在121℃高温灭菌15 min。

10、优选的，上述预冷是将初级液体微胶囊放入-80℃低温冰箱预冷8-12h。

11、由于采用上述技术方案，使得本发明具有如下特点和效果：

12、本专利发明了凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，对凝结芽孢杆菌进行活化和微囊化。采用菊粉和黄原胶制备成其壁材，以无菌生理盐水为溶剂，向其加入凝结芽孢杆菌，通过均质得到均匀溶液，而后冷冻干燥得到微胶囊。本发明原料来源广泛、成本低廉，制备的凝结芽孢杆菌微胶囊具有较高抗性和较强阻隔性能，克服了凝结芽孢杆菌在食用及储藏中的局限性，弥补了在加工过程和储藏过程中容易死亡、活性丧失的缺陷。本发明通过菊粉与黄原胶在外层结合成致密的外壳，可以很好的保证凝结芽孢杆菌以较高的活性穿过胃肠道的消化恶劣环境。本发明采用的壁材主料为菊粉，为大分子膳食纤维和益生元，满足现在社会对于无糖低卡的饮食追求，并且更好的保持凝结芽孢杆菌的活性。黄原胶作为稳定剂，确保制备后的微胶囊在冻干后不出现不致密的粉末状。提高了凝结芽孢杆菌的存活率和稳定性。

技术特征：

1.一种凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于包括下述步骤：取活化后的凝结芽孢杆菌1质量份，溶于97质量份无菌生理盐水中，制成凝结芽孢杆菌悬液，将经过灭菌处理的1质量份菊粉和1质量份黄原胶加入到凝结芽孢杆菌悬液当中进行包埋处理，静置完全溶解，之后经过均质处理制备成初级液体微胶囊，将初级液体微胶囊放入低温冰箱预冷，将液体形态变为冰晶固体形态，而后将冰晶形态的微胶囊放入冻干机中，冻干制成凝结芽孢杆菌微胶囊。

2.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述活化后的凝结芽孢杆菌制备方法如下：将凝结芽孢杆菌冻干粉1质量份溶解在99质量份的无菌生理盐水中，并接种到已经灭好菌的 mrs 平板培养基中，37℃ 培养 24h制成种子液，挑取一环种子液，接种到 mrs 肉汤培养基中并置于摇床 37℃培养 48h活化完成。

3.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述的包埋处理是取凝结芽孢杆菌悬液在4℃、2500r/min 下离心10min，收集沉淀，并将沉淀分散在所述生理盐水中。

4.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述的静置时间为4 h。

5.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述的冻干时间为48 h。

6.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述的均质处理是12000 r/min 均质处理2 min。

7.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述的灭菌是将菊粉和黄原胶在121℃高温灭菌15 min。

8.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，其特征在于所述的预冷是将初级液体微胶囊放入-80℃低温冰箱预冷8-12h。

技术总结本发明涉及一种益生菌微胶囊的制备方法，特别是涉及一种凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法。它是采用菊粉与黄原胶结合包埋凝结芽孢杆菌微胶囊的制备方法，对凝结芽孢杆菌进行活化和微囊化，采用菊粉和黄原胶制备成其壁材，以无菌生理盐水为溶剂，向其加入凝结芽孢杆菌，通过均质得到均匀溶液，而后冷冻干燥得到微胶囊。本发明提高了凝结芽孢杆菌的存活率和稳定性，制备的凝结芽孢杆菌微胶囊具有较高抗性和较强阻隔性，克服了凝结芽孢杆菌在食用及储藏中的局限性。技术研发人员：解梦汐,于淼,郭应许受保护的技术使用者：辽宁省农业科学院技术研发日：技术公布日：2024/5/8